一种高纯度鼠尾草酸的提取纯化方法技术

本发明专利技术公开了中药材迷迭香中抗氧化的有效成分鼠尾草酸的一种高效提取及纯化方法。即先使用醇提获得鼠尾草酸粗提物，再采用pH控制沉淀法与聚酰胺柱层析法结合进行分离，最后得到高纯度鼠尾草酸。采用本发明专利技术提取方法所得产物性能稳定，且该工艺适宜产业化，同时降低了生产成本，减少了工业化生产的能耗，具有巨大的前景和可观的经济效益。的前景和可观的经济效益。

【技术实现步骤摘要】
一种高纯度鼠尾草酸的提取纯化方法


[0001]本专利技术涉及一种植物药有效成分的提取方法，特别涉及迷迭香中抗氧化的有效成分鼠尾草酸的提取及纯化方法。

技术介绍

[0002]迷迭香(Rosmarinus officinalis L.)别名艾菊，系唇形科迷迭香属常绿小灌木，是目前公认的具有抗氧化作用的一种植物。性温、味辛、具有芳香健脾、镇静安神的功效，国内外对于其化学成分的研究已经有大量的报道，包括萜类、黄酮、有机酸、多支链烷烃以及氨基酸等多种化学成分。研究表明，迷迭香提取物有抗氧化、抗炎、保肝降酶、治疗心血管疾病等多种药理活性。其中，二萜酚类以及酚类化合物是迷迭香中发挥抗氧化能力的主要成分，包括了鼠尾草酸。
[0003]鼠尾草酸，化学式为C
20
H
28
O4，结构中同时存在邻二酚羟基和羧基，使其表现出广泛的药理作用，近年来的研究显示，鼠尾草酸除了表现出抗氧化作用，还能够发挥抗癌、神经保护、抗炎、抑菌作用，并且能够预防和治疗代谢紊乱、柯萨奇B3病毒感染、神经损伤引起的抑郁症等疾病。除此之外，鼠尾草酸已应用于食品添加剂、化妆品和食用油等行业。
[0004]目前有关鼠尾草酸的提取方法，主要包括传统有机溶剂提取法、超临界二氧化碳萃取法、匀浆提取法、超声波辅助提取法、回流法、毛细管电泳分离法等，但由于鼠尾草酸结构的不稳定性，容易降解，增加了提取分离纯化过程中的难度，导致通过上述提取方法能大规模的得到的粗提物含量约为10％-30％，市场上并无工业生产级别制备得到的高纯鼠尾草酸，此外，高能耗、高生产成本以及安全性等问题也已成为提取工艺应用于工业生产的限制因素。
[0005]中国专利申请CN101113133A公开了一种碱提酸沉的鼠尾草酸提取方法，虽能够较好的去除鼠尾草酸粗提物中的水溶性杂质，而对于与鼠尾草酸极性相似的一些脂溶性成分分离效果较差，例如鼠尾草酚以及一些脂溶性色素；虽已得到能够使鼠尾草酸完全转移的容积比，但在去除小极性杂质过程中易包裹鼠尾草酸，导致转移率降低。中国专利申请CN104058955A采用常压硅胶柱层析法，其活性炭对鼠尾草酸的死吸附严重；因此，本专利技术人将pH控制沉淀法以及柱层析法进行结合，筛选发现通过碱提酸沉对鼠尾草酸粗提物进行预处理，而后结合聚酰胺柱层析，不仅能够通过酸碱反应，除去鼠尾草酸粗提物中的非酚酸性类成分，也能对水溶性杂质有较好的分离效果，而后结合聚酰胺对酚酸性成分分离的针对性，能够一些脂溶性成分去除，继而得到含量以及转移率较高的鼠尾草酸样品。

