博落回提取物作为JNK-MAPK信号通路抑制剂及其应用制造技术

本发明专利技术涉及博落回提取物作为JNK

【技术实现步骤摘要】
博落回提取物作为JNK
‑
MAPK信号通路抑制剂及其应用


[0001]本专利技术属于生物、医药
，尤其是涉及一种基于博落回提取物作为JNK
‑
MAPK信号通路抑制剂、应用


技术介绍

[0002]组织损伤和微生物入侵等可引起机体炎症，炎症反应是机体免疫系统对外界刺激的防御性反应，是许多病理生理过程的重要组成部分。炎症反应通常是自限性的，并在促炎信号和抗炎信号之间保持平衡。充分的炎症反应可以让机体远离严重的组织损伤，但长期升高的炎症介质水平可导致机体信号通路受损，促进病原体入侵和疾病的发生，过度的炎症对宿主有潜在的危险。为了维持免疫稳态，控制炎症反应对宿主避免组织损伤至关重要。
[0003]肠道上皮细胞可以吸收水分和营养物质，并作为抵抗微生物的第一道屏障，还可以诱导和调节免疫反应。来源于空肠的非瘤猪肠上皮细胞系(Porcine intestinal epithelial cell line J2，IPEC
‑
J2)与原始组织有很强的相似性，适用于初步研究，是一种被广泛接受的肠道体外模型。脂多糖(LPS)是一种内毒素，由革兰氏阴性菌产生，能够通过激活多种信号通路来诱导免疫紊乱，研究人员经常使用它来诱导炎症反应。
[0004]丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen
‑
activated Protein Kinase，MAPK)是一组能被不同的细胞外刺激，如细胞因子、神经递质、激素、细胞应激及细胞黏附等激活的丝氨酸
‑<br/>苏氨酸蛋白激酶。MAPK信号通路被认为是与调节炎症介质相关的真核细胞信号传输网络的一部分，是调节炎症反应的经典信号通路。MAPKs蛋白(包括ERK、JNK和p38蛋白激酶)被激活后作用于各自的底物，产生炎症因子，调节炎症反应。细胞因子在调节炎症反应中起着至关重要的作用。促炎细胞因子如TNF
‑
α、IFN
‑
γ是重要的炎症反应介质，可提高内皮细胞通透性，加速细胞凋亡，引发炎症级联反应，导致器官功能障碍，直接或间接地参与一系列病理过程，在先天性免疫反应中发挥重要作用。
[0005]博落回(Macleaya cordata)是一种世界范围内广泛使用的药用植物，其药用历史有1000多年。博落回的主要活性成分为生物碱。目前，已从博落回中鉴定或分离出超过147种生物碱，包括血根碱(Sanguinarine，SA)、白屈菜红碱(Chelerythrine，CHE)、原阿片碱(Protopine，PRO)、别隐品碱(Allocryptopine，ALL)、小檗碱(Berberine，BER)等，根据化学结构，它们大多属于异喹啉类生物碱。长久以来大量的研究发现博落回提取物(Macleaya cordata extract，MCE)及其有效成分具有抗菌、抗炎、抗氧化、抗癌、杀虫、保护肝脏、提高免疫力等多种作用功效。虽然MCE已被证实具有抗炎活性，但MCE抗炎活性的作用机制尚不完全清楚。目前对MCE或其活性成分抗炎机制的研究报道较少，并且研究的内容多数集中在NF
‑
κB信号通路，对MAPK信号通路的研究报告相对更少，对博落回提取物通过抑制JNK
‑
MAPK信号通路进行仔猪肠炎防治方面的研究尚未见报道。

