昆明小鼠非酒精性脂肪肝病模型饲料及其制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及动物模型饲料技术领域，具体涉及昆明小鼠非酒精性脂肪肝病模型饲料及其制备方法与应用。通过精确称取基础饲料和占模型饲料质量百分比为1.5％的胆固醇，进行充分混合，加入热量比为60％的油脂物质进行搅拌，再置于冷却桶内进行降温处理，加入水分搅拌混合均匀，通过制粒机进行制粒，再进行低温干燥脱水获得本发明专利技术提供的昆明小鼠非酒精性脂肪肝病模型饲料。本发明专利技术能够在短时间内便能快速构建与人类非酒精性脂肪肝病发病机制相似的昆明小鼠模型，可极大地缩短实验周期，提高实验效率，重复性高，昆明小鼠死亡率低，造模成功率高，降低实验的人工成本和时间成本，为非酒精性脂肪肝病的发病机制和药物筛选研究提供了便利。便利。便利。

【技术实现步骤摘要】
昆明小鼠非酒精性脂肪肝病模型饲料及其制备方法与应用


[0001]本专利技术涉及动物模型饲料
，具体涉及昆明小鼠非酒精性脂肪肝病模型饲料及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]非酒精性脂肪肝病是指除酒精和其他明确的肝损伤因素外所致，以肝脏实质细胞脂肪变性及脂肪蓄积为主要特征的临床病理综合征，通常还会伴有肥胖、胰岛素抵抗、高血压和血脂异常。非酒精性脂肪肝病在世界上很多国家都有着较高的发病率，其发病机制尚未完全阐明，主要包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎、肝硬化和肝细胞癌四个不同的病理阶段。多数非酒精性脂肪肝患者无明显临床症状，部分患者可有乏力、腹胀、恶心、食欲减退、右季肋不适或隐痛等不典型症状，其发病具有隐匿性和长期性的特点。处于脂肪性肝炎期的患者可出现黄疸，进展为肝硬化的患者可出现相应临床表现，甚至发展为肝癌。
[0003]动物模型是人类研究疾病的基础和重要手段，近年来，国内外对非酒精性脂肪肝动物模型的研究越来越多。昆明小鼠是我国生产量、使用量最大的远交群小鼠，具有抗病力和适应力强，繁殖力强、成活率高、价格便宜等优点，被广泛应用于药理学、毒理学等领域研究以及药品、生物制品的生产与检定。目前对于非酒精性脂肪肝小鼠模型的构建多采用灌胃手段给予高脂饲料，或者腹腔注射四氯化碳导致肝脏急性损伤并且配合高脂饲料导致肝脏病变的方法，不仅不符合动物伦理，容易导致动物死亡率上升，并且用药量大，实验周期长，成本较高。

