一种疏水-静电多功能化的纳米复合胶束的制备及在蛋白质酶保护中的应用制造技术

一种疏水

【技术实现步骤摘要】
一种疏水
‑
静电多功能化的纳米复合胶束的制备及在蛋白质酶保护中的应用


[0001]本专利技术属于纳米生物医药材料
涉及一种纳米粒子表面同时含有疏水以及静电作用力并且两种作用力方便可调的多功能化复合胶束的制备方法，用于提高蛋白质的酶保护效果。

技术介绍

[0002]蛋白质药物因其特异性强，疗效好等一些优点在生命医学领域发展迅速，已经成为现代生命医药的重要组成部分。但在生命体外，蛋白质在外界严苛环境下(如高温)容易变性，三维结构被破坏，形成不可逆的聚集体，从而失活，丧失其原有的生物活性，对于一些蛋白质药物而言，不仅无效可能还会造成一定的免疫原性等问题。因此开发出有效的策略来提高蛋白质的稳定性十分重要。
[0003]目前已经有很多方法来保护蛋白，防止其热失活，比如一些小分子添加剂，化学修饰，蛋白质固定化，蛋白质包封和一些功能化的纳米粒子通过表面与蛋白相互作用保护蛋白等，在这些方法中，具有温敏性表面的纳米粒子更具有前景，操作简单，不需要外加别的竞争者，通过温度的变化可实现蛋白质的捕获与释放。但传统的这些温敏性粒子表面性本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种疏水
‑
静电多功能化的纳米复合胶束，其特征在于，所述多功能化纳米复合胶束是由三种不同的两嵌段共聚物含有亲水单元的PCL
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b
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PEG、温敏性单元的PCL
‑
b
‑
PNIPAM和弱聚电解质单元的PCL
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b
‑
PLys或PCL
‑
b
‑
PGlu在水溶液中自组装而成；通过调节复合胶束表面三种单元的比例来得到不同表面性质的多功能化复合胶束；纳米复合胶束表面的温敏性单元聚异丙基丙烯酰胺(PNIPAM)，在温度高于其低临界相转变温度
‑
LCST时，PNIPAM塌缩形成疏水微区，用于结合蛋白，阻止蛋白之间的聚集；温度降低至LCST以下时，PNIPAM变为亲水伸展状态，释放蛋白，恢复结构；疏水微区的大小通过调节组成单元的含量来精确调控；纳米复合胶束表面的弱聚电解质单元能够通过静电作用吸引带有相反电荷的蛋白质，排斥带有相同电荷的蛋白，静电作用的强弱通过调节组成单元的含量来调控；纳米复合胶束表面的亲水单元PEG不仅可以用来稳定疏水坍缩后的胶束，也用来稳定与蛋白结合后形成的粒子
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蛋白复合物，另一方面用来分隔疏水部分形成微区。2.如权利要求1所述的疏水
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静电多功能化的纳米复合胶束，其特征在于，弱聚电解质单元包括带正电的聚赖氨酸，带负电的聚谷氨酸。3.一种权利要求1所述疏水
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静电多功能化的纳米复合胶束的制备方法，其特征在于步骤如下：第1、PCL
‑
b
‑
PEG的合成聚乙二醇(mPEG
‑
OH)与ε
‑
己内酯(ε
‑
caprolactone，以下简称ε
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CL)以1:100的物质的量之比溶解在重蒸甲苯中，加入一滴催化剂辛酸亚锡(Sn(Oct)2)，经液氮冷冻
‑
抽真空
‑
解冻过程；在107
‑
113℃条件下反应12
‑
14h，通过冰乙醚沉淀和真空干燥得到PCL
‑
b
‑
PEG白色粉末；第2、PCL
‑
b
‑
PNIPAM的合成第2.1、N
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(叔丁氧羰基)乙醇胺与ε
‑
CL以1:100的物质的量之比溶解在重蒸甲苯中，加入一滴催化剂辛酸亚锡(Sn(Oct)2)，经液氮冷冻
‑
抽真空
‑
解冻过程；在107
‑
113℃条件下反应12
‑
14h，得到Boc
‑
PCL
‑
OH；第2.2、之后将DDMAT(S
‑1‑
十二烷基
‑
S
’‑
(α,α
’‑
二甲基
‑
α
”‑
乙酸)三硫代碳酸酯)与(COCl)2(草酰氯)以3:20的物质的量之比溶解在超干二氯甲烷中，反应2
‑
3h后旋蒸除去多余的草酰氯，再加入1当量第2.1步得到的Boc
‑
PCL
‑
OH，氮气保护下室温反应22
‑
24h得到大分子链转移剂PCL
‑
CTA；第2.3、将PCL
‑
CTA与NIPAM以1:100的物质的量之比溶解在超干1，4
‑
二氧六环中，经液氮冷冻
‑
抽真空
‑
解冻过程，在68
‑
72℃条件下反应22
‑
24h，通过冰乙醚沉淀和真空干燥得到PCL
‑
b
‑
PNIPAM；第3、PCL
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b
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PLys或者PCL
‑
b
‑
PGlu的合成第3.1...

【专利技术属性】
技术研发人员：史林启，邓飞，马飞贺，马如江，安英丽，
申请(专利权)人：南开大学，
类型：发明
国别省市：