【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于以双组分体系测量分析物的方法和试剂盒及其用途
[0001]本专利技术涉及使用双组分检测方法测量分析物参数的方法和试剂盒及其用途。要求保护的方法包括用测量的扩展可测量浓度范围来测量分析物的稀释液。测量基于测量的预定非双射标准曲线,从而为每个测量提供读取双组分检测方法的非双射标准曲线的方法。从而在更宽的测量范围内正确地确定用于计算分析物浓度的数学关系。在另一方面,本专利技术涉及测量方法的所述非双射预定标准曲线在区室化双组分检测方法中的应用。还在另一个方面,本专利技术涉及使用独特的分子鉴定组分的测量方法的所述非双射预定标准曲线在区室化双组分检测方法中的应用。还在另一方面,本专利技术涉及确定双组分方法的分析物特异性结合组分的解离常数。要求保护的方法涉及测量的扩展可测量浓度范围,确定组分的解离常数以及还以并行方式更好的定量双组分检测方法。
技术介绍
[0002]本专利技术涉及使用双组分检测方法测量分析物参数的方法和试剂盒及其用途。还公开了方法和试剂盒的应用。
[0003]相关技术的讨论
[0004]特别地,本方法和试剂盒非常 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于使用双组分检测方法确定具有未知分析物浓度的样品中分析物浓度的方法,包括:a.提供已知浓度的两种非固定化分析物特异性结合组分,用于在溶液中进行双组分检测方法,所述双组分检测方法包括使所述两种分析物特异性结合组分与所述分析物接触,以产生信号,所述信号取决于所述溶液中形成的双组分/分析物复合物浓度b.提供用于所述双组分检测方法的非双射分析物浓度参考曲线,所述分析物浓度参考曲线是反映所述信号对所述分析物浓度依赖性的数学函数c.使用限定稀释因子制备所述样品的一种或多种稀释液,d.将所述双组分检测方法应用于所述样品和所述一种或多种稀释液e.使用在所述样品和所述一种或多种稀释液中检测的所述信号作为在不同分析物浓度下所述非双射分析物浓度参考曲线的数学拟合的约束输入来确定所述分析物浓度。2.一种用于在双组分检测方法中用已知浓度的样品中的分析物来确定分析物特异性结合组分的解离常数的方法,包括:a.提供已知浓度的两种非固定化分析物特异性结合组分,用于在溶液中进行双组分检测方法,所述双组分检测方法包括使所述两种分析物特异性结合组分与所述分析物接触,以产生信号,所述信号取决于所述溶液中形成的双组分/分析物复合物浓度b.提供用于所述双组分检测方法的解离常数关系,所述解离常数关系是所述两种分析物特异性结合组分与所述分析物的解离常数(分别为kd1和kd2)之间的关系的数学函数,依赖于反映双组分/分析物复合物的浓度以及分析物和分析物特异性结合组分的浓度的所述信号c.制备所述样品和/或所述分析物特异性结合组分的一种或多种稀释液,d.将所述双组分检测方法应用于所述样品和所述一种或多种稀释液e.使用在所述样品和所述一种或多种稀释液中检测的所述信号作为在不同分析物浓度和/或分析物特异性结合组分浓度下所述解离常数关系的数学拟合的约束输入来确定所述两种分析物特异性结合组分的所述解离常数kd1和kd2。3.根据权利要求1所述的方法,其中,所述非双射分析物浓度参考曲线是通过以下实验性地获得:提供已知分析物浓度的参考样品,生成所述参考样品的一系列已知稀释液,以及对所述参考样品及其各自已知稀释液进行所述双组分检测方法,和/或其中所述非双射分析物浓度参考曲线是通过求解化学平衡和质量守恒方程分析地计算,或通过基于提供所述两种分析物特异性结合组分的每一种与所述分析物的解离常数的数值解来提供。4.根据权利要求2所述的方法,其中,所述解离常数关系是通过求解化学平衡和质量守恒方程分析地计算的。5.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中,所述分析物选自由以下组成的组:蛋白质、肽、核酸片段、碳水化合物、脂质、抗体(单克隆或多克隆)、抗原、寡核苷酸、特异性受体蛋白、配体、分子、细胞、微生物以及片段产物或其组合和/或其中所述样品包括两种或更多种不同类型的分析物。6.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中,所述两种分析物特异性结合组分选自由以下组成的组:核酸、优选RNA和/或DNA寡核苷酸、抗体、肽、蛋白质、适配体、分子印迹聚合物、细胞或其组合和/或其中使用两对或更多对不同种类的分析物特异性结合组分。
7.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中,所述双组分方法包括采用基于邻位的分析来产生双组分/分析物复合物浓度依赖信号,其中所述基于邻位的分析使用依赖于其邻位产生可检测信号的两种分析物特异性结合组分,和/或其中所述双组分方法包括采用共振能量转移分析,优选弗斯特共振能量转移(FRET)分析或生物发光共振能量转移(BRET)分析、蛋白质互补分析(PCA...
【专利技术属性】
技术研发人员:乔鲍,
申请(专利权)人:阿克托姆有限责任公司,
类型:发明
国别省市:
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