与玉米高温敏感基因lsht1紧密连锁的分子标记及应用制造技术

本发明专利技术涉及作物分子生物学技术领域，具体公开了与玉米高温敏感基因lsht1紧密连锁的分子标记及应用，通过玉米高温敏感突变体lsht1表型分析与遗传分析，并通过lsht1基因定位获得分子标记D65和C29，扩增分子标记D65的引物D65

【技术实现步骤摘要】
与玉米高温敏感基因lsht1紧密连锁的分子标记及应用


[0001]本专利技术涉及作物分子生物学
，具体涉及与玉米高温敏感基因lsht1紧密连锁的分子标记及应用。

技术介绍

[0002]玉米是我国一种重要的粮食作物和经济作物。近年来，随着全球气温地不断上升，高温热害已成为影响我国玉米稳产的重要自然灾害之一(Wandaka et al.,2017)。植株经高温热害后，玉米果穗易出现“缺粒、畸形穗、秃尖、空秆”等异常现象，从而导致玉米产量和品质严重下降，甚至是绝产(Yang and Zhang,2006)。因此，培育耐高温玉米新品种对保障玉米安全生产具有十分重要的意义。
[0003]玉米是一种喜温作物，在不同生育阶段所需的最适温度不同。一般而言，玉米种子的最低发芽温度为8
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10℃，24℃最为适宜。拔节期，玉米正常生长的温度范围是18
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25℃，20℃是最适宜的生长温度。开花期，最适宜的生长温度范围是25
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28℃(Mitchell and Petolino,1988)。超过上述温度范围，均会造成对玉米植株的高温热害。叶片是植物光合作用的主要器官，高温主要影响类囊体的物理化学性质和结构组织，导致细胞膜的解体和细胞组分的降解，进而影响叶片光合效率和植株产量。
[0004]耐高温基因及其紧密连锁分子标记的应用可加速耐高温新品种选育的进程。目前，水稻中已鉴定了部分高温胁迫相关遗传位点。OsTT1编码一个参与泛素化蛋白降解的26S蛋白酶体α2亚基。过表达OsTT1能显著提高水稻、拟南芥和高羊茅的耐热性。SLG1编码一个保守的细胞质tRNA2
‑
硫醇化蛋白2，正调控水稻耐热性。突变体slg1高温敏感，过表达SLG1能显著提高水稻对高温耐受性。AET1编码一个tRNA
His
鸟苷转移酶，对tRNA行使3
’
到5
’
RNA聚合酶活性，是前体tRNA
His
成熟的关键步骤。AET1有助于生长素应答和环境温度适应。然而，关于玉米高温胁迫相关基因的报道还较少。