技术实现思路

[0006]为了研究MCE作为JNK
‑
MAPK信号通路抑制剂在制备防治仔猪肠炎药物方面的应
用，本研究利用LPS诱导的IPEC
‑
J2细胞作为炎症模型，研究MCE的抗炎活性及其对JNK
‑
MAPK信号通路的抑制作用。本专利技术提供一种博落回提取物作为JNK
‑
MAPK信号通路抑制剂及其应用。此外，本专利技术还提供一种具有抗炎活性的JNK
‑
MAPK通路抑制剂潜在物质的体外筛选方法。
[0007]本专利技术采用如下技术方案实现。
[0008]一种信号通路抑制剂，本专利技术所述的信号通路抑制剂为基于博落回提取物作为JNK
‑
MAPK信号通路抑制剂。
[0009]本专利技术所述的博落回提取物来源于罂粟科植物博落回，从博落回的地上部分干燥之后提取制备而成。
[0010]本专利技术所述的信号通路抑制剂的应用为，制造抗炎药物。
[0011]本专利技术的应用包括制造通过抑制JNK
‑
MAPK信号通路从而降低促炎介质表达的药物。
[0012]本专利技术的应用包括制造抑制促炎介质释放而发挥抗炎作用的药物。
[0013]本专利技术所述的应用所针对的促炎介质为TNF
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α、IFN
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γ。
[0014]本专利技术所述的应用所针对的炎症为由LPS诱导产生的仔猪肠道炎症。
[0015]体外筛选具有抗炎活性的JNK
‑
MAPK通路抑制剂潜在物质的方法，包括步骤：
[0016](1)试验分组为对照组，炎症模型组，试验组；对照组即正常条件下培养的细胞组；炎症模型组即通过用LPS刺激细胞，引起促炎症因子升高等炎症反应的细胞组；试验组即分别向炎症细胞模型中加入不同浓度的待检测物质的细胞组；
[0017](2)分别检测各组样本中炎性因子表达水平和JNK
‑
MAPK蛋白磷酸化水平；如果与炎症模型组的样本相比，加入了待检测的物质的样本中促炎因子表达水平降低，则该物质是具有抗炎活性的潜在物质；如果加入了待检测的物质的样本中JNK
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MAPK蛋白的磷酸化水平也降低，则是潜在的具有抗炎活性的JNK
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MAPK信号通路抑制剂。
[0018]本专利技术的有益效果为，1)本专利技术首次证实了博落回提取物抑制了IPEC
‑
J2细胞JNK
‑
MAPK信号通路。2)本专利技术包括利用抑制JNK
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MAPK信号通路降低促炎介质表达的原理方法生产制造相关抗炎药品。3)本专利技术为后期开展与JNK
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MAPK信号通路相关的抗炎因子、抗炎对象进行更深层次的研究奠定了坚实的理论基础。
[0019]下面结合附图和具体实施方式本专利技术做进一步解释。
附图说明
[0020]图1不同浓度MCE对IPEC
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J2细胞活力的影响；其中，数据柱形标注不同小写字母表示差异显著(P&lt;0.05)，不同大写字母表示差异极显著(P&lt;0.01)，无字母或字母完全相同表示差异不显著(P&gt;0.05)。
[0021]图2不同浓度MCE对LPS处理IPEC
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J2细胞TNF
‑
α分泌量的影响；其中，数据柱形标注不同小写字母表示差异显著(P&lt;0.05)，不同大写字母表示差异极显著(P&lt;0.01)，无字母或字母完全相同表示差异不显著(P&gt;0.本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种信号通路抑制剂，其特征在于，所述的信号通路抑制剂为基于博落回提取物作为JNK
‑
MAPK信号通路抑制剂。2.根据权利要求1所述的信号通路抑制剂，其特征在于，所述的博落回提取物来源于罂粟科植物博落回，从博落回的地上部分干燥之后提取制备而成。3.权利要求1或2所述的信号通路抑制剂的应用，其特征在于，制造抗炎药物。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，该应用为，制造通过抑制JNK
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MAPK信号通路从而降低促炎介质表达的药物。5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，该应用为，制造抑制促炎介质释放而发挥抗炎作用的药物。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，该应用为，所针对的促炎介质为TNF
‑
α、IFN
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γ。7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，该应用为...

【专利技术属性】
技术研发人员：信吉阁，韩佃刚，李静，杨云庆，郭荣富，计乔平，张春勇，李美荃，车丽涛，安清聪，董俊，
申请(专利权)人：云南农业大学，
类型：发明
国别省市：