样品分析方法技术

本公开涉及一种样品分析方法，包含：将预定体积的样品与试剂混合以形成样品混合物；由样品混合物在流动室中形成没有鞘流的样品流；测量来自样品流的光学信号并且分析光学信号以量化样品流中的目标颗粒；使样品流流过流量传感器；并且测量来自流量传感器处的样品流的感测信号，以检测样品流进入流量传感器和/或样品流离开流量传感器。样品流离开流量传感器。样品流离开流量传感器。

【技术实现步骤摘要】
样品分析方法
[0001]本申请是申请日为2017年11月03日、申请号为2017800804705、专利技术名称为用于细胞计数和附加分析的流体卡盒的专利申请的分案申请。


[0002]本公开涉及药物和细胞计数。

技术介绍

[0003]本文引用的所有出版物都通过引用全部并入本文，就如同每个单独的出版物或专利申请被具体和单独地指出通过引用并入本文一样。以下描述包括可用于理解本公开的信息。这并不承认本文所提供的任何信息是现有技术或与本公开相关或任何具体或隐含地引用的出版物是现有技术。
[0004]流式细胞计数(flow cytometry)是用于生物样品的细胞分析的常用工具。典型的细胞计数分析包括两部分。第一部分是样品制备。例如，一些细胞计数分析用特定荧光团标记目标细胞，使得这些细胞能够通过荧光信号的光学测量而被检测。在另一个例子中，一些细胞计数分析要求选择性地裂解样品中的细胞，仅留下完整的目标细胞用于细胞计数测量。第二部分是样品分析。通常样品流在流经流动室时聚焦成窄流，其中逐个测量目标细胞的光学或其他信号。该窄样品流通常通过鞘流的流体动力聚焦来获得。
[0005]由流式细胞计数测量的信号可用于评估单个目标细胞的特征，如细胞大小和细胞表面粗糙度。借助于荧光标记，另外的细胞特征也可以被评估，例如细胞核的存在、细胞内DNA的量、细胞膜上的抗原和许多其他特征。当逐个测量细胞时，所检测的目标细胞总数也可以通过对所测量的信号峰的数目进行计数来确定。另外，一些细胞计数分析还要求测量样品中的颗粒密度，即单位体积样品中的目标颗粒数目，这在细胞计数分析中也被称为绝对计数(absolute count)。对于该测量，不仅需要确定被检测颗粒的总数，而且还需要确定相应的样品的体积。这两样信息可以一起用来计算单位体积样品中的颗粒数目，例如绝对计数。
[0006]在常规的流式细胞计数分析中，样品制备步骤通常通过手动操作进行。例如，制备步骤通常在不同的容器，例如离心管或小瓶中进行，然后仅将最终制备的样品装入商业细胞计数器用于光学或其他测量。用于样品制备的这些手动步骤要求由受过训练的技术人员进行精确的流体处理，因此不适合于对使用者进行最少训练的情况下的应用。
[0007]此外，对于诸如医疗诊断中的即时检测的应用，细胞计数分析会在非实验室环境下，诸如在急诊室或医师办公室进行。因此，重要的是生物样品是自包含的并且不暴露于引起生物污染的环境。为此，样品制备步骤和测量步骤都以自包含的方式诸如在未暴露的容器内进行是有利的。
[0008]另外，绝对计数测量要求检测到的目标细胞的总数和相应的样品体积是已知的。在常规的细胞计数分析中，将固定量的已知体积的样品注射到系统中以确定绝对计数。然而，流体系统经常引入死体积，这意味着样品的某些部分不经过细胞计数器测量。这些死体
积导致被测量的实际样品体积不同于被注入到系统中的已知体积，因此给绝对计数引入了不准确性。
[0009]考虑到上述因素，需要开发一种能够以自包含的、自动的方式进行包括样品制备和样品分析步骤的细胞分析的流体卡盒。这种流体卡盒还需要不仅能够进行细胞分析和细胞计数，而且还能够精确地测量绝对计数。

