本发明专利技术公开了一种饲用枯草芽孢杆菌及其应用，本发明专利技术的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)M6，保藏编号为CGMCC No.22855。本发明专利技术的枯草芽孢杆菌M6为革兰氏染色阳性菌，同时耐80℃的高温、可在pH值3.0以上的酸性环境生长，耐胆盐能力强，兼具抑制革兰氏阳性病原菌和革兰氏阴性病原菌的作用，同时具有降解霉菌毒素的作用，将枯草芽孢杆菌M6制成菌剂后用于饲喂动物效果安全可靠，在促进营养物质消化吸收、提高饲料转化效率、促进生长方面有积极作用。用。
【技术实现步骤摘要】
一株高效定向表达细菌素M6的枯草芽孢杆菌及其应用
[0001]本专利技术属于微生物学和饲用益生菌领域，具体地，涉及一种具有抑菌能力，耐高温、耐酸和耐胆盐的饲用枯草芽孢杆菌及其应用。
技术介绍
[0002]抗生素在畜禽生产上的应用已有70多年历史，在幼龄畜禽生产中常添加低剂量抗生素以缓解应激，促进饲料转化效率和肠道健康。然而，使用抗生素显著促进了抗生素抗性基因在生态环境中的传播和富集，引起了公众的高度关注。探寻高效安全的抗生素替代品成为当下研究的热点。
[0003]葡萄球菌是畜禽生产中常见的革兰氏阳性致病菌。金黄色葡萄球菌能够造成幼龄畜禽局部脓肿、脓毒败血症、家禽和仔猪渗出性皮炎等，严重损害畜禽健康和养殖户生产效益。除此革兰氏阳性菌，革兰氏阴性菌也对畜禽生产造成较大损害。其中，大肠杆菌和沙门氏菌是主要的人畜共患的革兰氏阴性病原菌，会造成腹泻及其他感染。对于仔猪和禽类，致病性大肠杆菌和沙门氏菌的发病率约5％～30％，严重者可致死亡，病死率达90％以上，给畜禽养殖业带来了极大危害，造成了较大的经济损失。
[0004]畜牧生产中不仅致病性病原菌严重影响畜禽健康，饲料中的霉菌毒素也是威胁畜禽健康的重要因素。T2毒素一种由镰孢菌属(如拟孢镰刀菌(Fusarium sporoides)和三线镰刀菌(Fusarium trifolium)等)产生的A类单端孢霉烯族霉菌毒素，本身具有分布广、繁殖快、耐热、毒性大、残留时间长、难处理等特点。T2毒素对人和动物具有多种毒性，能够造成呕吐、腹泻、皮肤刺激、拒食、恶心、神经障碍、流产等急性和慢性疾病，高剂量的T2毒素还能促进白细胞的快速凋亡。T2毒素主要分布在霉变的玉米、黑麦、小麦、大米等粮食作物及其制品以及饲料中。常见的T2毒素脱毒方法有物理、化学和生物法三大类。化学法脱除毒素的效果比物理脱毒好，但是化学脱毒可能影响饲料安全及饲料适口性。生物脱毒法专一性强，成本相对较低且对储粮及饲料造成的损失少，相对其他脱毒方法生物脱毒法更为高效、安全。
[0005]芽孢杆菌是一种革兰氏阳性，需氧，其具有杆状形态，能够内生孢子形成细菌，且分布广泛。许多芽孢杆菌属的细菌已在食品工业中广泛使用，主要代表菌属包括枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)等。枯草芽孢杆菌因其具有分泌消化酶，抑制病原菌定植等多种作用，可以被用作益生菌添加到动物饲料中，来提高动物的生产性能。
[0006]尽管已报道的芽孢杆菌具有有效抑制革兰氏阳性病原菌的特性，但目前未见既对畜禽致病性病原菌有抑制作用，同时能够降解饲料中T2毒素的菌株，若能够筛选鉴定出一种可以同时兼具上述两种功能的芽孢杆菌菌株，则有助于促进抗生素替代品、微生态制剂的发展，在后抗生素时代推动畜禽生产模式更加绿色、安全、健康。
技术实现思路
[0007]本专利技术的目的是提供一种兼具抗菌益生和降解霉菌毒素功能的饲用枯草芽孢杆菌及其应用，本专利技术提供的枯草芽孢杆菌具有抗逆性强、抑制致病菌和降解霉菌毒素的效果。
[0008]第一方面，本专利技术提供枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)M6。本专利技术的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是从北京市某养猪实验基地土壤样品中分离并经过紫外诱变后筛选得到的，命名为M6。经过16SRNA基因序列分析，该菌株M6为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。该菌株已于2021年7月09日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，分类命名为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis，保藏号为CGMCC No.22855。
[0009]本专利技术的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)M6的微生物学特性为：革兰氏阳性菌，细胞形态为杆状，长度为2
‑
5μm，有芽孢生成且芽孢不膨大；单菌落大小为8
‑
10mm，颜色呈乳白色，不透明，菌落表面褶皱，边缘呈不规则锯齿状。菌体在60℃、80℃和100℃处理，每个处理3个重复，处理结束后采用平板倾注法测定其活菌数。可在pH值2.0以上的酸性环境生长，耐胆盐能力强。具有高效抑制革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌和革兰氏阴性菌大肠杆菌、沙门氏菌的特性。
[0010]本专利技术的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)M6的DNA序列如SEQ ID NO:1所示。
[0011]SEQ ID NO:1
[0012]tcgagcggacagatgggagcttgctccctgatgttagcggcggacgggtgagtaacacgtgggtaacctgcctgtaagactgggataactccgggaaaccggggctaataccggatggttgtctgaaccgcatggttcagacataaaaggtggcttcggctaccacttacagatggacccgcggcgcattagctagttggtgaggtaacggctcaccaaggcgacgatgcgtagccgacctgagagggtgatcggccacactgggactgagacacggcccagactcctacgggaggcagcagtagggaatcttccgcaatggacgaaagtctgacggagcaacgccgcgtgagtgatgaaggttttcggatcgtaaagctctgttgttagggaagaacaagtgccgttcaaatagggcggcaccttgacggtacctaaccagaaagccacggctaactacgtgccagcagccgcggtaatacgtaggtggcaagcgttgtccggaattattgggcgtaaagggctcgcaggcggtttcttaagtctgatgtgaaagcccccggctcaaccggggagggtcattggaaactggggaacttgagtgcagaagaggagagtggaattccacgtgtagcggtgaaatgcgtagagatgtggaggaacaccagtggcgaaggcgactctctggtctgtaactgacgctgaggagcgaaagcgtggggagcgaacaggattagataccctggtagtccacgccgtaaacgatgagtgctaagtgttagggggtttccgccccttagtgctgcagctaacgcattaagcactccgcctggggagtacggtcgcaagactgaaactcaaaggaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatgtggtttaattcgaagcaacgcgaagaaccttaccaggtcttgacatcctctgacaatcctagagataggacgtccccttcgggggcagagtgacaggtggtgcatggttgtcgtcagctcgtgtcgt本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)M6，保藏编号为CGMCC No.22855。2.一种菌剂，其特征在于，所述菌剂含有权利要求1所述的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)M6。3.饲料添加剂或动物饲料，其特征在于，所述饲料添加剂或动物饲料含有权利要求1所述的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)M6。4.抑菌药物，其特征在于，所述药物含有权利要求1所述的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)M6。5.权利要求1所述的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)在制备用于抑制畜禽胃肠道病原菌的药物中的用途。6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘虎，马曦，姬琳堡，张泽宇，宋庆义，刘天龙，董彦君，
申请(专利权)人：安阳中农大生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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