本发明专利技术涉及中药材质量控制方法，具体涉及一种青钱柳的HPLC指纹图谱检测方法。针对现有技术中青钱柳的HPLC指纹图谱存在较多杂质峰且各目标成分的峰之间相互分离较差的问题，本发明专利技术提供一种青钱柳提取物，采用乙醇与强酸的混合溶液作为提取溶剂，加热提取青钱柳样品中的主要成分得到；通过HPLC测试其指纹图谱，包括如下特征峰：槲皮素11.616
【技术实现步骤摘要】
一种青钱柳的HPLC指纹图谱检测方法
[0001]本专利技术涉及中药材质量控制方法，具体涉及一种青钱柳的HPLC指纹图谱检测方法。
技术介绍
[0002]青钱柳(Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinsk.)为胡桃科(Juglandaceae)青钱柳属(CyclocaryaIljinsk.)植物，又名青钱李、山化树、摇钱树，属落叶乔木，为国家二级保护树种，该属现仅存一种，且仅存于中国，被誉为植物界的大熊猫。青钱柳具有广泛的药用价值，被称为医学界的第三棵树，是我国特有的珍稀药用植物资源。
[0003]青钱柳天然分布范围比较广，主要分布于安徽、江苏等华东地区和福建、广东、广西等华南地区以及湖南、湖北、四川、贵州等地，主要分布于海拔500m～2 500m的山区、溪谷、林缘、林内或石灰岩山地。四川省青钱柳天然资源主要分布于四川省沐川县、南江县等。
[0004]2013年国家卫生计划委员会颁布“关于批准裸藻等8种新食品原料的公告(公告2013年第4号)”，根据《中华人民共和国食品安全法》和《新食品原料安全性审查管理办法》有关规定，批准青钱柳叶为新食品原料，进一步证明了青钱柳的安全性。
[0005]据《中华本草》、《中国中药资源志要》及《全国中草药汇编》等记载，其树皮、叶片具有清热解毒、止痛等功用，还可用于治疗顽癣。《保元汇集》载有：“摇钱树叶，甘凉，清热生津而除烦”。巴中市南江县《泰安堂》载有“摇钱散”秘方治疗痛风。青钱柳药用历史悠久，且现代研究也证明，其叶提取物中含有大量的生理活性成分，包括黄酮类、三萜类、水溶性多糖和生物碱等，这些物质对人体健康具有重要的促进作用，如防治“三高”、抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等功效。其中在防治糖尿病方面功效尤为突出。
[0006]截止2018年，我国糖尿病患病人数超过9000万，占据全球患病率第1位。青钱柳因其在治疗糖尿病方面的突出功效而受到广泛关注。近10多年国内利用青钱柳开发保健品和药物剂型呈突飞猛进之势。通过调研发现，青钱柳的发展分为萌芽期(1988～2013年)和增长期(2013年至今)。可能与2013年国家卫计委批准青钱柳为新食品原料相关。在萌芽期，有关青钱柳开发利用的文献为每年20篇左右，专利申请40余件，且50％左右为个人申请专利；增长期的青钱柳相关文献与专利数量急速增加，每年发表相关文献近100篇，说明近年来青钱柳产业被加速开发。
[0007]虽然青钱柳的用途正在逐步被人发掘，但是目前青钱柳相关质量标准并未收载于《中国药典》，相关领域也缺少对其质量控制标准的研究。为了充分利用药材资源，带动产业升级，有必要进行青钱柳有效成分相关的研究，以建立青钱柳质量标准。
[0008]目前对于青钱柳的HPLC分析已有部分研究，例如：专利“CN105675755A一种基于HPLC的青钱柳中黄酮类化合物含量的检测方法”提供了通过HPLC检测青钱柳中黄酮类含量的方法。
[0009]但是，上述对青钱柳的HPLC指纹图谱的检测方法中，对青钱柳的前处理的方法与色谱条件等仍然不够完善，使得得到的指纹图谱中存在较多杂质峰且各目标成分的峰之间
相互分离较差，从而影响了对青钱柳的质量的鉴别。
技术实现思路
[0010]针对现有技术中青钱柳的HPLC指纹图谱存在较多杂质峰且各目标成分的峰之间相互分离较差的问题，本专利技术提供一种青钱柳的HPLC指纹图谱检测方法，其目的在于：提供一种优化的青钱柳的前处理的方法，获得杂质峰含量少、目标成分峰分离度好的指纹图谱。
[0011]一种青钱柳提取物，采用乙醇与强酸的混合溶液作为提取溶剂，加热提取青钱柳样品中的主要成分得到；通过HPLC测试其指纹图谱，包括如下特征峰：
[0012]槲皮素11.616
±
5％min；
[0013]山奈酚21.898
±
5％min。
[0014]本专利技术还提供一种青钱柳的HPLC指纹图谱检测方法，包括如下步骤：
[0015](1)采用乙醇与强酸的混合溶液作为提取溶剂，加热提取青钱柳样品中的主要成分，得到供试品溶液；
[0016](2)测试供试品溶液得到供试品溶液的HPLC指纹图谱。
[0017]优选的，主要成分包括槲皮素和山奈酚。
