检测抗ALS抑制剂类除草剂雀麦的特异性引物对、试剂盒及检测方法和应用技术

本发明专利技术提供了检测抗ALS抑制剂类除草剂雀麦的特异性引物对、试剂盒及检测方法和应用，涉及分子生物学技术领域。本发明专利技术所述特异性条带特异性好，PCR目的条带清晰。利用本发明专利技术所述特异性引物对或包含所述特异性引物对的试剂盒，可准确专一的鉴定出抗ALS抑制剂类除草剂雀麦，检测方法操作简便，速度快、成本低、准确度高。本发明专利技术还提供了基于所述特异性引物对和试剂盒的检测方法，可以高效、准确的检测田间疑似抗性的雀麦ALS突变位点和氨基酸突变类型，可以指导是否可以继续使用ALS抑制剂类除草剂来防除抗性雀麦。草剂来防除抗性雀麦。草剂来防除抗性雀麦。

【技术实现步骤摘要】
检测抗ALS抑制剂类除草剂雀麦的特异性引物对、试剂盒及检测方法和应用


[0001]本专利技术属于分子生物学
，具体涉及检测抗ALS抑制剂类除草剂雀麦的特异性引物对、试剂盒及检测方法和应用。

技术介绍

[0002]小麦是我国主要粮食作物之一，其产量高低与国计民生休戚相关。杂草危害是导致小麦减产的主要因素之一。随着全球环境变化、农业种植制度的改变、机械化农事操作的应用和不同地区小麦引种等原因导致小麦田杂草种群发生了变化。目前雀麦已演替为小麦田恶性杂草之一。雀麦发生地块平均造成小麦减产15～30％，发生严重地块小麦产量损失达70％左右。目前生产上主要采用氟唑磺隆对其进行防治。
[0003]氟唑磺隆属于乙酰乳酸合成酶(ALS)抑制剂类除草剂，用作茎叶处理剂，通过抑制杂草体内ALS活性，造成杂草体内亮氨酸(Leu)、异亮氨酸(Iie)、缬氨酸(Val)合成受阻，导致杂草因营养物质匮乏而死。因常年连续使用雀麦对氟唑磺隆产生了抗药性，导致氟唑磺隆对雀麦的防治效果明显降低，因此造成了加大用药剂量的不良处理方案，其后果导致杂草防治成本增加和小麦药害本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测抗ALS抑制剂类除草剂雀麦的特异性引物对，其特征在于，所述特异性引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。2.一种检测抗ALS抑制剂类除草剂雀麦的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述特异性引物对。3.根据权利要求2所述试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括PCR扩增试剂。4.权利要求1所述特异性引物对或权利要求2或3所述试剂盒在检测抗ALS抑制剂类除草剂雀麦中的应用。5.一种检测抗ALS抑制剂类除草剂雀麦的方法，其特征在于，包括以下步骤：以雀麦基因组DNA为模板，利用权利要求1所述特异性引物对或权利要求2或3所述试剂盒中的特异性引物对进行PCR扩增，对扩增产物的氨基酸序列与ALS蛋白进行比对，如在所述ALS蛋白的保守位点发生点突变，则为抗ALS抑制剂类除草剂雀麦；所述保守位点包括第122位、197位、205位、376位、574位、653位和654位中的一个或多个位点。6.根据权利要求5所述方法，其特征在于，所述PCR扩增的体系以25μL计，包括：S...

【专利技术属性】
技术研发人员：许贤，王贵启，刘小民，李秉华，赵铂锤，申贝贝，王建平，崔海燕，祁志尊，
申请(专利权)人：河北省农林科学院粮油作物研究所，
类型：发明
国别省市：