抗TIGIT抗体制造技术

提供了抑制TIGIT介导的信号传导的抗TIGIT抗体及其抗原结合片段，以及包含所述抗体或其抗原结合片段的组合及它们的使用方法。体或其抗原结合片段的组合及它们的使用方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗TIGIT抗体

技术介绍

[0001]癌症免疫疗法依赖于对免疫系统的调节以提高对肿瘤细胞的识别和反应。这种调节可以通过包括活化免疫细胞上存在的共刺激分子或经由抑制共抑制受体在内的多种机制实现。免疫响应的活化是一种复杂的机制，涉及许多细胞群，如对于启动抗原特异性反应而言重要的抗原呈递细胞以及负责破坏肿瘤细胞的效应细胞。调节效应细胞如细胞毒性T细胞的活性的机制很多，并且代表了癌症免疫疗法背景下选择的靶标。
[0002]TIGIT(具有Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体)，也称为WUCAM、VSIG9或Vstm3，是在NK、CD8+和CD4+ T细胞以及调节性T细胞(Treg细胞，或简称为“Treg”)上优先表达的共抑制受体。TIGIT是跨膜蛋白，其含有在其细胞内部分中的已知ITIM结构域、跨膜结构域和在该受体的细胞外部分上的免疫球蛋白可变结构域。描述了几种配体会与TIGIT受体结合，其中CD155/PVR显示出最佳亲和力，其次是CD113/PVRL3和CD112/PVRL2(Yu等(2009)Nat.Immunol.10:48)。DNAM/CD226，一种也在NK和T细胞上表达的已知共刺激受体，与TIGIT竞争结合CD155和CD112但亲和力较低，这表明严格控制这些效应细胞的活化可避免对表达CD155配体的正常细胞的不受控制的细胞毒性。
[0003]在肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)上和在疾病环境诸如HIV感染中，TIGIT的表达增高。与TIGIT阴性对应物相比，TIGIT表达标志着具有较低效应子功能的耗竭性T细胞(Kurtulus等(2015)J.Clin.Invest.276:112；Chew等(2016)Plos Pathogens.12)。相反，与TIGIT阴性Treg群体相比，表达TIGIT的Treg细胞显示出增强的免疫抑制活性(Joller等(2014)Immunity.40:569)。
[0004]如已经证明是免疫治疗的相关靶标并且其拮抗性抗体已被批准用于治疗人癌症的其它在T细胞上表达的共抑制受体(PD1或CTLA4)一样，拮抗性抗TIGIT抗体的开发可帮助开启免疫系统并且更好地对抗癌细胞。已经有人提出，单一疗法或与a
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PD1抗体组合的拮抗性抗TIGIT抗体可以在临床前模型中实现强的抗肿瘤功效(Johnston等(2014)Cancer Cell 26:1；WO2016/028656；US2016/0176963；US2016/0376365，其全部通过引用并入本文)。
[0005]因此，可抑制TIGIT受体活性的对TIGIT具有特异性的拮抗性抗体提供了降低与肿瘤微环境相关的免疫抑制作用并且由此提高对肿瘤细胞的抗肿瘤免疫响应的机会。

技术实现思路

[0006]本专利技术提供了可以降低TIGIT介导的信号传导的免疫抑制作用的抗TIGIT抗体。具体而言，本专利技术的抗体或抗原结合片段可以通过阻止T细胞(常规αβT细胞和非常规γδT细胞)和NK细胞上的配体结合和/或耗竭TIGIT阳性Treg细胞，和/或通过诱导TIGIT受体的内化来抑制TIGIT介导的免疫抑制。
[0007]在一个方面，本专利技术提供了分离的抗体或其抗原结合片段，其与人TIGIT结合并且包含含有选自图1所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3序列的重链CDR1(HCDR1)、重链CDR2(HCDR2)和重链CDR3(HCDR3)的重链可变结构域，并且还包含含有选自图2所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3序列的轻链CDR1(LCDR1)、轻链CDR2(LCDR2)和轻链CDR3(LCDR3)的轻链可变结构域。
[0008]在某些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段包含HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3的组合，其中所述组合选自由来自图1中各抗体的HCDR与来自图2中相应抗体的LCDR形成的组合的组。
