一种RNA在治疗非酒精性脂肪性肝炎中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种RNA在治疗非酒精性脂肪性肝炎中的应用，属于生物医药技术领域。本发明专利技术提供一种RNA在制备治疗肝炎的药物中的应用和在制备治疗非酒精性脂肪性肝炎的药物中的应用，RNA的序列为SEQ ID No.1或SEQ ID No.2。本发明专利技术提供一种IGF2BP2基因抑制剂在制备治疗肝炎的药物中的应用和在制备治疗非酒精性脂肪性肝炎的药物中的应用。性肝炎的药物中的应用。性肝炎的药物中的应用。

【技术实现步骤摘要】
一种RNA在治疗非酒精性脂肪性肝炎中的应用


[0001]本专利技术涉及一种RNA在治疗非酒精性脂肪性肝炎中的应用，属于生物医药


技术介绍

[0002]非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)已成为我国第一大慢性肝病，患病率达29.2％。NAFLD是一个连续的肝脏疾病谱，包括早期的单纯性脂肪肝(NAFL)、中晚期的脂肪性肝炎(NASH)，可进一步发展为肝纤维化、肝硬化和肝癌，成为终末期肝病和肝衰竭的重要病因。以肝脏脂质沉积和慢性炎症为特征的非酒精性脂肪性肝炎(Nonalcoholic steatohepatitis,NASH)，已成为肝纤维化、肝硬化和肝癌的主要病因之一。此外，NAFLD/NASH和高血糖、高血脂、胰岛素抵抗互为因果，共同促进2型糖尿病、心脑血管疾病、慢性肾病等重大疾病的发生发展。因此，深入揭示NAFLD/NASH发病机制，寻找有效而特异的治疗药物，迫在眉睫。截至目前，临床上仍然没有特异而有效的针对NASH的治疗方案。在本专利技术前期研究中通过筛选和验证，发现NASH动物模型的肝脏组织中IGF2BP2基因表达显著升高。进而发现干扰和敲低IGF2BP2基因的腺病毒shRNA(short hairpin RNA，短发夹RNA)，可显著改善NASH小鼠的肝脏脂质沉积、炎症和纤维化，表明IGF2BP2腺病毒shRNA可能是治疗NASH的新型干预手段。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是为解决如何治疗非酒精性脂肪性肝炎的技术问题。
[0004]为达到解决上述问题的目的，本专利技术所采取的技术方案是提供一种RNA在制备治疗肝炎的药物中的应用，所述应用通过RNA干扰和抑制IGF2BP2基因的表达。
[0005]优选地，所述RNA的序列为SEQ ID No.1或SEQ ID No.2。
[0006]SEQ ID No.1序列为：ggagcaaguc aacacagau；
[0007]SEQ ID No.2序列为：gcuaaaccuc agugcacuu；
[0008]优选地，所述肝炎为非酒精性脂肪性肝炎，所述RNA的序列为SEQ ID No.1或SEQ ID No.2。
[0009]本专利技术提供一种IGF2BP2基因抑制剂在制备治疗肝炎的药物中的应用。
[0010]本专利技术提供一种IGF2BP2基因抑制剂在制备治疗非酒精性脂肪性肝炎的药物中的应用。
[0011]本专利技术在高脂高胆固醇高果糖饮食喂养的成年NASH小鼠中，通过尾静脉注射干扰和敲低IGF2BP2基因表达的腺病毒(Adenoviral short hairpin RNA，shRNA)，发现NASH相关症状得以明显缓解，包括肝脏脂质含量降低，肝脏炎症及肝纤维化减轻，因此，敲低IGF2BP2基因的腺病毒shRNA，可为NASH的治疗提供新的干预方法和手段。
[0012]相比现有技术，本专利技术具有如下有益效果：
[0013]RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA
(double
‑
stranded RNA，dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达，目前该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的治疗领域。
