Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶突变体及其在制备L-草铵膦中的应用制造技术

本申请涉及Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶突变体及其在制备L

【技术实现步骤摘要】
Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶突变体及其在制备L
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草铵膦中的应用


[0001]本申请涉及生物
；特别地，本申请涉及Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶突变体，所述Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶突变体在制备L
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草铵膦中的用途，以及一种利用所述Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶突变体制备L
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草铵膦的方法。

技术介绍

[0002]草铵膦(又名双丙氨膦、草丁膦，商品名包括保试达、百速顿等，英文名为phosphinothricin(简称PPT)，化学名为2
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氨基
‑4‑
[羟基(甲基)膦酰基]丁酸)是德国赫斯特公司(现属于拜耳公司)在20世纪80年代开发的一种低毒、高效、非选择性触杀型有机磷除草剂。草铵膦作用于植株后可以抑制谷氨酰胺合成酶，从而中断植物体内谷氨酸的可逆反应，造成代谢紊乱，使植物堆积过量的氨而中毒，同时导致植物无法合成叶绿素从而光合作用受到抑制，导致植物死亡。草铵膦主要用于果园、马铃薯田、非耕地等，用于防治一年生和多年生的禾本本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶突变体，其中，当与包含SEQ ID NO.5所示序列的Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶的氨基酸序列比对时，所述Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶突变体的氨基酸序列包含对应于第91位和/或第168位的氨基酸残基的替换，所述第91位和第168位是参照SEQ ID NO.5限定的，并且所述Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶突变体的氨基酸序列与SEQ ID NO.5所示序列具有至少90％的同一性。2.根据权利要求1所述的Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶突变体，其中第91位的氨基酸残基的替换为V91I，第168位的氨基酸残基的替换为N168G。3.根据权利要求1或2所述的Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶突变体，其来源于Delftia acidovorans。4.根据权利要求1至3中任一项所述的Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶突变体，其氨基酸序列与SEQ ID NO.5所示序列具有至少99％的同一性。5.核酸，其包含编码权利要求1至4中任一项所述的Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶突变体的序列。6.表达载体，其包含权利要求5所述的核酸。7.重组宿主细胞，其包含权利要求5所述的核酸或者权利要求6所述的表达载体。8.根据权利要求7所述的重组宿主细胞，其中所述宿主细胞属于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolitica)、克鲁斯假丝酵母(Candida krusei)、东方伊萨酵母(Issatchenkia orientalis)、放线菌(Actinomycetes)、链霉菌(Streptomyces)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)或大肠杆菌(Escherichia coli)中的一种。9.权利要求1至4中任一项所述的Glu/Leu/Phe/Val脱氢酶突变体、权利要求5所述的核酸、权利要求6所述的表达载体、或权利要求7
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8任一项所述的重组宿主细胞在制备L
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草铵膦中的用途。10.一种制备L
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草铵膦的方法，其包括在酶催化体系的存在下使2
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羰基
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[羟基(甲基)膦酰基]丁酸发生转化反应生成L
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草铵膦，其中所述酶催化体系包括用于将2
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羰基
‑4‑
[羟基(甲基)膦酰基]丁酸转化为L
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草铵膦的权利要求1至4中任一项所述的Glu/Leu/Phe/V...

【专利技术属性】
技术研发人员：王华磊，魏东芝，吴承骏，刘清海，张舰，罗中华，张长雷，
申请(专利权)人：华东理工大学宁夏永农生物科学有限公司，
类型：发明
国别省市：