衰老相关差异表达基因在制备细胞衰老诊断试剂盒中的应用制造技术

本发明专利技术公开了衰老相关差异表达基因在制备细胞衰老诊断试剂盒中的应用，属于生物医学技术领域。本发明专利技术经过筛选与验证，首次发现衰老相关差异表达基因SIRT3、E2F3、IRS2这三个基因的蛋白表达水平及m6A RNA甲基化修饰水平，可用于鉴定及诊断细胞的衰老的状态，解决了目前在细胞衰老领域存在的诊断标志物欠缺问题，为细胞早衰及年龄相关疾患的早期预防和靶向治疗提供参考依据。治疗提供参考依据。治疗提供参考依据。

【技术实现步骤摘要】
衰老相关差异表达基因在制备细胞衰老诊断试剂盒中的应用


[0001]本专利技术属于生物医学
，具体涉及衰老相关差异表达基因在制备细胞衰老诊断试剂盒中的应用。

技术介绍

[0002]细胞衰老是一种细胞周期停滞的永久状态。衰老细胞会随着机体衰老而累积，释放一系列促炎、促凋亡等因子，导致了与年龄相关的疾病和慢性疾病的发生，如动脉粥样硬化、2型糖尿病、关节炎、特发性肺纤维化和肝病等。因此，衰老细胞的鉴定、表征和药理消除在衰老研究领域受到关注。
[0003]细胞衰老是器官及个体衰老的基础，其过程受遗传和环境等多种复杂因素影响。长期以来，科学界对调控衰老的具体分子机制尚不明确，对细胞衰老的鉴定、诊断及干预的靶点也缺乏系统的标志物。
[0004]细胞衰老是正常衰老和衰老病理的核心发育程序，在转录后水平受到强烈调控。近年来，m6A RNA的甲基化在年龄相关疾患的发生发展及其治疗和预后的关联变得非常紧密，包括肥胖、免疫调节及肿瘤等，可调节与细胞增殖、迁移侵袭、细胞周期进程、细胞凋亡和自噬过程相关的靶基因的表达。在衰老的细胞中，我们发现，年轻细本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.衰老相关差异表达基因在制备细胞衰老诊断试剂盒中的应用，其特征在于：所述的衰老相关差异表达基因为如下基因的一种或多种组合：SIRT3、E2F3、IRS2。2.根据权利要求1所述的衰老相关差异表达基因在制备细胞衰老诊断试剂盒中的应用，其特征在于：所述的细胞衰老诊断试剂盒是通过分析细胞中衰老相关差异表达基因的蛋白表达情况，和/或m6A RNA甲基化修饰水平，从而诊断细胞衰老情况：(1)当分析结果为如下情况的一种或多种组合时，判断细胞进入衰老状态：a.SIRT3蛋白表达升高；b.E2F3蛋白表达升高；c.IRS2蛋白表达升高或降低；d.SIRT3 m6A RNA甲基化修饰水平升高；e.E2F3 m6A RNA甲基化修饰水平升高；f.IRS2 m6A RNA甲基化修饰水平升高；(2)当分析结果为如下情况的一种或多种组合时，判断细胞为复制性衰老细胞：a.IRS2蛋白表达降低；b.IRS2 m6A RNA甲基化修饰水平升高；(3)当分析结果为如下情况的一种或多种组合时，判断细胞为早衰细胞：a.SIRT3 m6A RNA甲基化修饰水平升高；b.E2F3 m6A RNA甲基化修饰水平升高；细胞中衰老相关差异表达基因的蛋白表达情况和m6A RNA甲基化修饰水平，均以年轻细胞为对照，采用相对定量分析法确定。3.根据权利要求1或2所述的衰老相关差异表达基因在制备细胞衰老诊断试剂盒中的应用，其特征在于：所述的年轻细胞的定义为：群体倍增水平PDL小于或等于其寿命的50％的细胞；所述的复制性衰老细胞的定义为：群体倍增水平PDL大于或等于其寿命的90％的细胞；所述的早衰细胞为年轻细胞应激诱导的衰老细胞，应激因素包括但不限于氧化应激；其中，PDL的计算公式为n＝3.32(logN2
‑
logN1)+X，N2为该代细胞收获的细胞总数，N1为上代接种的细胞数，X为上代细胞的PDL。4.根据权利要求1或2所述的衰老相关差异表达基因在制备细胞衰老诊断试剂盒中的应用，其特征在于：所述的细胞衰老情况通过以下步骤诊断：(1)提取待测细胞总蛋白，以年轻细胞为对照，进行待测细胞中衰老相关差异表达基因的蛋白半定量；(2)提取待测细胞总RNA；RNA甲基化免疫共沉淀法富集m6A RNA...

【专利技术属性】
技术研发人员：张文娟，林辉，张文姬，吴帆，彭欣悦，余素素，周铖，张露云，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：