[0014]本专利技术中通过使用可以表达特异干扰RNA的IGF2BP2腺病毒shRNA，可以显著改善NASH相关症状，包括降低肝脏和血浆甘油三酯含量，降低血浆肝功能指标，减轻肝脏脂滴聚集，减轻肝脏炎性细胞浸润，减少肝脏胶原纤维沉积。所以通过干扰和敲低IGF2BP2基因表达，为NASH疾病的治疗提供一种新的手段。
附图说明
[0015]图1为对照组和实验组的肝脏组织的Western Blot实验结果图；
[0016]图2为对照组和实验组中小鼠肝脏组织指标变化图；
[0017]其中A图为对照组和实验组中小鼠肝脏组织的肝脏脂质含量变化图；B图为对照组和实验组中小鼠血浆甘油三酯含量变化图；C图为对照组和实验组中小鼠的血浆谷丙转氨酶变化图；D图为对照组和实验组中小鼠的血浆谷草转氨酶变化图。
[0018]图3为对照组和实验组中小鼠肝脏组织的肝脏病理检测伊红苏木精染色及油红O染色图；
[0019]图4为对照组和实验组中小鼠肝脏组织的马松染色、天狼猩红染色、F4/80染色和Ly6g染色图。
具体实施方式
[0020]为使本专利技术更明显易懂，兹以优选实施例，并配合附图作详细说明如下：
[0021]本专利技术提供一种RNA在制备治疗肝炎的药物中的应用，RNA的序列为SEQ ID No.1或SEQ ID No.2。
[0022]SEQ ID No.1序列为：ggagcaaguc aacacagau；
[0023]SEQ ID No.2序列为：gcuaaaccuc agugcacuu；
[0024]本专利技术提供一种RNA在制备治疗非酒精性脂肪性肝炎的药物中的应用，RNA的序列为SEQ ID No.1或SEQ ID No.2。
[0025]本专利技术提供一种IGF2BP2基因抑制剂在制备治疗肝炎的药物中的应用。
[0026]本专利技术提供一种IGF2BP2基因抑制剂在制备治疗非酒精性脂肪性肝炎的药物中的应用。
[0027]实施例
[0028]一.IGF2BP2基因腺病毒shRNA构建：
[0029]1.RNAi腺病毒载体构建：
[0030]目的基因：IGF2BP2；基因序列号：NM_183029；物种：小鼠(Mouse)
[0031]RNA干扰腺病毒载体构建流程：通过siRNA(小干扰RNA，Small interfering RNA)靶点设计制备双链DNAoligo,与腺病毒载体连接转化入感受态细胞，通过PCR鉴定，阳性克隆测序验证，获得含目的基因质粒。
[0032]1.1 siRNA设计：
[0033][0034]1.2工具载体：载体编号：GV119(购自上海吉凯基因化学技术有限公司)；
[0035]框架结构 hU6
‑
MCS
‑
CMV
‑
EGFP；对照插入序列：TTCTCCGAACGTGTCACGT；
[0036]1.3RNAi构建框架：
[0037][0038][0039]1.4合成片段
[0040]NO.SequenceIGF2BP2
‑
RNAi(90940
‑
1)
‑
accggGGAGCAAGTCAACACAGATttcaagagaATCTGTGTTGACTTGCTCCtttttgIGF2BP2
‑
RNAi(90940
‑
1)
‑
baattcaaaaaGGAGCAAGTCAACACAGATtctcttgaaATCTGTGTTGA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种RNA在制备治疗肝炎的药物中的应用，其特征在于，所述应用通过RNA干扰和抑制IGF2BP2基因的表达。2.如权利要求1所述的一种RNA在制备治疗肝炎的药物中的应用，其特征在于，所述RNA的序列为SEQ ID No.1或SEQ ID No.2。3.如权利要求1所述的一种RNA在制...

【专利技术属性】
技术研发人员：陆炎，周冰，骆云晨，
申请(专利权)人：复旦大学附属中山医院，
类型：发明
国别省市：