技术实现思路

[0010]结合旨在示例性和说明性而非限制范围的装置、系统和方法来描述和说明以下实施例及其方面，所述装置、系统和方法。
[0011]本公开提供了各种流体卡盒以及使用和制造这种流体卡盒的方法。这些流体卡盒可以进行样品制备和细胞计数分析。这些流体卡盒可用于各种类型的细胞计数分析。在各种实施例中，本文所公开的流体卡盒可用于确定绝对计数。在各种实施例中，本文所公开的流体卡盒可用于肿瘤诊断中细胞群的DNA分析。在各种实施例中，本文所公开的流体卡盒可用于AIDS诊断中CD4+/CD8+淋巴细胞亚型分析。在各种实施例中，本文所公开的流体卡盒可用于全血细胞计数(CBC)中的细胞分析。这些流体卡盒还可用于其他类型的分析，包括但不限于分析样品中的分析物、蛋白质、酶、核酸和其他生物标记。
[0012]本公开的各种实施例提供了一种用于分析样品中的目标颗粒的装置。在各种实施例中，该装置包含卡盒装置。在各种实施例中，该卡盒装置包含：入口，其配置用于将该样品接收到该卡盒装置中；流体结构，其流体地连接至该入口并且被配置用于将该样品的至少一部分与试剂的至少一部分混合以形成一种或多种样品混合物；流动室，其流体地连接到所述流体结构并且被配置用于由所述一种或多种样品混合物形成一个或多个样品流，其中所述样品流在所述流动室中形成而没有鞘流，并且所述流动室包含光学透明区域，所述光学透明区域被配置用于测量来自所述样品流的光学信号以检测所述样品中的目标颗粒；以及流量传感器，其流体地连接到所述流动室并且被配置成测量来自进入所述流量传感器的样品流的感测信号。在各种实施例中，本文所公开的卡盒装置还包含试剂。
[0013]在各种实施例中，如本文所公开的装置还包含读取仪装置，其中所述读取仪装置被配置用于接收、操作和/或驱动所述卡盒装置。在各种实施例中，读取仪装置既不从卡盒装置接收任何液体，也不转移任何液体到卡盒装置中。
[0014]本公开的各种实施例提供了一种用于分析样品中的目标颗粒的方法。该方法包含：将所述样品施加到如本文所公开的卡盒装置，所述卡盒装置被配置用于将预定的样品体积收集到所述卡盒装置中；将所述卡盒装置转移到如本文所公开的读取仪装置中；将所收集的样品的至少一部分与试剂的至少一部分混合以在所述卡盒装置内形成一种或多种样品混合物；由所述一种或多种样品混合物在所述卡盒装置内的流动室中形成一个或多个样品流，其中所述样品流在所述流动室中形成而没有鞘流；测量来自所述流动室处的所述样品流的光学信号以检测样品流中的目标颗粒；以及使用所述读取仪装置分析所测量的光学信号以量化样品中的目标颗粒。
[0015]本公开的各种实施例提供了一种用于分析样品中的颗粒的方法。该方法包含：将所述样品施加到如本文所公开的卡盒装置，所述卡盒装置被配置用于将预定的样品体积收集到所述卡盒装置中；将所述卡盒装置转移到如本文所公开的读取仪装置中；将所收集的
样品的至少一部分与试剂的至少一部分混合以在所述卡盒装置内形成一种或多种样品混合物；由所述一种或多种样品混合物在所述卡盒装置内的流动室中形成一个或多个样品流，其中将至少两种分开的样品混合物转移到同一流动室中以形成至少两个单独的样品流而没有鞘流；测量来自所述流动室处的所述样品流的光学信号以检测样品流中的目标颗粒；以及使用所述读取仪装置分析所测量的光学信号以量化样品中的目标颗粒。
[0016]在各种实施例中，如本文所公开的方法还包含：使样品流流过流体地连接到流动室的流量传感器；测量来自所述流量传感器处的样品流的感测信号，以检测所述样品流进入流量传感器和/或所述样品流离开流量传感器；以及使用读取仪装置分析所测量的光学信号和感测信号以确定样品中的目标颗粒的浓度。
附图说明
[0017]示例性实施例在附图中示出。其目的是本文所公开的实施例和附图被认本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种样品分析方法，包含：将预定体积的样品与试剂混合以形成样品混合物；由所述样品混合物在流动室中形成没有鞘流的样品流；测量来自所述样品流的光学信号并且分析所述光学信号以量化所述样品流中的目标颗粒；使所述样品流流过流量传感器；并且测量来自所述流量传感器处的所述样品流的感测信号，以检测所述样品流进入所述流量传感器和/或所述样品流离开所述流量传感器。2.根据权利要求1所述的样品分析方法，其中，所述流动室中的样品流和所述流量传感器中的样品流具有相同的流率。3.根据权利要求1所述的样品分析方法，还包含：通过分析所述光学信号和所述感测信号以确定所述样品中所述目标颗粒的浓度。4.根据权利要求1所述的样品分析方法，其中，所述试剂包含用荧光选择性地标记所述样品中的所述目标颗粒的荧光标记剂，并且来自所述样品流的光学信号包括荧光。5.根据权利要求1所述的样品分析方法，其中，所述光学信号包括散射光、反射光、透射光、荧光、光吸收、光消散或白光图像或者其组合。6.根据权利要求1所述的样品分析方法，其中，在基本流体单元中进行混合，所述基本流体单元包含：腔室，其被配置成容纳流体；通气孔，其连接到所述腔室，其中，所述通气孔连接到气动压力源、环境压力或大气压力；微流体通道，其连接...

【专利技术属性】
技术研发人员：施文典，
申请(专利权)人：芯易诊有限公司，
类型：发明
国别省市：