一种韭菜病害防治复合菌及其制备方法技术

本发明专利技术提供一种韭菜病害防治复合菌，所述复合菌按质量份计，包括以下组分：淡紫拟青霉干粉6.5

【技术实现步骤摘要】
一种韭菜病害防治复合菌及其制备方法


[0001]本专利技术涉及一种韭菜病害防治复合菌及其制备方法，属于农作物防病治病


技术介绍

[0002]韭菜（A. tuberosumRottl. ex Spreng.），属百合科多年生草本植物，具特殊强烈气味，在我国南北各地均有栽培，是我国生产范围最广泛的香辛叶菜类蔬菜之一，韭菜营养丰富，含多种维生素及钙、磷、铁等无机盐，粗纤维、蛋白质含量 也较多。韭菜气味芳香，不仅适于炒食、做馅和调味，而且具有很好的医疗作用，深受人们的喜爱。
[0003]韭菜的病害主要有韭菜灰霉病、韭菜白菌病、韭菜白斑病等，现有技术主要防治方法为化学药物防治，化学药物带来的环境污染、抗药性等问题日渐突出，与化学防治方法相比，生物防治具有安全、有效、持久等特点，可以通过生物防治来解决韭菜病害问题。
[0004]CN111990402A公开了脂肽或脂肽提取物的新的应用，通过枯草芽孢杆菌和其提取物防治韭菜灰霉病，是通过单一菌种来达到防治效果，而且防治的病害类型仅为韭菜灰霉病，防治效果单一。
[0005]目前市面上还没有防治韭菜多种病害的复合菌，可以通过制备复合菌，来达到综合防治效果，液体复合菌较固体复合菌使用更加方便，但是防治效果不稳定，并且液体复合菌的存放时间短，导致长时间存放后有效微生物含量下降，防治效果下降。
[0006]CN1331534C公开了一种防治水产养殖动物疾病的复合菌苗，通过添加一定量防腐剂苯甲醇延长存放日期，限制杂菌繁殖，但同时会造成有效菌活性下降。r/>[0007]综上所述，现有复合菌存在以下缺点：（1）现有技术的液体复合菌防治效果不稳定，同时间多批次使用批与批之间效果差异大；（2）使用防腐剂来保证复合菌的存放日期，限制杂菌繁殖，但同时会造成有效菌防治效果的下降。

