用于双歧杆菌培养的组合式稀释液及其使用方法和双歧杆菌的检测方法技术

技术编号:32110412 阅读:88 留言:0更新日期:2022-01-29 18:53
本发明专利技术公开了一种用于双歧杆菌培养的组合式稀释液、组合式稀释液的使用方法及双歧杆菌的检测方法,组合式稀释液包括样品稀释液和梯度稀释液,样品稀释液为改良蛋白胨缓冲液;梯度稀释液为氯化钠蛋白胨缓冲液。本发明专利技术的双歧杆菌检测方法使用莫匹罗星锂盐+半胱氨酸改良双歧杆菌琼脂培养基,采用两步稀释法,第一步样品制备采用改良蛋白胨缓冲液,第二步梯度稀释采用氯化钠蛋白胨缓冲液;同时接种方法使用涂布法或螺旋接种法。本发明专利技术所提供的双歧杆菌检测方法可以完全抑制乳杆菌的生长,特异性好,双歧杆菌检出率显著提高,能够准确检测乳杆菌和双歧杆菌混合菌株中双歧杆菌的数量。杆菌和双歧杆菌混合菌株中双歧杆菌的数量。杆菌和双歧杆菌混合菌株中双歧杆菌的数量。

【技术实现步骤摘要】
用于双歧杆菌培养的组合式稀释液及其使用方法和双歧杆菌的检测方法


[0001]本专利技术涉及微生物
,尤其涉及一种用于双歧杆菌培养的组合式稀释液及其使用方法和双歧杆菌的检测方法。

技术介绍

[0002]乳酸菌(Lactic acid bacteria)是一类利用可发酵碳水化合物产生大量乳酸的菌群,主要分布在乳杆菌属、链球菌属、明串珠菌属、双歧杆菌属及片球菌属等几个属中。乳酸菌在调节肠道菌群、改善胃肠道环境、降低胆固醇、控制内毒素以及提高食物消化效率等方面发挥着至关重要的作用,被广泛应用于日常生产生活中,如医药制造、食品生产及新型生物技术研发等领域。但是乳酸菌对环境条件以及培养基的营养成分要求较高,双歧杆菌更是如此。在工业化生产应用过程中,通常是产品中含有几个不同种属的乳酸菌。但是对于由几种乳酸菌混合在一起的产品中乳酸菌数量的检测,尤其是双歧杆菌的检测,目前还没有统一的通用型方法可以进行准确的检测。
[0003]目前对于混合菌株中双歧杆菌的检测,虽然食品微生物检测国家标准GB4789.35

2016中提出了一种检测本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于双歧杆菌培养的组合式稀释液,其特征在于,包括样品稀释液和梯度稀释液,所述样品稀释液为改良蛋白胨缓冲液;所述梯度稀释液为氯化钠蛋白胨缓冲液。2.如权利要求1所述的用于双歧杆菌培养的组合式稀释液,其特征在于,所述改良蛋白胨缓冲液包括:蛋白胨8

12g/L,氯化钠3

7g/L,磷酸氢二钠3

5g/L,磷酸二氢钾1

3g/L;所述氯化钠蛋白胨缓冲液包括:蛋白胨0.5

2g/L,氯化钠5

10g/L;优选地,所述改良蛋白胨缓冲液包括:蛋白胨10g/L,氯化钠5g/L,磷酸氢二钠3.5g/L,磷酸二氢钾1.5g/L;所述氯化钠蛋白胨缓冲液包括:蛋白胨1g/L,氯化钠8.5g/L。3.一种如权利要求1或2所述的组合式稀释液的使用方法,其特征在于,包括以下步骤:改良蛋白胨缓冲液制备步骤:将改良蛋白胨缓冲液的各组分混合,加入水,搅拌至充分溶解,调节pH,灭菌,得改良蛋白胨缓冲液;氯化钠蛋白胨缓冲液制备步骤:将氯化钠蛋白胨缓冲液的各组分混合,加入水,搅拌至充分溶解,调节pH,灭菌,得氯化钠蛋白胨缓冲液;样品制备步骤:取预设量的样品,与预设量的所述改良蛋白胨缓冲液混合,均质,制成样品匀液;稀释步骤:取预设量的所述样品匀液,与预设量的所述氯化钠蛋白胨缓冲液混合均匀,依次做递增稀释。4.如权利要求3所述的组合式稀释液的使用方法,其特征在于,包括以下步骤:改良蛋白胨缓冲液制备步骤:所述改良蛋白胨缓冲液包括蛋白胨10g/L,氯化钠5g/L,磷酸氢二钠3.5g/L,磷酸二氢钾1.5g/L,将配方量的蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钠和磷酸二氢钾混合,加入水,搅拌至充分溶解,调节pH至7.0
±
0.1,分装后121℃高压灭菌15min,得改良蛋白胨缓冲液;氯化钠蛋白胨缓冲液制备步骤:所述氯化钠蛋白胨缓冲液包括蛋白胨1g/L,氯化钠8.5g/L,将配方量的蛋白胨和氯化钠混合,加入水,搅拌至充分溶解,分装后121℃高压灭菌15min,得氯化钠蛋白胨缓冲液;样品制备步骤:以无菌操作称取25g样品,置于装有225mL所述改良蛋白胨缓冲液均质袋中,于均质拍打器拍打均质1min,拍打频率为8次/秒,制成1:10的样品匀液;稀释步骤:吸取1:10样品匀液1mL,沿管壁缓慢注于装有9mL所述氯化钠蛋白胨溶液的无菌试管中,混合均匀,制成1:100的样品匀液;按上述稀释操作顺序,做10倍递增稀释,得到一系列样品稀释液。5.一种采用如权利要求1或2所述的组合式稀释液的双歧杆菌的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:双歧杆菌培养基配制步骤:配制基础培养基,往灭菌好的基础培养基中加入莫匹罗星锂盐溶液和半胱氨酸盐酸盐溶液,混合均匀,得到双歧杆菌培养基;改良蛋白胨缓冲液制备步骤:将改良蛋白胨缓冲...

【专利技术属性】
技术研发人员:赵飞黄惠英黄珊珊胡瑞标
申请(专利权)人:合生元广州健康产品有限公司
类型:发明
国别省市:

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