[0018]优选的，步骤(1)中，所述乙醇为体积分数90
‑
99％的乙醇，优选为体积分数95％的乙醇；所述强酸为质量分数30
‑
37％的盐酸，所述乙醇与强酸的体积比为5：1
‑
3：1，优选为5：1。
[0019]优选的，步骤(1)中，加热提取的条件为：80
‑
100℃水浴回流提取0.8
‑
1.2h；优选的，加热提取的条件为：90℃水浴回流提取1h。
[0020]优选的，步骤(1)中，加热提取完成后，用提取溶剂将混合溶液的重量补足至加热提取前的重量，混匀后过滤得到供试品溶液。
[0021]优选的，步骤(1)中，青钱柳制成粉末后加入提取溶剂，所述青钱柳粉末与提取溶剂的用量比例为1g：40
‑
80ml，优选为1g：60ml。
[0022]优选的，所述步骤(2)中，流动相采用甲醇
‑
磷酸溶液，磷酸溶液的浓度为质量分数0.2
‑
0.6％，流动相甲醇与磷酸溶液的体积比为40:60
‑
60:40，优选为45:55。
[0023]优选的，步骤(2)中，色谱条件为：流速为0.8
‑
1.2ml/min；和/或，色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；和/或，柱温为28
‑
32℃；和/或，进样量为5
‑
10μL，优选为5μL；和/或，检测波长为360
‑
370nm，优选为365nm。
[0024]优选的，所述色谱柱采用Agilent ZORBAX SB
‑
C18 4.6
×
150mm、Agilent Eclipse Plus C18 4.6
×
250mm或Phenomenex Kinetex C18 4.6
×
250mm。
[0025]优选的，还包括如下步骤：配制槲皮素标准品和山奈酚标准品的标准溶液，通过HPLC测试并绘制槲皮素标准品和山奈酚标准品的峰面积
‑
浓度的标准曲线；在获得供试品溶液的HPLC指纹图谱后，通过标准曲线计算青钱柳样品中槲皮素和山奈酚的含量。
[0026]优选的，槲皮素标准品和山奈酚标准品的标准溶液以甲醇作为溶剂。
[0027]通过本专利技术优选后的青钱柳前处理条件，能够有效提取青钱柳中的槲皮素和山奈酚等主要成分，且减少杂质的溶解。此外，通过这样的前处理条件，在后续的色谱分离过程中，待测主要成分之间以及主要成分与杂质之间的分离度较好，使得得到的HPLC指纹图谱中槲皮素和山奈酚的谱峰的本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种青钱柳提取物，其特征在于：采用乙醇与强酸的混合溶液作为提取溶剂，加热提取青钱柳样品中的主要成分得到；通过HPLC测试其指纹图谱，包括如下特征峰：槲皮素 11.616
±
5％min；山奈酚 21.898
±
5％min。2.一种青钱柳的HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)采用乙醇与强酸的混合溶液作为提取溶剂，加热提取青钱柳样品中的主要成分，得到供试品溶液；(2)测试供试品溶液得到供试品溶液的HPLC指纹图谱。3.按照权利要求2所述的一种青钱柳的HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于：所述主要成分包括槲皮素和山奈酚。4.按照权利要求2所述的一种青钱柳的HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中，所述乙醇为体积分数90
‑
99％的乙醇；所述强酸为质量分数30
‑
37％的盐酸，所述乙醇与强酸的体积比为5：1
‑
3：1。5.按照权利要求2或4所述的一种青钱柳的HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中，加热提取的条件为：80
‑
100℃水浴回流提取0.8
‑
1.2h。6.按照权利要求2所述的一种青钱柳的HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中，加热提取完成后，用提取溶剂将混合溶液的重量补足至加热提取前的重量，混匀后过滤得到供试品溶液。7.按照权利要求2所述的一种青钱柳的HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中，青钱柳制成粉末后加入提取溶剂，所述青钱柳粉末与提取溶剂的用...
【专利技术属性】
技术研发人员：伍文彬，
申请(专利权)人：四川万格农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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