技术实现思路

[0006]为了解决上述现有技术存在的不足，本专利技术人的目的旨在提供一种高纯度鼠尾草酸的提取方法，即根据鼠尾草酸结构中存在的邻二酚羟基以及羧基的性质，以及鼠尾草酸自身具有的脂溶性的特点，采用pH控制沉淀法与柱层析法相结合对鼠尾草酸进行提取与纯化。
[0007]本专利技术的目的是通过下述技术方案实现：一种高纯度鼠尾草酸的提取方法，包括以下步骤：
[0008](1)称取迷迭香干叶，粉碎，过筛，加入5～12倍量的浓度为60～80％醇溶液，50～80℃水浴中加热回流，过滤，滤液浓缩至无醇味，加水搅拌均匀，沉淀完全后滤除，浓缩干燥后得到鼠尾草酸粗提物备用；
[0009](2)称取步骤(1)所得鼠尾草酸粗提物，加入5～40倍粗提物量的碱溶液，于30～60℃水浴中，反应20～60min，最终使溶液pH控制在7.0～9.5，过滤，滤液用加入适量酸，使pH在2.0～3.0，过滤，沉淀，将沉淀烘干得到鼠尾草酸预处理样品备用；
[0010](3)称取经步骤(2)预处理得到的鼠尾草酸样品，加入1～6倍醇液溶解样品之后，加入1～5倍聚酰胺拌样；按照拌样量与柱床体积比例为1～5∶1，加入聚酰胺，干法上样，水洗脱两个柱体积，碱液洗脱4个柱体积，控制流速10mL/min，每个流分50mL，将流分用酸调pH，使其范围在2.0～3.0，过滤，收集沉淀，烘干，重结晶，得本专利技术样品，含量为95％的高纯品。
[0011]为了更好地实现本专利技术目的，步骤(1)所述醇为乙醇。
[0012]步骤(2)所述碱为碳酸钠。
[0013]步骤(2)和步骤(3)所述酸为磷酸。
[0014]步骤(3)所述聚酰胺的颗粒度为30～60目。
[0015]步骤(3)所述烘干为30～50℃真空烘干。
[0016]步骤(3)所述重结晶的溶剂为二氯甲烷或乙酸。
[0017]较优选的，本专利技术所述方法包括以下步骤：
[0018](1)称取适量迷迭香干叶，粉碎，过20～40目筛，加入7～10倍量的浓度为70％乙醇溶液，65℃水浴中加热回流，过滤，滤液浓缩至无醇味，加水搅拌均匀，沉淀完全后滤除，浓缩干燥后得到鼠尾草酸粗提物备用；
[0019](2)称取步骤(1)所得鼠尾草酸粗提物，加入15～20倍粗提物量的碳酸钠溶液，于40～60℃水浴中，反应30～45min，最终使溶液pH控制在8.0～9.0，过滤，滤液用加入适量磷酸，使pH在2.5～3.0，过滤，沉淀，将沉淀烘干得到鼠尾草酸预处理样品备用；
[0020](3)称取经步骤(2)预处理得到的鼠尾草酸样品，加入2～5倍乙醇液溶解样品之后，加入1～5倍聚酰胺拌样；按照拌样量与柱床体积比例为1～5∶1，加入聚酰胺，干法上样，水洗脱两个柱体积，10％碳酸钠液洗脱4个柱体积，控制流速10mL/min，每个流分50mL，将流分用10％磷酸调pH，使其范围在2.0～3.0，过滤，收集沉淀，烘干，重结晶，得本专利技术样品，含量为95％的高纯品。
[0021]为了达到本专利技术最佳效果，本专利技术所述方法包括以下步骤：
[0022]称取适量迷迭香干叶，粉碎，过20目筛，按照物料比1∶10，加入10倍量80％乙醇溶液，于60℃水浴中进行加热回流，过滤后滤液浓缩至无醇味，加适量水搅拌均匀，沉淀完全后滤除，浓缩干燥后得到鼠尾草酸粗提物；再称取所得鼠尾草酸粗提物10.00g，按照物料比1∶20，加入100mL1.50％Na2CO3水溶液，于40℃水浴中，反应40min，碱pH终点在8.50～9.00，得到的清液，用10％H3PO4调酸后控制pH2.50～3.00，过滤得到沉淀，置于真空干燥箱，35℃烘干，即得本专利技术预处理鼠尾草酸样品；再称量上述预处理样品5.00g，按物料比1∶5，加入20mL 80％乙醇溶解样品之后，15g 30～60目聚酰胺拌样，按照拌样量与柱床体积3∶1，加入
