建立具有再生特性的类器官培养体系制造技术

本发明专利技术提供了用于获得和/或培养增生性哺乳动物类器官的组合物，其中所述组合物包括组蛋白去乙酰化抑制剂(例如VPA)和EZH2抑制剂(例如EPZ6438)。更进一步地，所述组合物还包括BMP信号抑制剂(例如LDN193189)，WNT激动剂(例如GSK

【技术实现步骤摘要】
建立具有再生特性的类器官培养体系


[0001]本专利技术涉及哺乳动物类器官，特别涉及增生性哺乳动物类器官、其用途以及获得它们的方法。

技术介绍

[0002]类器官技术的发展允许干细胞在体外进行自组织，模拟了体内组织的复杂结构和功能。目前已经在多种组织器官上开发了类器官培养技术，这为研究分化发育和疾病治疗提供了宝贵的工具。然而，传统类器官培养技术主要反映干细胞及分化细胞在常态下的特征，在反映损伤后的体内再生过程方面有很大的局限性。越来越多的证据表明，损伤诱导的再生组织与正常的稳态组织有很大的不同，前者涉及到终末细胞的去分化和独特的损伤诱导的干细胞的出现。为了模拟这些复杂的过程，需要开发新的能够反映损伤相关再生特征的体外类器官培养系统。在此，我们建立了一种新的培养条件，能够在体外诱导和维持损伤相关的再生特征。

技术实现思路

[0003]三维类器官具有模拟生理状态下组织结构和功能的能力，为体外建模和疾病提供了宝贵的工具。然而，传统的类器官培养主要重建了组织干细胞及其衍生物的稳态，很少反映体内损伤相关再生的复杂过程。在此，我们建立了一种本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.组蛋白去乙酰化抑制剂(例如VPA)和EZH2抑制剂(例如EPZ6438)在用于活化损伤性干细胞中的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其中所述损伤性干细胞为哺乳动物(例如小鼠或人)损伤性干细胞。3.根据权利要求1所述的用途，其中，所述损伤性干细胞以显著高水平表达标志物Tert,Bmi1,Hopx,Cxadr,CD44,Lgr5,Clu、Anxa1、Basp1中的一种或多种。4.根据权利要求1所述的用途，其中所述组蛋白去乙酰化抑制剂选自由以下各项组成的组中的一种或多种：VPA，MS
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275,SAHA，LBH589,TSA,MGCD0103,MC1568,LAQ824,PCI
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34051,RGFP966,AR
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42,CI994,丁酸钠,M344,Tubacin,Scriptaid,Tubastatin A,LMK235；优选为VPA；任选地，所述EZH2抑制剂选自由以下各项组成的组中的一种或多种：EPZ6438，EPZ011989,EBI
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2511,EPZ5676,EPZ005687,GSK343,UNC 1999,GSK126,GSK503,EI1,PF
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06726304；优选为EPZ6438。5.用于获得和/或培养增生性哺乳动物类器官的组合物，其特征在于，包括(1)组蛋白去乙酰化抑制剂(例如VPA)，和(2)EZH2抑制剂(例如EPZ6438)。6.根据权利要求5所述的组合物，其特征在于，还包括以下组分：(3)BMP信号抑制剂(例如LDN193189)，(4)WNT激动剂(例如GSK
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3抑制剂XV、R
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Spondin1)，(5)双重p38 MAPK/Tie
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2抑制剂(例如Pexmetinib)，(6)EGF激动剂(例如EGF)，和/或(7)FGF激动剂(例如bFGF)。7.根据权利要求5所述的组合物，其中，所述(1)组蛋白去乙酰化抑制剂选自由以下各项组成的组中的一种或多种：VPA，MS
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275,SAHA，LBH589,TSA,MGCD0103,MC1568,LAQ824,PCI
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34051,RGFP966,AR
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42,CI994,丁酸钠,M344,Tubacin,Scriptaid,Tubastatin A,LMK235；优选为VPA；优选地，所述(1)组蛋白去乙酰化抑制剂的浓度为100μM
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2500μM。8.根据权利要求5所述的组合物，其中，所述(2)EZH2抑制剂选自由以下各项组成的组中的一种或多种：EPZ6438，EPZ011989,EBI
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2511,EPZ5676,EPZ005687,GSK343,UNC 1999,GSK126,GSK503,EI1,PF
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06726304；优选为EPZ6438；优选地，所述(2)EZH2抑制剂的浓度为0.4μM
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10μM。9.根据权利要求6所述的组合物，其中，所述(3)BMP信号抑制剂选自由以下组成的组中的一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓宏魁，屈默龙，熊亮，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：