技术实现思路

[0005]为解决上述技术问题，本专利技术提供了与玉米高温敏感基因lsht1紧密连锁的分子标记及应用，所述的分子标记D65位于玉米突变体第2染色体，具体位置chr2：11047183
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11047457，分子标记C29位于玉米突变体第2染色体，具体位置chr2：11390961
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11391156，本专利技术获得的分子标记D65和分子标记C29能够鉴定玉米耐高温种质资源。
[0006]本专利技术提供了与玉米高温敏感基因lsht1紧密连锁的分子标记，所述分子标记包括分子标记D65和分子标记C29，二者物理距离为550Kb，所述玉米高温敏感基因lsht1位于玉米第2染色体上的分子标记D65和分子标记C29之间；
[0007]扩增所述分子标记D65的引物D65
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F的序列如SEQ ID NO.11，D65
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R的序列如SEQ ID NO.12所示；
[0008]扩增所述分子标记C29的引物C29
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F的序列如SEQ ID NO.15，C29
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R的序列如SEQ ID NO.16所示。
[0009]进一步地，所述分子标记D65位于玉米第2染色体，具体位置chr2：11047183
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11047457。
[0010]进一步地，所述分子标记C29位于玉米第2染色体，具体位置chr2：11390961
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11391156。
[0011]本专利技术还提供了用于鉴别所述的分子标记D65的引物，所述引物为D65
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F和D65
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R。
[0012]本专利技术还提供了上述分子标记D65的引物在玉米耐高温种质资源鉴定中的应用，所述分子标记D65在突变体中的扩增序列大小为275bp，扩增序列如SEQ ID NO.22所示，所述分子标记D65在野生型中的扩增序列大小为297bp，扩增序列如SEQ ID NO.21所示。
[0013]本专利技术还提供了用于鉴别所述的分子标记C29的引物，所述引物为C29
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F和C29
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R。
[0014]本专利技术还提供了上述分子标记C29的引物在玉米耐高温种质资源鉴定中的应用，所述分子标记C29在突变体中的扩增序列大小为196bp，扩增序列如SEQ ID NO.24所示，所述分子标记C29在野生型中的扩增序列大小为203bp，扩增序列如SEQ ID NO.23所示。
[0015]本专利技术还提供了与玉米高温敏感基因lsht1紧密连锁的分子标记在玉米耐高温种质资源鉴定中的应用。
[0016]进一步地，玉米耐高温种质资源鉴定过程为：提取玉米叶片基因组DNA，以玉米叶片基因组DNA为模板，利用所述引物D65
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F和D65
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R进行PCR扩增；
[0017]当检测出所述分子标记D65大小为297bp时，则表示待检样品为耐高温玉米种质，当检测出所述分子标记D65大小为275bp时，则表示待检样品为不耐高温玉米种质。
[0018]进一步地，玉米耐高温种质资源鉴定过程为：提取玉米叶片基因组DNA，以玉米叶片基因组DNA为模板，利用所述引物C29
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F和C29
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R进行PCR扩增；
[0019]当检测出所述分子标记C29大小为203bp时，则表示待检样品为耐高温玉米种质，当检测出所述分子标记C29大小为196bp，则表示待检样品为不耐高温玉米种质。
[0020]与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
[0021]1、本专利技术获得的与玉米高温敏感基因lsht1紧密连锁的分子标记D65和C29能够用于鉴定玉米耐高温种质资源，同时也可为高温敏感基因的克隆奠定基础。
[0022]2、本专利技术利用分子标记D65的引物D65
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F和D65
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R扩增玉米叶片基因组DNA，当检测出所述分子标记D65大小为297bp时，则表示待检样品为耐高温玉米种质，当检测出所述分子标记D65大小为275bp时，则表示待检样品为不耐高温玉米种质；
[0023]3、本专利技术利用分子标记C29的引物C29
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F和C29
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R扩增玉米叶片基因组DNA，当检测出所述分子标记C29大小为203bp时，则表示待检样品为耐高温玉米种质，当检测出所述分子标记C29大小为196bp时，则表示待检样品为不耐高温玉米种质。
附图说明
[0024]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.与玉米高温敏感基因lsht1紧密连锁的分子标记，其特征在于，所述分子标记包括分子标记D65和分子标记C29，二者物理距离为550Kb，所述玉米高温敏感基因lsht1位于玉米第2染色体上的分子标记D65和分子标记C29之间；扩增所述分子标记D65的引物D65
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F的序列如SEQ ID NO.11，D65
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R的序列如SEQ ID NO.12所示；扩增所述分子标记C29的引物C29
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F的序列如SEQ ID NO.15，C29
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R的序列如SEQ ID NO.16所示。2.如权利要求1所述的与玉米高温敏感基因lsht1紧密连锁的分子标记，其特征在于，所述分子标记D65位于玉米第2染色体，具体位置chr2：11047183
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11047457。3.如权利要求1所述的与玉米高温敏感基因lsht1紧密连锁的分子标记，其特征在于，所述分子标记C29位于玉米第2染色体，具体位置chr2：11390961
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11391156。4.用于鉴别权利要求1所述的分子标记D65的引物，其特征在于，所述引物为D65
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F和D65
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R。5.如权利要求4所述的用于鉴别分子标记D65的引物在玉米耐高温种质资源鉴定中的应用，其特征在于，所述分子标记D65在突变体中的扩增序列大小为275bp，扩增序列如SEQ ID NO.22所示，所述分子标记D65在野生型中的扩增序列大小为297bp，扩增序列如SEQ ID NO.21所示。6.用于鉴别权利要求1所述的分...

【专利技术属性】
技术研发人员：汤继华，陈晓阳，连玉杰，陈永强，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：