5g 30～60目聚酰胺，干法上样，径高比1∶8，水洗脱两个柱体积，1
‰
Na2CO3水溶液洗脱4个柱体积，控制流速10mL/min，每个流分50mL，将流分用10％H3PO4调酸后控制pH2.50～3.00，过滤后收集沉淀，置于真空干燥箱，35℃烘干，经过乙酸进行重结晶，得本专利技术样品，经测，含量为95％。
[0023]本专利技术与现有技术相比，有以下的有益效果：
[0024]将pH控制沉淀法与柱层析法相结合，通过碱提酸沉对鼠尾草酸粗提物进行本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高纯度鼠尾草酸的提取纯化方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)称取迷迭香干叶，粉碎，过筛，加入5～12倍量的浓度为60～80％醇溶液，50～80℃水浴中加热回流，过滤，滤液浓缩至无醇味，加水搅拌均匀，沉淀完全后滤除，浓缩干燥后得到鼠尾草酸粗提物备用；(2)称取步骤(1)所得鼠尾草酸粗提物，加入5～40倍粗提物量的碱溶液，于30～60℃水浴中，反应20～60min，最终使溶液pH控制在7.0～9.5，过滤，滤液用加入适量酸，使pH在2.0～3.0，过滤，沉淀，将沉淀烘干得到鼠尾草酸预处理样品备用；(3)称取经步骤(2)预处理得到的鼠尾草酸样品，加入1～6倍醇液溶解样品之后，加入1～5倍聚酰胺拌样；按照拌样量与柱床体积比例为1～5∶1，加入聚酰胺，干法上样，水洗脱两个柱体积，碱液洗脱4个柱体积，控制流速10mL/min，每个流分50mL，将流分用酸调pH，使其范围在2.0～3.0，过滤，收集沉淀，烘干，重结晶，得本发明样品，含量为95％的高纯品。2.根据权利要求1所述的一种高纯度鼠尾草酸的提取纯化方法，其特征在于，步骤(1)所述醇为乙醇。3.根据权利要求1所述的一种高纯度鼠尾草酸的提取纯化方法，其特征在于，步骤(2)所述碱为碳酸钠。4.根据权利要求1所述的一种高纯度鼠尾草酸的提取纯化方法，其特征在于，步骤(2)和(3)所述酸为磷酸。5.根据权利要求1所述的一种高纯度鼠尾草酸的提取纯化方法，其特征在于，步骤(3)所述聚酰胺的颗粒度为30～60目。6.根据权利要求1所述的一种高纯度鼠尾草酸的提取纯化方法，其特征在于，步骤(2)和(3)所述烘干为30～50℃真空烘干。7.根据权利要求1所述的一种高纯度鼠尾草酸的提取纯化方法，其特征在于，步骤(3)所述重结晶的溶剂为二氯甲烷或乙酸。8.根据权利要求1～4任一项所述的一种高纯度鼠尾草酸的提取纯化方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)称取适量迷迭香干叶，粉碎，过20～40目筛，加入7～10倍量的浓度为70％乙醇溶液，65℃水浴中加热回流，过滤，滤液浓缩至无醇味，加水搅拌均匀，沉淀完全后滤除...

【专利技术属性】
技术研发人员：周应军，冀思华，曾光尧，
申请(专利权)人：中南大学，
类型：发明
国别省市：