表达非洲猪瘟病毒B602L-B646L蛋白的重组腺病毒及构建方法技术

本发明专利技术公开了一种表达非洲猪瘟病毒B602L

【技术实现步骤摘要】
表达非洲猪瘟病毒B602L
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B646L蛋白的重组腺病毒及构建方法


[0001]本专利技术涉及基因工程
，特别是涉及一种表达非洲猪瘟病毒B602L
‑
B646L蛋白的重组腺病毒及构建方法。

技术介绍

[0002]非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)感染引起的一种急性、烈性、高度接触性传染病。临床表现为发热、皮肤发绀、淋巴结、肾、胃肠黏膜明显出血等。
[0003]非洲猪瘟病毒是非洲猪瘟病毒科、非洲猪瘟病毒属的唯一成员，也是目前唯一的DNA虫媒病毒，通常认为只有一个血清型，国际上根据ASFV B646L基因末端一段478bp的核酸序列，将ASFV分为24个基因型，我国多属于基因Ⅱ型。非洲猪瘟病毒可通过家猪、野猪和软蜱进行传播，主要攻击猪单核、巨噬细胞。病毒粒子直径为175
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215纳米，呈20面体对称，有囊膜，结构由内到外分别是类壳、核壳、内膜、衣壳和外囊膜。基因组为双股线状DNA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种表达非洲猪瘟病毒B602L
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B646L蛋白的重组腺病毒载体，其特征在于，以pAD
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CMV
‑3×
FLAG腺病毒载体为基础，引入B602L
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B646L基因以构建重组腺病毒载体pAD
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CMV
‑
EGFP
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B602L
‑
B646L；所述B602L
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B646L基因具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。2.一种权利要求1所述的表达非洲猪瘟病毒B602L
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B646L蛋白的重组腺病毒载体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)合成B602L
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B646L基因，并在B602L
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B646L基因的起始密码子前添加CACC四个碱基；(2)将步骤(1)得到的B602L
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B646L基因和pENTRE
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EGFP
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TOPO载体进行TOPO克隆，得到pENTR
‑
EGFP
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ASFV
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B602L
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B646L；(3)将步骤(2)得到的pENTR
‑
EGFP
‑
ASFV
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B602L
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B646L通过LR重组反应于腺病毒骨架载体pAD
‑
CMV<...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱鸿飞，贾红，鑫婷，郭晓宇，袁维峰，崔帅，王洋，
申请(专利权)人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：