技术实现思路

[0008]本专利技术所要解决的技术问题是克服现有技术存在的缺陷，通过添加枝接的羧甲基纤维素钠，链状聚乙二醇制成复合菌，实现以下专利技术目的：（1）液体复合菌防治效果稳定，同时间多批次使用批与批之间效果差异小；（2）不使用防腐剂来保证复合菌的存放日期，限制杂菌繁殖同时，不会造成有效菌防治效果的下降。
[0009]为解决上述技术问题，本专利技术采取以下技术方案：一种韭菜病害防治复合菌，所述复合菌按质量份计，包括以下组分：淡紫拟青霉干粉6.5
‑
7.5份、地衣芽孢杆菌干粉3.5
‑
4.5份、双乙烯酮枝接羧甲基纤维素钠1.8
‑
2.2份、链状聚乙二醇0.8
‑
1.2份、硼酸钠缓冲液1.8
‑
2.2份、海藻酸0.8
‑
1.2份、海藻酸钠0.8
‑
1.2份、
蔗糖0.8
‑
1.2份、水43
‑
47份。
[0010]所述淡紫拟青霉干粉，将淡紫拟青霉用常规方法培养并制成干粉，活菌数量为4.1
‑
4.3*10
11 CFU /g；所述地衣芽孢杆菌干粉，将地衣芽孢杆菌用常规方法培养并制成干粉，活菌数量为2.4
‑
2.6*10
11 CFU /g。
[0011]所述淡紫拟青霉（Paecilomyces lilacinus），菌种保藏号为ACCC 30636，由市场购买所得；所述地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)，菌种保藏号为ACCC 19747，由市场购买所得。
[0012]以下是对上述技术方案的进一步改进：所述制备方法包括制备双乙烯酮枝接羧甲基纤维素钠、制备链状聚乙二醇、制备复合菌。
[0013]所述制备双乙烯酮枝接羧甲基纤维素钠，将羧甲基纤维素钠与去离子水混合，加热至70
‑
75℃，保温状态下于900
‑
1200r/min下搅拌3
‑
4h,至羧甲基纤维素钠完全溶解得到羧甲基纤维素钠溶液，完全溶解后冷却至室温，用质量浓度4
‑
6%的盐酸溶液调节pH至7.1
‑
7.3，然后将羧甲基纤维素钠溶液放入冷凝回流器，在50
‑
70W功率下超声25
‑
35min，期间通入氮气保护，超声下保持温度48
‑
52℃，然后加入高锰酸钾溶液和硫酸溶液，4
‑
6min内缓慢加入，加入完成后在600
‑
1000r/min下搅拌15
‑
30min，搅拌完成后加入单体双乙烯酮，在250
‑
350r/min下反应5
‑
7h，期间保持温度48
‑
52℃，反应完成后冷却至室温，用乙醇洗涤，抽滤，最后用去离子水洗涤，真空干燥至恒重，得到双乙烯酮枝接羧甲基纤维素钠。
[0014]所述羧甲基纤维素钠分子量为80000
‑
90000；所述羧甲基纤维素钠溶液中羧甲基纤维素钠与水的质量比为1:75
‑
85；所述高锰酸钾溶液浓度为0.08
‑
0.12mol/L；所述硫酸溶液质量浓度为8
‑
12%；所述高锰酸钾溶液、硫酸溶液、甲基纤维素钠溶液质量比为4
‑
6:1
‑
2：1850
‑
2150；所述单体双乙烯酮与甲基纤维素钠溶液的质量比为1:480
‑
520。
[0015]所述制备链状聚乙二醇，将四甲基哌啶氮氧化物、溴化钠与去离子水混合，在500
‑
700r/min下搅拌至完全溶解，溶解完成后加入聚乙二醇、次氯酸钠溶液在250
‑
350r/min下反应20
‑
30min，再加入乙醇溶液，用盐酸溶液调节至pH至1.6
‑
1.8，然后用二氯甲烷萃取，重复三次，取三次萃取后下层清液混合，溶解于热乙醇中，置于
‑
5~15℃环境下保持14
‑
20h，然后取出，于38
‑
42℃真空干燥，得到链状聚乙二醇。
[0016]8. 根据权利要求7所述的一种韭菜病害防治复合菌的其制备方法，其特征在于：所述四甲基哌啶氮氧化物、溴化钠、去离子水的质量比为1:1:480
‑
520；所述次氯酸钠溶液有效氯含量为10.2%；所述加入聚乙二醇、次氯酸钠溶液与去离子水的质量比为1:1:4.5
‑
5.5；所述乙醇溶液质量浓度为99.5%；所述加入乙醇溶液与去离子水的质量比为1:4.5
‑
5.5。
[0017]所述制备复合菌，所述复合菌制备方法，将淡紫拟青霉干粉、地衣芽孢杆菌干粉、双乙烯酮枝接羧甲基纤维素钠、链状聚乙二醇、硼酸钠缓冲液、海藻酸、海藻酸钠、蔗糖、水
混合得到复合菌。
[0018]所述复合菌有效微生物含量为2.本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种韭菜病害防治复合菌，其特征在于，所述复合菌按质量份计，包括以下组分：淡紫拟青霉干粉6.5
‑
7.5份、地衣芽孢杆菌干粉3.5
‑
4.5份、双乙烯酮枝接羧甲基纤维素钠1.8
‑
2.2份、链状聚乙二醇0.8
‑
1.2份、硼酸钠缓冲液1.8
‑
2.2份、海藻酸0.8
‑
1.2份、海藻酸钠0.8
‑
1.2份、蔗糖0.8
‑
1.2份、水43
‑
47份。2.根据权利要求1所述的一种韭菜病害防治复合菌，其特征在于：所述淡紫拟青霉干粉，将淡紫拟青霉用常规方法培养并制成干粉，活菌数量为4.1
‑
4.3*10
11 CFU /g；所述地衣芽孢杆菌干粉，将地衣芽孢杆菌用常规方法培养并制成干粉，活菌数量为2.4
‑
2.6*10
11 CFU /g。3.根据权利要求2所述的一种韭菜病害防治复合菌，其特征在于：所述淡紫拟青霉，菌种保藏号为ACCC 30636，由市场购买所得；所述地衣芽孢杆菌，菌种保藏号为ACCC 19747，由市场购买所得。4.一种韭菜病害防治复合菌的其制备方法，其特征在于，所述制备方法包括制备双乙烯酮枝接羧甲基纤维素钠、制备链状聚乙二醇、制备复合菌。5.根据权利要求4所述的一种韭菜病害防治复合菌的其制备方法，其特征在于：所述制备双乙烯酮枝接羧甲基纤维素钠，将羧甲基纤维素钠与去离子水混合，加热至70
‑
75℃，保温状态下于900
‑
1200r/min下搅拌3
‑
4h,至羧甲基纤维素钠完全溶解得到羧甲基纤维素钠溶液，然后冷却至室温，用质量浓度4
‑
6%的盐酸溶液调节pH至7.1
‑
7.3，然后将羧甲基纤维素钠溶液放入冷凝回流器，在50
‑
70W功率下超声25
‑
35min，期间通入氮气保护，超声下保持温度48
‑
52℃，然后加入高锰酸钾溶液和硫酸溶液，4
‑
6min内缓慢加入，加入完成后在600
‑
1000r/min下搅拌15
‑
30min，搅拌完成后加入单体双乙烯酮，在250
‑
350r/min下反应5
‑
7h，期间保持温度48
‑
52℃，...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩威华，张玉娟，刘丽丽，刘镇，王于玺，
申请(专利权)人：保罗蒂姆汉潍坊生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：