[0009]在某些实施方案中，根据本专利技术的抗体或抗原结合片段可以包含重链可变结构域，所述重链可变结构域具有选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID No:211、213、215、217、219、221、223、225、227、229、231、233、235、237、239、327、329和331，以及与所述氨基酸序列表现出至少90％、95％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列；并且任选地包含轻链可变结构域，所述轻链可变结构域具有选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID No:212、214、216、218、220、222、224、226、228、230、232、234、236、238、240、328、330和332的氨基酸序列，以及与所述氨基酸序列表现出至少90％、95％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列。
[0010]在某些实施方案中，所述抗体或抗原结合片段包含重链可变结构域和轻链可变结构域的组合，其中所述组合选自由来自图5中各抗体的VH或与其表现出至少90％、95％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列与来自图5中相同抗体的VL或与其表现出至少90％、95％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列形成的组合的组。
[0011]本文提供的最优选的抗体和抗原结合片段是基于本文提供的抗体31282的CDR或完全可变结构域的那些。
[0012]如本文所证明的，基于抗体31282的这些优选的抗TIGIT抗体和抗原结合片段具有特别令人惊讶且有利的特性。这些特性包括：与先前描述的每种受试抗TIGIT抗体相比，对在CD8 T细胞(来自健康供体或来自癌症患者)上表达的TIGIT的亲和力更高；与先前描述的每种受试抗TIGIT抗体相比，与CD155/PVR竞争的IC
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更佳；与先前描述的每种受试抗TIGIT抗体相比，在T细胞活化测定中的EC
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更佳；以及强力地提高来自癌症患者外周血的T细胞中并且重要的是肿瘤浸润淋巴细胞中的活性。此外，本文令人惊讶地显示，根据本专利技术的抗体和抗原结合片段，特别是基于抗体31282的那些，优先耗竭Treg细胞。也就是说，与常规CD4和CD8T细胞相比，暴露于所提供的抗TIGIT抗体的表达TIGIT的Treg细胞经历更大比例的裂解。这令人惊讶，因为常规CD4和CD8 T细胞也表达TIGIT，但在与所述抗体接触时不会经历同样程度的细胞裂解。还令人惊讶地显示，根据本专利技术的抗体和抗原结合片段，特别是基于抗体31282的那些，不仅促进常规T细胞的促炎活性，而且还提高非常规γδT细胞的活性。
[0013]因此，在某些优选的实施方案中，本文提供了包含HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3的抗体或抗原结合片段，其中：
[0014]HCDR1包含SEQ ID NO:16(YTFTSYYMH)或由其组成，
[0015]HCDR2包含SEQ ID NO:17(VIGPSGASTSYAQKFQG)或由其组成，
[0016]HCDR3包含SE本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种促进T细胞活性的方法，所述方法包括使人γδT细胞群与结合至人TIGIT的抗体或其抗原结合片段接触。2.根据权利要求1所述的促进T细胞活性的方法，其中所述方法在体外进行。3.根据权利要求1所述的促进T细胞活性的方法，其中所述方法在人受试者体内进行。4.根据权利要求3所述的促进T细胞活性的方法，其中所述人受试者患有癌症。5.根据权利要求3所述的促进T细胞活性的方法，其中所述人受试者患有病毒感染，任选地其中所述病毒感染是CMV感染。6.一种治疗受试者的癌症的方法，所述方法包括将结合至人TIGIT的抗体或其抗原结合片段施用于所述受试者。7.根据权利要求6所述的治疗受试者的癌症的方法，其中所述癌症选自肝癌、肺癌、胰腺癌和T细胞淋巴瘤。8.根据权利要求6或7所述的治疗受试者的癌症的方法，其中所述癌症选自肝细胞癌、胰腺癌、肺癌和Sezary综合征。9.根据权利要求1
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5中任一项所述的促进T细胞活性的方法或根据权利要求6
