快速定量检测三七皂苷的方法技术

本发明专利技术公开了一种三七中的皂苷的快速定量检测方法，包括：用甲醇提取三七样品，获得所述三七样品的甲醇提取液；以及采用超高效液相色谱

【技术实现步骤摘要】
快速定量检测三七皂苷的方法


[0001]本专利技术涉及化学分析测试领域，具体而言，涉及快速定量检测三七皂苷的方法。

技术介绍

[0002]三七[Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen]为五加科人参属植物，味甘、微苦、性温，是我国特有的名贵中药材，具有散瘀止血，消肿定痛、止血、降脂和保护肝脏等功效(国家药典委员会,2015)。在中医药行业中，三七已成为仅次于人参的中药材大品种，是云南白药、复方丹参滴丸、血塞通等中成药品种的主要原材料(李品汉,2016；李倩,2018；赵娜娜et al.,2018)。据统计，全国以三七为原料的中成药品种有540多种，药品批号3600多个，涉及制药企业1350多家(刘立红et al.,2017)。三七总皂苷(PNSS)在中医药中起着重要的作用，是三七主要的功效成分。越来越多的体内和体外研究表明，PNSS广泛用于治疗各种疾病，如动脉粥样硬化、急性肺损伤、癌症和心血管疾病(Xu et al.,2014；Chen et al.,2016；Fan et al.,2016；Liao et al.,2016；Yang et al.,2016；Huang et al.,2017；Jin et al.,2017；Kitamura et al.,2017；Ratno Budiarto and Chan,2017；Tian X.
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P.et al.,2017)。然而三七品质定量检测技术比较滞后，主流上仍以《药典》2015版中通过薄层色谱法定性检测三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1和Re，液相色谱法定量检测三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和Rb1，且三者的总量不得少于5％。该方法的样品前处理方法操作繁琐、且耗时，大约需要14小时，液相检测时间也需要1个小时，大大制约了三七品质的检测效率。专利文献CN 109061001A公开了一种采用液相色谱
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质谱法检测血浆中人参皂苷的方法，不适用于三七品质检测。现有技术通过UPLC
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MS/MS法检测三七中的多种皂苷，但仪器操作要求高，且仪器本身成本非常高，不适用于基层市场推广的检测。

技术实现思路

[0003]本专利技术旨在建立一种三七种皂苷的快速定量检测方法，适用于三七多样化产品的检测，不仅包括以三七根为主的三七粉，三七饮片等，还有三七花，三七叶为原料的产品的品质检测。
[0004]本专利技术提供的一种三七中的皂苷的快速定量检测方法，包括：
[0005]用甲醇提取三七样品，获得所述三七样品的甲醇提取液；以及
[0006]采用超高效液相色谱
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二极管阵列检测器系统分析所述三七样品的甲醇提取液；
[0007]所述超高效液相色谱的条件如下：所述超高效液相色谱采用ACQUITY UPLC@BEH
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C18色谱柱(1.7um
×
2.1
×
50mm)；所述超高效液相色谱的条件如下：流动相A：甲醇，流动相B：水；梯度洗脱：0
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5min，20％A；5
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10min,20％A
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45％A；所述二极管矩阵检测器的采集波长为203nm。
[0008]其中，所述流动相的流速为0.25mL/min。
[0009]其中，所述色谱柱的柱温为30℃。
[0010]其中，所述二极管矩阵检测器的光电分离度为1.2nm，采样速率为10pt/s。
[0011]其中，所述三七中的皂苷为三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rc、人参皂苷Rb3、人参皂苷Rd、人参皂苷Rg2中一种或几种。
[0012]其中，用甲醇提取三七样品时进行超声处理。
[0013]其中，所述超高效液相色谱中使用酸枣皂苷B作为内标。
[0014]其中，所述超高效液相色谱中使用三七皂苷R1标准曲线、人参皂苷Rg1标准曲线、人参皂苷Rb1标准曲线、人参皂苷Re标准曲线、人参皂苷Rc标准曲线、人参皂苷Rb3标准曲线、人参皂苷Rd标准曲线和人参皂苷Rg2标准曲线。
[0015]本专利技术的三七中皂苷的快速定量检测方法除了能检测《药典》2015版要求的4种皂苷三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1和Re的基础上，还可检测三七地上部分的特征人参皂苷Rc和Rb3以及三七皂苷Rd和稀有皂苷Rg2，因此能够检测共计8种三七皂苷。本专利技术的三七中皂苷的快速定量检测方法能够同时检测三七样本中的8种三七皂苷，检测结果精确可靠。
[0016]本专利技术的三七中皂苷的快速定量检测方法，利用超高效液相色谱
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光电二极管矩阵检测器(UPLC
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PDA)系统，并结合超声快速提取皂苷技术，大大节省了检测时间，样品前处理时间加检测时间，共计20min，远远小于《药典》2015版中的15h，且整体操作简单，适用于推广检测。
附图说明
[0017]图1示出了使用BEH HILIC 1.7uM 2.1X100mm色谱柱的色谱图；
[0018]图2示出了使用ACQUITY UPLCRHSS T31.8uM2.1X100mm色谱柱的色谱图；
[0019]图3示出了使用ACQUITY UPLC@BEH
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C18色谱柱(1.7um
×
2.1
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50mm)色谱柱的色谱图；
[0020]图4示出了采用梯度洗脱1)的色谱图；
[0021]图5示出了采用梯度洗脱2)的色谱图；
[0022]图6示出了采用梯度洗脱3)的色谱图；
[0023]图7示出了采用193nm检测波长的色谱图；
[0024]图8示出了采用203nm检测波长的色谱图；
[0025]图9示出了采用213nm检测波长的色谱图；
[0026]图10示出了采用223nm检测波长的色谱图；
[0027]图11示出了针对混合标品溶液1通过UPLC
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PDA测定的9种皂苷的色谱图；
[0028]图12示出了针对混合标品溶液2通过UPLC
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PDA测定的9种皂苷的色谱图；
[0029]图13示出了三七皂苷R1的标准曲线；
[0030]图14示出了人参皂苷Rg1的标准曲线；
[0031]图15示出了人参皂苷Re的标准曲线；
[0032]图16示出了人参皂苷Rb1的标准曲线；
[0033]图17示出了人参皂苷Rc的标准曲线；
[0034]图18示出了人参皂苷Rg2的标准曲线；
[0035]图19示出了人参皂苷Rb3的标准曲线；
[0036]图20示出了人参皂苷Rd的标准曲线；
[0037]图21示出了酸枣皂苷B的标准曲线；
[0038]图22示出了三七根样品的色谱图；和
[0039]图23示出了三七叶样品的色谱图。
具体实施方式
[本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种三七中的皂苷的快速定量检测方法，包括：用甲醇提取三七样品，获得所述三七样品的甲醇提取液；以及采用超高效液相色谱
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二极管阵列检测器系统分析所述三七样品的甲醇提取液；其中，所述超高效液相色谱采用ACQUITY UPLC@BEH
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C181.7um
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2.1
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50mm色谱柱；所述超高效液相色谱的条件如下：流动相A：甲醇，流动相B：水；梯度洗脱：0
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5min，20％A；5
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10min,20％A
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45％A；所述二极管矩阵检测器的采集波长为203nm。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相的流速为0.25mL/min。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱的柱...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑文杰，朱书生，赵孔祥，何霞红，李娟，季超，施蕊，张芹，伍志强，汪星宇，叶辰，刘红斌，
申请(专利权)人：天津师范大学，
类型：发明
国别省市：