本发明专利技术涉及动物生物技术领域，具体涉及绵羊CTSD基因在调控初情期启动中的应用。本发明专利技术发现绵羊CTSD基因能够调控动物生殖激素的分泌以及生殖相关基因的表达，增强动物体内CTSD基因的表达能够促进生殖激素的分泌，提高生殖相关基因的表达量，进而促进动物初情期的启动。绵羊CTSD基因的新功能的发现为培育初情期早的绵羊品种提供了基因资源和新方法。早的绵羊品种提供了基因资源和新方法。
【技术实现步骤摘要】
绵羊CTSD基因在调控初情期启动中的应用
[0001]本专利技术涉及动物生物
，具体涉及绵羊CTSD基因在调控初情期启动中的应用。
技术介绍
[0002]初情期是指母畜初次发情并发生排卵、公畜睾丸具有分泌和生精功能的时期，是动物获得繁殖能力的重要时期。初情期出现的早晚直接关系到动物的繁殖性能，培育初情期早的母畜可以节约饲养成本，提高母畜的利用率。
[0003]多浪羊是新疆的优良肉脂兼用型绵羊品种，具有较高的繁殖能力。多浪羊具有初情期早、肉质鲜嫩、产肉多、毛质好、繁殖率高等优良性状。在饲养过程中，初情期早的绵羊可以增加母畜终生产羔数从而降低饲养成本，提高母畜利用率。开发与多浪羊初情期调控相关的基因对于培育初情期早的绵羊具有重要意义。
技术实现思路
[0004]本专利技术的目的是提供绵羊CTSD基因在调控初情期启动中的应用。
[0005]本专利技术以多浪羊为研究对象，分析其初情期启动机制。以初情期前、中、后的多浪羊下丘脑为试材，利用RNA
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seq测序分析技术寻找影响母羊发情的基因，经筛选和验证获得参与初情期调控的相关基因CTSD基因。本专利技术发现，CTSD基因具有调控生殖激素分泌、生殖相关基因表达的功能，增强CTSD基因基因的表达，生殖激素分泌增加，生殖相关基因表达增强，进而发挥调控初情期启动的功能。
[0006]具体地，本专利技术提供以下技术方案：
[0007]第一方面，本专利技术提供绵羊CTSD基因、其编码蛋白或含有所述CTSD基因的生物材料在调控动物生殖激素分泌中的应用。
[0008]以上所述的生殖激素为选自促性腺激素释放激素、促卵泡素、雌激素、孕激素、促黄体素中的一种或多种。
[0009]第二方面，本专利技术提供绵羊CTSD基因、其编码蛋白或含有所述CTSD基因的生物材料在调控动物生殖相关基因表达中的应用。
[0010]以上所述的生殖相关基因优选为GnRH基因。
[0011]第三方面，本专利技术提供绵羊CTSD基因、其编码蛋白或含有所述CTSD基因的生物材料在动物初情期调控中的应用。
[0012]以上所述的初情期调控为初情期启动的调控。
[0013]第四方面，本专利技术提供绵羊CTSD基因、其编码蛋白或含有所述CTSD基因的生物材料在初情期调控的动物遗传育种或转基因动物构建中的应用。
[0014]优选地，所述动物遗传育种、转基因动物构建为初情期早的动物遗传育种或转基因动物构建。
[0015]本专利技术中，绵羊CTSD基因的编码蛋白具有如下任一种氨基酸序列：
[0016](1)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；
[0017](2)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经一个或多个氨基酸的替换、插入或缺失得到的具有相同功能蛋白的氨基酸序列；
[0018](3)与如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列；优选地，所述同源性为至少95％；更优选为99％。
[0019]根据上述绵羊CTSD基因的编码蛋白的氨基酸序列，本领域技术人员能够确定绵羊CTSD基因的核苷酸序列。
[0020]作为本专利技术的一种实施方式，绵羊CTSD基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
[0021]本专利技术中，所述生物材料包括表达盒、载体或宿主细胞，其中，载体可以是质粒、病毒、转座子、噬菌体等，宿主细胞可以是微生物细胞或动物细胞。
[0022]以上所述的应用中，通过增强CTSD基因的表达，促进动物生殖激素分泌、增强动物生殖相关基因的表达或促进动物初情期的启动。
[0023]本专利技术中，所述动物优选为羊或鼠，更优选为绵羊或小鼠。
[0024]第五方面，本专利技术提供一种促进动物生殖激素分泌或促进动物初情期启动的方法，该方法包括增强CTSD基因表达的步骤；
[0025]所述CTSD基因的编码蛋白具有如下任一种氨基酸序列：
[0026](1)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；