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8中任一项所述的治疗癌症的方法，其中所述方法还包括使所述γδT细胞群与抗PD1抗体、抗PD
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L1抗体、抗41BB抗体、抗OX40抗体、抗GITR抗体和抗ICOS抗体中的一种或多种接触。10.根据权利要求1
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6中任一项所述的促进T细胞活性的方法或根据权利要求6
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9中任一项所述的治疗癌症的方法，其中所述抗体或抗原结合片段包含HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3的组合，其中所述组合选自由以下组成的组：(i)包含SEQ ID NO:16的HCDR1、包含SEQ ID NO:17的HCDR2、包含SEQ ID NO:18的HCDR3、包含SEQ ID NO:61的LCDR1、包含SEQ ID NO:62的LCDR2和包含SEQ ID NO:63的LCDR3；(ii)包含SEQ ID NO:4的HCDR1、包含SEQ ID NO:5的HCDR2、包含SEQ ID NO:6的HCDR3、包含SEQ ID NO:49的LCDR1、包含SEQ ID NO:50的LCDR2和包含SEQ ID NO:51的LCDR3；(iii)包含SEQ ID NO:7的HCDR1、包含SEQ ID NO:8的HCDR2、包含SEQ ID NO:9的HCDR3、包含SEQ ID NO:52的LCDR1、包含SEQ ID NO:53的LCDR2和包含SEQ ID NO:54的LCDR3；(iv)包含SEQ ID NO:10的HCDR1、包含SEQ ID NO:11的HCDR2、包含SEQ ID NO:12的HCDR3、包含SEQ ID NO:55的LCDR1、包含SEQ ID NO:56的LCDR2和包含SEQ ID NO:57的LCDR3；(v)包含SEQ ID NO:13的HCDR1、包含SEQ ID NO:14的HCDR2、包含SEQ ID NO:15的HCDR3、包含SEQ ID NO:58的LCDR1、包含SEQ ID NO:59的LCDR2和包含SEQ ID NO:60的LCDR3；(vi)包含SEQ ID NO:1的HCDR1、包含SEQ ID NO:2的HCDR2、包含SEQ ID NO:3的HCDR3、包含SEQ ID NO:46的LCDR1、包含SEQ ID NO:47的LCDR2和包含SEQ ID NO:48的LCDR3；(vii)包含SEQ ID NO:19的HCDR1、包含SEQ ID NO:20的HCDR2、包含SEQ ID NO:21的HCDR3、包含SEQ ID NO:64的LCDR1、包含SEQ ID NO:65的LCDR2和包含SEQ ID NO:66的LCDR3；(viii)包含SEQ ID NO:22的HCDR1、包含SEQ ID NO:23的HCDR2、包含SEQ ID NO:24的
HCDR3、包含SEQ ID NO:67的LCDR1、包含SEQ ID NO:68的LCDR2和包含SEQ ID NO:69的LCDR3；(ix)包含SEQ ID NO:25的HCDR1、包含SEQ ID NO:26的HCDR2、包含SEQ ID NO:27的HCDR3、包含SEQ ID NO:70的LCDR1、包含SEQ ID NO:71的LCDR2和包含SEQ ID NO:72的LCDR3；(x)包含SEQ ID NO:28的HCDR1、包含SEQ ID NO:29的HCDR2、包含SEQ ID NO:30的HCDR3、包含SEQ ID NO:73的LCDR1、包含SEQ ID NO:74的LCDR2和包含SEQ ID NO:75的LCDR3；(xi)包含SEQ ID NO:31的HCDR1、包含SEQ ID NO:32的HCDR2、包含SEQ ID NO:33的HCDR3、包含SEQ ID NO:76的LCDR1、包含SEQ ID NO:77的LCDR2和包含SEQ ID NO:78的LCDR3；(xii)包含SEQ ID NO:34的HCDR1、包含SEQ ID NO:35的HCDR2、包含SEQ ID NO:36的HCDR3、包含SEQ ID NO:79的LCDR1、包含SEQ ID NO:80的LCDR2和包含SEQ ID NO:81的LCDR3；(xiii)包含SEQ ID NO:37的HCDR1、包含SEQ ID NO:38的HCDR2、包含SEQ ID