抗微生物剂敏感性试验及试剂盒制造技术

技术编号:32203940 阅读:50 留言:0更新日期:2022-02-09 17:08
本发明专利技术涉及一种快速测定微生物对抗微生物剂敏感性的方法,包括以下步骤:a)将含有微生物的第一样品与第一生长培养基接触,以形成第一混合物,其中所选第一生长培养基使微生物能够增殖和/或促进微生物细胞周期开始增殖;b)将含有微生物的第二样品与第二生长培养基接触,以形成第二混合物,其中第二生长培养基与第一生长培养基基本上相同,但进一步包含可能抑制或减缓微生物增殖的第一抗微生物剂;c)在适合于实现或促进微生物增殖的条件下,将第一混合物和第二混合物孵育30分钟或更短时间;d)使第一混合物和第二混合物或它们的一部分通过流式细胞仪,以对两种混合物中微生物的一个或多个生物化学参数和/或生物物理参数进行评估;和e)孵育后,将第一混合物中微生物的参数与第二混合物中的参数进行比较,检测第一抗微生物剂是否抑制或减缓微生物的增殖,从而确定微生物对所述抗微生物剂的敏感性。该方法特别适用于确定哪些抗微生物剂适合治疗微生物感染,例如尿路感染(UTI)。在相应的试剂盒中提供了加富生长培养基,一种或多种抗微生物剂和羰花青染料。羰花青染料。羰花青染料。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】1996;Hewitt and Nebe

Von

Caron 2004;Kell et al.1991;M
ü
ller et al.1993;Nebe

von Caron and Badley 1995;Shapiro 2008,2001;Shapiro 2003;Steen 1990)。流式细胞术也可用于对微生物(实际上是白细胞)计数以评估UTI(Chien et al.2007;Koken et al.2002;Shang et al.2013;Shayanfar et al.2007;Wang et al.2010),但在这些情况下不用于抗生素敏感性测试。还可以采用单细胞形态学成像,其中在有利的情况下,可以在15

30分钟或更短的时间内检测抗生素敏感性(Baltekin et al.2017;Choi et al.2014)。
[0005]许多工作人员已经认识到流式细胞术有可能用于检测细胞数量、形态(通过光散射)和生理学(通过添加特定的荧光染料报告生物化学或生理学的某些成分)本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种快速测定微生物对抗微生物剂敏感性的方法,包括以下步骤:a)将含有微生物的第一样品与第一生长培养基接触,以形成第一混合物,其中所选第一生长培养基使微生物能够增殖和/或促进微生物细胞周期开始增殖;b)将含有微生物的第二样品与第二生长培养基接触,以形成第二混合物,其中第二生长培养基与第一生长培养基基本上相同,但进一步包含可能抑制或减缓微生物增殖的第一抗微生物剂;c)在适合于实现或促进微生物增殖的条件下,将第一混合物和第二混合物孵育30分钟或更短时间;d)使第一混合物和第二混合物或它们的一部分通过流式细胞仪,以对这两种混合物中微生物的一个或多个生物化学参数和/或生物物理参数进行评估;和e)孵育后,将第一混合物中微生物的参数与第二混合物中微生物的参数进行比较,以检测第一抗微生物剂是否抑制或减缓微生物的增殖,从而确定微生物对所述抗微生物剂的敏感性。2.根据权利要求1所述的方法,其中步骤b)进一步包括将一种或多种含有微生物的其他样品与一种或多种其他生长培养基接触,以形成一种或多种其他混合物,其中所述一种或多种其他生长培养基与第一生长培养基相同,但进一步包含一种或多种可能抑制或减缓微生物增殖的其他抗微生物剂,其中所述一种或多种其他抗微生物剂彼此不同,并且与第一抗微生物剂不同。3.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述微生物的一种或多种生物化学参数和/或生物物理参数选自以下中的一种或多种:细胞大小、细胞数量、细胞膜电活动和/或核酸含量和/或核酸分布。4.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述微生物的一种或多种生物化学参数和/或生物物理参数通过评估一种或多种荧光染料或其他染料的摄取来测定。5.根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述参数是细胞大小、细胞数量和/或细胞膜电活动,并且其中所述培养基进一步包含羰花青染料,或者在步骤d)之前,将羰花青染料加入到混合物或混合物的一部分中。6.根据权利要求5所述的方法,其中所述羰花青染料包括3,3'

二丙基硫杂二羰花青碘化物(di

S

C3(5))。7.根据权利要求5或6所述的方法,其中所述羰花青染料在所述混合物中的浓度介于约1μM至约5μM。8.根据权利要求7所述的方法,其中所述羰花青染料在所述混合物中的浓度介于约3μM。9.根据前述权利要求5至8中任一项所述的方法,其中所述流式细胞仪依赖于640nm处的激发,在675
±
15...

【专利技术属性】
技术研发人员:D
申请(专利权)人:曼彻斯特大学
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1