采用表面增强拉曼光谱的分枝杆菌无标签检测制造技术

本文公开了一种采用表面增强拉曼光谱(SERS)鉴定分枝杆菌的方法，包括：将疑似包括分枝杆菌的样品配置在SERS活性基底上；检测对应于配置在SERS活性基底上的样品中的α分枝菌酸(alpha

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】采用表面增强拉曼光谱的分枝杆菌无标签检测
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请请求申请日2019年4月9日提交的申请号为10201903159V的新加坡专利申请的优先权，其内容通过引用全部并入本文。


[0003]本专利技术涉及一种鉴定分枝杆菌的方法，以及一种检测分枝杆菌疾病的方法，上述方法均采用表面增强拉曼光谱(surface enhanced Raman spectrosc opy，SERS)。

技术介绍

[0004]分枝菌酸(myclolic acid)为在其脂肪酸链上具有大约60～90个碳原子的高分子量脂肪酸，其中，所述脂肪酸链包括α
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支链烷基链以及β
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羟基链。分枝菌酸可以从多种细菌的细胞壁中找到，例如结核分枝杆菌(mycobacteri a tuberculosis)以及非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria，NTM)。
[0005]分枝菌酸可以由三种形式组成。三种形式可以包括具有环丙烷的α分枝菌酸(alpha
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种采用表面增强拉曼光谱(SERS)鉴定分枝杆菌(mycobacterium)的方法，所述方法包括：将疑似包括分枝杆菌的样品配置在SERS活性基底(SERS
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active substr ate)上；检测表面增强拉曼信号，所述表面增强拉曼信号对应于配置在SERS活性基底上的所述样品中的α分枝菌酸(alpha
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mycolic acid)、甲氧基分枝菌酸(methoxy
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mycolic acid)以及酮基分枝菌酸(keto
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mycolic acid)；以及测定所述表面增强拉曼信号的一个或多个强度比率，以鉴定所述分枝杆菌。2.根据权利要求1所述的方法，其中，配置所述样品包括提供液体形式的样品。3.根据权利要求2所述的方法，其中，提供液体形式的样品包括于溶剂中混合所述样品。4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述溶剂包括氯仿和甲醇。5.根据权利要求4所述的方法，其中，所述氯仿和甲醇的体积比为1:1
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9:1。6.根据权利要求1～5中任意一项所述的方法，其中，所述疑似包括分枝杆菌的样品未经提取处理，所述提取处理从疑似包括在所述样品中的分枝杆菌中提取α分枝菌酸、甲氧基分枝菌酸以及酮基分枝菌酸。7.根据权利要求1～5中任意一项所述的方法，还包括在将所述样品配置在SERS活性基底上之前，从疑似包括在所述样品中的分枝杆菌中提取α分枝菌酸、甲氧基分枝菌酸以及酮基分枝菌酸。8.根据权利要求7所述的方法，其中，提取所述的α分枝菌酸、甲氧基分枝菌酸以及酮基分枝菌酸包括破裂所述分枝杆菌的细胞壁，所述分枝杆菌疑似包括在所述样品中。9.根据权利要求7或8所述的方法，其中，提取所述的α分枝菌酸、甲氧基分枝菌酸以及酮基分枝菌酸包括对样品进行皂化、机械研磨、脱脂或其组合。10.根据权利要求7～9中任意一项所述的方法，还包括在将所述样品配置在SERS活性基底前从所述样品中去除脂质。11.根据权利要求7～10中任意一项所述的方法，其中，提取所述的α分枝菌酸、甲氧基分枝菌酸以及酮基分枝菌酸包括对疑似包括在所述样品中的分枝杆菌进行脱脂。12.根据权利要求11所述的方法，其中，所述脱脂包括：失活所述样品疑似包括的分枝杆菌；以及将所述样品分离为水相和有机相。13.根据权利要求12所述的方法，其中，失活所述的分枝杆菌包括在20～40℃的温度范围内孵育所述样品。14.根据权利要求13所述的方法，其中，孵育所述样品至少进行24小时。15.根据权利要求12～14中任意一项所述的方法，还包括：将所述水相与一种或多种有机溶剂混合，以形成混合物；将所述混合物分离为进一步水相、进一步有机相以及中间相，其中，所述中间相包括脱脂的疑似包括在所述样品中的分枝杆菌。16.根据权利要求15所述的方法，其特征在于，所述一种或多种有机溶剂包括氯仿。17.根据权利要求15或16所述的方法，还包括干燥所述中间相，以获得脱脂的疑似包括在所述样品中的分枝杆菌。
18.根据权利要求17所述的方法，还包括：将所述脱脂的疑似包括在所述样品中的分枝杆菌与乙醇和碱的混合物接触；加热如上所得的混合物；以及将提取溶剂和酸添加至所述加热的混合物中。19.根据权利要求18所述的方法，其中，所述提取溶剂包括氯仿。20.根据权利要求18或19所述的方法，其中，所述酸包括盐酸。21.根据权利要求1～20中任意一项所述的方法，其中，将所述样品配置在所述的SERS活性基底上包括在将所述样品配置在所述的SERS活性基底上之前，于溶剂中混合所述样品。22.根据权利要求1～21中任意一项所述的方法，其中，所述SERS活性基底包括以下组分或由以下组分组成：金、银或其合金。23.根据权利要求22所述的方法，其中，所述SERS活性基底包括金、银、其合金或其混合物的纳米粒子。24.根据权利要求22所述的方法，其中，所述SERS活性基底为衬底，所述衬底包括至少一种配置于所述衬底表面的SERS活性纳米结构。25.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：马利尼，
申请(专利权)人：麦特岦私人有限公司，
类型：发明
国别省市：