一种有效直观可视化检测蛋白清洗效果的方法技术

本发明专利技术公开了一种有效直观可视化检测蛋白清洗效果的方法，其包括：标记修饰被检测蛋白，以使得所述被检测蛋白被显示，使标记修饰后的被检测蛋白附着于镜片上，在显示设备下观测该被检测蛋白于镜片上的附着情况，获得原始蛋白含量对照图，以该表面附着有被检测蛋白的镜片设置实验组：通过清洗设备配合电泳解离液清洗所述表面附着有被检测蛋白的镜片，以降解所述被检测蛋白，清洗完成后在显示设备下观测该被检测蛋白于镜片上的附着情况，获得剩余蛋白含量检测图。通过本发明专利技术所述的有效检测蛋白清洗效果的方法可以定量定性的检测出镜片泪蛋白的降解情况，证明镜片清洗设备的去蛋白能力，为用户提供实验检测数据，保障用户消费使用安全。用安全。用安全。

【技术实现步骤摘要】
一种有效直观可视化检测蛋白清洗效果的方法


[0001]本专利技术涉及生物蛋白检测领域，尤其涉及一种有效直观可视化检测角膜接触镜上泪蛋白清洗效果的方法。

技术介绍

[0002]角膜接触镜如何除蛋白的问题困扰了行业半个多世纪，引发了各国的眼视光行业对接触镜佩戴安全的高度重视。我国也因角膜接触镜上的角膜感染案例频发，从而将接触镜在2012年便列入第三类医疗器械类，作为高风险管理，其原因在于：接触镜材质结构有大量肉眼不见的纤维透痒孔，人眼时刻分泌大量的泪液，泪液里含有大量泪蛋白，泪蛋白极易渗透到纤维透痒孔中，造成镜片DK值降低(透氧率)，造成角膜缺氧、水肿等症状，严重的会造成角膜受损，细菌感染，角膜炎症甚至是视力受损等问题。
[0003]为了有效清除接触镜表面的泪蛋白，保障消费者的眼部安全，市场也推出了多种用于去除角膜接触镜表面泪蛋白的方法，但由于肉眼不可见泪蛋白是否被完全有效的洗脱降解，逐渐的蛋白检测方法就被重视发展起来，以使得通过科学检测有效验证是否蛋白被完全降解，但是现阶段市场上的角膜接触镜有效除蛋白的检测方法具有局限性，无法精准定量定性测得接触镜清洗后的蛋白残留，因此其检测结果不全面，仅具有一定的参考意义，其并不能成为定量定性检测蛋白降解程度的专业检测依据。
[0004]因此，亟需提出一种新的技术方案来解决上述问题。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是解决现有技术中存在的问题，提供一种有效直观可视化检测角膜接触镜上泪蛋白清洗效果的方法，采用的技术方案如下：
[0006]一种有效直观可视化检测蛋白清洗效果的方法，其包括：
[0007]标记修饰被检测蛋白，以使得所述被检测蛋白被显示；
[0008]使标记修饰后的被检测蛋白附着于镜片上，在显示设备下观测该被检测蛋白于镜片上的附着情况，获得原始蛋白含量对照图；
[0009]通过清洗设备配合电泳解离液清洗表面附着有被检测蛋白的镜片，在显示设备下观测清洗后的被检测蛋白于镜片上的附着情况，获得剩余蛋白含量检测图；
[0010]将所述原始蛋白含量对照图与所述剩余蛋白含量检测图进行对比，得到被检测蛋白被降解的结果。
[0011]在一个进一步的实施例中，还包括设置一组对照组，具体包括：
[0012]将该表面附着有被检测蛋白的镜片浸泡于所述电泳解离液中，浸泡时间与清洗时间一致，浸泡完成后在显示设备下观测被检测蛋白于镜片上的附着情况，获得浸泡剩余蛋白含量检测图；
[0013]进一步的，将浸泡剩余蛋白含量检测图与所述剩余蛋白含量检测图进行对比，得到被检测蛋白被降解的结果。
[0014]进一步的，所述被检测蛋白包括被标记修饰的荧光蛋白，通过荧光蛋白使得所述被检测蛋白通过荧光显示。
[0015]进一步的，使标记修饰后的被检测蛋白附着于镜片上，在显示设备下观测该被检测蛋白于镜片上的附着情况，获得原始蛋白含量对照图，具体包括：
[0016]取0.5mg/mL的荧光蛋白20μL，将所述荧光蛋白置于镜片上，且使得所述荧光蛋白附着在所述镜片表面，
[0017]将表面附着有所述荧光蛋白的镜片在紫外灯下观察，镜片表面有荧光显示，获得原始蛋白含量对照图；
[0018]进一步的，通过清洗设备配合电泳解离液清洗表面附着有被检测蛋白的镜片，以降解所述被检测蛋白，具体包括：
[0019]将表面附着有所述荧光蛋白的镜片置于清洗设备的清洗槽内，并配合电泳解离液进行清洗，以降解所述荧光蛋白，所述镜片上的荧光蛋白在所述清洗槽中被电泳解离，所述荧光蛋白降解；
[0020]进一步的，在显示设备下观测清洗后的被检测蛋白于镜片上的附着情况，获得剩余蛋白含量检测图，具体包括：
[0021]在紫外灯下观测所述镜片表面，镜片表面无荧光显示，获得所述剩余蛋白含量检测图。
[0022]进一步的，将所述荧光蛋白粘附于镜片表面后于25℃避光放置48小时，使得所述荧光蛋白附着在所述镜片表面。