[0027](2)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经一个或多个氨基酸的替换、插入或缺失得到的具有相同功能蛋白的氨基酸序列；
[0028](3)与如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列；优选地，所述同源性为至少95％；更优选为99％。
[0029]以上所述的方法中，生殖激素为选自促性腺激素释放激素、促卵泡素、雌激素、孕激素、促黄体素中的一种或多种。
[0030]以上所述的方法中，可通过基因工程技术增强动物体内CTSD基因的表达，例如：在动物细胞中导入CTSD基因的过表达载体等。
[0031]本专利技术的有益效果在于：本专利技术发现了绵羊CTSD基因能够调控动物生殖激素的分泌以及生殖相关基因的表达，增强动物体内CTSD基因的表达能够促进生殖激素的分泌，提高生殖相关基因的表达量，进而促进动物初情期的启动。绵羊CTSD基因的新功能的发现为培育初情期早的绵羊品种提供了基因资源和新方法。
附图说明
[0032]图1为本专利技术实施例2中CTSD基因过表达载体构建的菌落PCR鉴定结果图，其中，M：DL2000，从上到下分别是2000,1000,750,500,250,100bp；1
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6分别为不同克隆的菌落PCR产物。
[0033]图2为本专利技术实施例2中CTSD基因过表达载体转染小鼠下丘脑神经元细胞48小时的图片，其中，左侧图片为转染48h明场图，右侧图片为48h荧光图。
[0034]图3为本专利技术实施例2中CTSD基因过表达载体转染小鼠下丘脑神经元细胞后促卵泡素(FSH)的检测结果，其中，CON代表对照组，FSH代表CTSD基因过表达载体转染细胞。
[0035]图4为本专利技术实施例2中CTSD基因过表达载体转染小鼠下丘脑神经元细胞后促黄
体素(LH)的检测结果，其中，CON代表对照组，LH代表CTSD基因过表达载体转染细胞。
[0036]图5为本专利技术实施例2中CTSD基因过表达载体转染小鼠下丘脑神经元细胞后孕激素(P)的检测结果，其中，CON代表对照组，P代表CTSD基因过表达载体转染细胞。
[0037]图6为本专利技术实施例2中CTSD基因过表达载体转染小鼠下丘脑神经元细胞后促性腺激素释放激素(GnRH)的检测结果，其中，CON代表对照组，GnRH代表CTSD基因过表达载体转染细胞。
[0038]图7为本专利技术实施例2中CTSD基因过表达载体转染小鼠下丘脑神经元细胞后雌激素(E)的检测结果，其中，CON代表对照组，E代表CTSD基因过表达载体转染细胞。
[0039]图8为本专利技术实施例2中CTSD基因过表达对GnRH基因表达的影响，其中，CON为转染空载体的对照组，CTSD24h、CTSD48h、CTSD72h分别代表CTSD过表达载体转染24h、48h和72h。
具体实施方式
[0040]以下实施例用于说明本专利技术，但不用来本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.绵羊CTSD基因、其编码蛋白或含有所述CTSD基因的生物材料在调控动物生殖激素分泌中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生殖激素为选自促性腺激素释放激素、促卵泡素、雌激素、孕激素、促黄体素中的一种或多种。3.绵羊CTSD基因、其编码蛋白或含有所述CTSD基因的生物材料在调控动物生殖相关基因表达中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述生殖相关基因为GnRH基因。5.绵羊CTSD基因、其编码蛋白或含有所述CTSD基因的生物材料在动物初情期调控中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述初情期调控为初情期启动的调控。7.绵羊CTSD基因、其编码蛋白或含有所述CTSD基因的生物材料在初情期调控的动物遗传育种或转基因动物构建中的应用。8.根据权利要求1～7任一项所述的应用，其特征在于，所述绵羊CTSD基因的编码蛋白具有如下任一种氨基酸序列：(1)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；(2)如SE...
【专利技术属性】
技术研发人员：邢凤，高庆华，李庆瑾，隋志远，张继虎，张志帅，王晨光，李孝君，
申请(专利权)人：塔里木大学，
类型：发明
国别省市：
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