NO:39的HCDR3、包含SEQ ID NO:82的LCDR1、包含SEQ ID NO:83的LCDR2和包含SEQ ID NO:84的LCDR3；(xiv)包含SEQ ID NO:40的HCDR1、包含SEQ ID NO:41的HCDR2、包含SEQ ID NO:42的HCDR3、包含SEQ ID NO:85的LCDR1、包含SEQ ID NO:86的LCDR2和包含SEQ ID NO:87的LCDR3；(xv)包含SEQ ID NO:43的HCDR1、包含SEQ ID NO:44的HCDR2、包含SEQ ID NO:45的HCDR3、包含SEQ ID NO:88的LCDR1、包含SEQ ID NO:89的LCDR2和包含SEQ ID NO:90的LCDR3；(xvi)包含SEQ ID NO:271的HCDR1、包含SEQ ID NO:272的HCDR2、包含SEQ ID NO:273的HCDR3、包含SEQ ID NO:283的LCDR1、包含SEQ ID NO:284的LCDR2和包含SEQ ID NO:285的LCDR3；(xvii)包含SEQ ID NO:274的HCDR1、包含SEQ ID NO:275的HCDR2、包含SEQ ID NO:276的HCDR3、包含SEQ ID NO:286的LCDR1、包含SEQ ID NO:287的LCDR2和包含SEQ ID NO:288的LCDR3；(xviii)包含SEQ ID NO:277的HCDR1、包含SEQ ID NO:278的HCDR2、包含SEQ ID NO:279的HCDR3、包含SEQ ID NO:289的LCDR1、包含SEQ ID NO:290的LCDR2和包含SEQ ID NO:291的LCDR3。11.根据权利要求10所述的促进T细胞活性的方法或根据权利要求10所述的治疗癌症的方法，其中所述抗体或抗原结合片段包含重链可变结构域，所述重链可变结构域具有选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID No:211、213、215、217、219、221、223、225、227、229、231、233、235、237、239、327、329和331，以及与所述氨基酸序列表现出至少90％、95％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列；并且任选地包含轻链可变结构域，所述轻链可变结构域具有选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID No:212、214、216、218、220、222、224、226、228、230、232、234、236、238、240、328、330和332的氨基酸序列，以及与所述氨基酸
序列表现出至少90％、95％、97％、98％或99％序列同一性的氨基酸序列。12.根据权利要求10和11中任一项所述的促进T细胞活性的方法或根据权利要求10和11中任一项所述的治疗癌症的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段包含重链可变结构域和轻链可变结构域的组合，其中所述组合选自由以下组成的组：(i)包含SEQ ID NO:211的氨基酸序列或与所述氨基酸序列的同一性为至少90％的氨基酸序列的重链可变结构域以及包含SEQ ID NO:212的氨基酸序列或与所述氨基酸序列的同一性为至少90％的氨基酸序列的轻链可变结构域；(ii)包含SEQ ID NO:213的氨基酸序列或与所述氨基酸序列的同一性为至少90％的氨基酸序列的重链可变结构域以及包含SEQ ID NO:214的氨基酸序列或与所述氨基酸序列的同一性为至少90％的氨基酸序列的轻链可变结构域；(iii)包含SEQ ID NO:215的氨基酸序列或与所述氨基酸序列的同一性为至少90％的氨基酸序列的重链可变结构域以及包含SEQ ID NO:216的氨基酸序列或与所述氨基酸序列的同一性为至少90％的氨基酸序列的轻链可变结构域；(iv)包含SEQ ID NO:217的氨基酸序列或与所述氨基酸序列的同一性为至少90％的氨基酸序列的重链可变结构域以及包含SEQ ID NO:218的氨基酸序列或与所述氨基酸序列的同一性为至少90％的氨基酸序列的轻链可变结构域；(v)包含SEQ ID NO:219的氨基酸序列或与所述氨基酸序列的同一性为至少90％的氨基酸序列的重链可变结构域以及包含SEQ ID NO:220的氨基酸序列或与所述氨基酸序列的同一性为至少90％的氨基酸序列的轻链可变结构域；(vi)包含SEQ ID NO:221的氨基酸序列或与所述氨基酸序列的同一性为至少90％的氨基酸序列的重链可变结...

【专利技术属性】
技术研发人员：C，
申请(专利权)人：ITEOS比利时公司，
类型：发明
国别省市：