[0023]进一步的，所述原始蛋白含量对照图中所述镜片表面有荧光显示，
[0024]进一步的，所述剩余蛋白含量检测图中所述镜片表面无荧光显示，或有荧光显示，且该荧光显示的范围比所述原始蛋白含量对照图中的荧光范围小，
[0025]进一步的，将所述原始蛋白含量对照图与所述剩余蛋白含量检测图中的荧光范围进行对比，可见所述荧光蛋白在清洗设备配合电泳解离液的清洗下被降解。
[0026]进一步的，所述浸泡剩余蛋白含量检测图中镜片表面有荧光，
[0027]进一步的，所述剩余蛋白含量检测图中所述镜片表面无荧光显示，或有荧光显示，且该荧光显示的范围比所述浸泡剩余蛋白含量检测图中的荧光范围小，
[0028]进一步的，将所述对照组获得的浸泡剩余蛋白含量检测图与所述实验组获得的剩余蛋白含量检测图进行对比，得到所述电泳解离液在配合清洗设备电泳解离的条件下才具有降解蛋白效果的结论。
[0029]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果中的一个或多个：
[0030]1.本专利技术提供一种有效直观可视化检测蛋白清洗效果的方法，通过标记修饰蛋白可检测对蛋白的清除情况，为了方便观察蛋白在镜片上的残留情况，我们用绿色荧光蛋白对3N设备的电泳解离清除效果进行了检测，通过紫外灯可以对绿色荧光蛋白进行观测，若清洗后有残留蛋白，则在紫外灯下可发现镜片表面有绿色荧光，因此，这种检测方法可对蛋白降解情况形成直观的视觉映像，实现的定性检测。
[0031]2.本专利技术所述的检测方法可以用来检测市售的隐形眼镜清洗设备及护理液对镜片上泪蛋白的降解效果，实验得到的数据可以为消费者提供指导性意见，保障消费者的健康安全。
附图说明
[0032]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其它附图。
[0033]图1为验证例2中用12％SDS-PAGE检测3N护理液对溶菌酶的降解情况得到的电镜图；
[0034]图2为验证例2中用15％SDS-PAGE检测市场商用硬性角膜接触镜除蛋白液对溶菌酶的降解情况得到的电镜图；
[0035]图3为验证例3中将蛋白加到镜片上，25℃吸附48小时后紫外灯下观察的电镜图，其中左边的镜片(a)、右边的镜片(b)为相同条件下的实验镜片；
[0036]图4为对图3中的镜片(a)和镜片(b)进行对比实验后得到的蛋白荧光检测图，其中左边的镜片(a1)为对图3中的镜片(a)进行电泳后得到的，右边的镜片(b1)为对图3中的镜片(b)进行电泳后得到的。
具体实施方式
[0037]下面将结合本专利技术实施例的附图，对本专利技术实施例的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种有效直观可视化检测蛋白清洗效果的方法，其特征在于，其包括：标记修饰被检测蛋白，以使得所述被检测蛋白被显示；使标记修饰后的被检测蛋白附着于镜片上，在显示设备下观测该被检测蛋白于镜片上的附着情况，获得原始蛋白含量对照图；通过清洗设备配合电泳解离液清洗表面附着有被检测蛋白的镜片，在显示设备下观测清洗后的被检测蛋白于镜片上的附着情况，获得剩余蛋白含量检测图；将所述原始蛋白含量对照图与所述剩余蛋白含量检测图进行对比，得到被检测蛋白被降解的结果。2.根据权利要求1所述的检测蛋白清洗效果的方法，其特征在于，还包括设置一组对照组，具体包括：将该表面附着有被检测蛋白的镜片浸泡于所述电泳解离液中，浸泡时间与清洗时间一致，浸泡完成后在显示设备下观测被检测蛋白于镜片上的附着情况，获得浸泡剩余蛋白含量检测图；将浸泡剩余蛋白含量检测图与所述剩余蛋白含量检测图进行对比，得到被检测蛋白被降解的结果。3.根据权利要求1所述的检测蛋白清洗效果的方法，其特征在于，所述被检测蛋白包括被标记修饰的荧光蛋白，通过荧光蛋白使得所述被检测蛋白通过荧光显示。4.根据权利要求1所述的检测蛋白清洗效果的方法，其特征在于，使标记修饰后的被检测蛋白附着于镜片上，在显示设备下观测该被检测蛋白于镜片上的附着情况，获得原始蛋白含量对照图，具体包括：取0.5mg/mL的荧光蛋白20μL，将所述荧光蛋白置于镜片上，且使得所述荧光蛋白附着在所述镜片表面，将表面附着有所述荧光蛋白的镜片在紫外灯下观察，镜片表面有荧光显示，获得原始蛋白含量对照图；通过清洗设备配合电...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙碧霞，
申请(专利权)人：苏州三个臭皮匠生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：