技术实现思路

[0004]针对现有技术中存在的不足，本专利技术提供了昆明小鼠非酒精性脂肪肝病模型饲料及其制备方法与应用，本专利技术的目的在于解决现有非酒精性脂肪肝病动物模型中存在的实验周期长、成本高、灌胃用药量大、动物死亡率高等技术问题。本专利技术针对昆明小鼠开发的高脂高胆固醇饲料配方可以在短时间内成功构建非酒精性脂肪肝病模型，实验周期短，重复性高，昆明小鼠死亡率低，造模成功率高，并且可降低实验的人工成本和时间成本。
[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术的具体技术方案如下：
[0006]昆明小鼠非酒精性脂肪肝病模型饲料的制备方法，包括如下步骤：
[0007]S1，精确称取基础饲料和占模型饲料质量百分比为1.5％的胆固醇，进行充分混合，获得混合粉料；
[0008]S2，在步骤S1中的混合粉料加入60％热量比的油脂物质进行搅拌，获得油料混合物；
[0009]S3，将步骤S2中的油料混合物置于冷却桶内进行降温处理，加入水分搅拌混合均匀，通过制粒机进行制粒，获得软颗粒饲料；
[0010]S4，将步骤S3中的软颗粒饲料进行低温干燥脱水，获得昆明小鼠非酒精性脂肪肝病模型饲料。
[0011]进一步地，在步骤S1中，所述基础饲料的原料组分及其占模型饲料的质量百分比为25.45％酪蛋白、0.38％L
‑
胱氨酸、15.9％麦芽糊精、8.76％蔗糖、6.36％纤维素、5.73％复合维生素、1.27％复合矿物质和0.25％重酒石酸氢胆碱。
[0012]进一步地，在步骤S2中，所述油脂物质按占模型饲料的质量百分比计包括31.2％的猪油和3.2％的大豆油。
[0013]进一步地，在步骤S3中，所述软颗粒饲料的粒径控制在10～15mm。
[0014]进一步地，在步骤S4中，所述脱水的温度为25～30℃，脱水时间为48小时。
[0015]本专利技术还提供了通过上述方法制备的昆明小鼠非酒精性脂肪肝病模型饲料。
[0016]本专利技术还提供了昆明小鼠非酒精性脂肪肝病模型饲料的应用，用于构建昆明小鼠非酒精性脂肪肝病模型，连续给昆明小鼠饲喂上述昆明小鼠非酒精性脂肪肝病模型饲料12～16周，自由饮水，小鼠肝脏大体标本表面油腻，布满黄色斑点，黄红相间，肝缘变钝，HE染色镜下可见组织结构异常，大量肝细胞脂肪变性，点状坏死，汇管区炎症细胞浸润，存在大量橘黄色脂滴，即昆明小鼠非酒精性脂肪肝病模型构建完成。
[0017]与现有的非酒精性脂肪肝病动物模型构建方法相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0018]高脂饮食可以引起肝脏脂肪的堆积，大量胆固醇的摄入可以引起肝脏胆固醇的聚集造成病变，导致血脂四项出现异常。本专利技术针对昆明小鼠开发的高脂高胆固醇饲料配方，在保证昆明小鼠正常生长的原料基础上添加了1.5％质量比的胆固醇，脂肪热量比为60％，制备纯化饮食配方的高脂高胆固醇饲料，模型饲料的制备方法简单，所制备的模型饲料利于昆明小鼠自由进食。采用本专利技术提供的非酒精性脂肪肝病动物模型饲料饲喂昆明小鼠12～16周后，小鼠血清中HDL水平降低，TC、TG、LDL水平升高，小鼠肝脏大体标本表面油腻，布满黄色斑点，黄红相间，肝缘变钝，HE染色镜下可见组织结构异常，大量肝细胞脂肪变性，点状坏死，汇管区炎症细胞浸润，存在大量橘黄色脂滴，短期内快速构建成功与人类非酒精性脂肪肝病发病机制相似的昆明小鼠模型。结合昆明小鼠自身的生理优势，本专利技术极大地缩短了模型构建时间，昆明小鼠死亡率低，造模成功率高，可重复性高，实验的人工成本和时间成本较低，为非酒精性脂肪肝病的药物筛选、毒性评估和机制研究提供了重要工具。
附图说明
[0019]附图用来提供对本专利技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本专利技术的实施例一起用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的限制。
[0020]图1是本专利技术昆明小鼠非酒精性脂肪肝病模型饲料的制备方法的流程图；
[0021]图2是对照组和模型组的昆明小鼠饲喂16周后的血脂四项变化对比图；
[0022]图3是对照组和模型组的昆明小鼠饲喂16周后血清中ALT和AST的变化对比图；
[0023]图4是对照组和模型组的昆明小鼠饲喂16周后肝脏组织细胞的染色对比图。
具体实施方式
[0024]以下结合附图1～4对本专利技术的优选实施例作进一步详细说明，应当理解，此处所描述的实施例仅用于说明和解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0025]实施例
[0026]如图1所示，本实施例提供的昆明小鼠非酒精性脂肪肝病模型饲料的制备方法，包
括如下步骤：
[0027]S1，精确称取基础饲料(按质量百分比计由25.45％酪蛋白、0.38％L
‑
胱氨酸、15.9％麦芽糊精、8.76％蔗糖、6.36％纤维素、5.73％复合维生素、1.27％复合矿物质和0.25％重酒石酸氢胆碱组成)和质量百分比为1.5％的胆固醇，进行充分混合，获得混合粉料；
[0028]S2，在步骤S1中的混合粉料加入60％热量比的油脂物质(按质量百分比计由31.2％的猪油和3.2％的大豆油组成)进行搅拌，获得油料混合物；
[0029]S3，将步骤S2中的油料混合物置于冷却桶内进行降温处理，加入水分搅拌混合均匀，通过制粒机进行制粒，获得粒径为10～15mm的软颗粒饲料；
[0030]S4，将步骤S3中的软颗粒饲料进行低温干燥脱水，脱水的温度为25～30℃，脱水时间为48小时，获得昆明小鼠非酒精性脂肪肝病模型饲料。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.昆明小鼠非酒精性脂肪肝病模型饲料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1，精确称取基础饲料和占模型饲料质量百分比为1.5％的胆固醇，进行充分混合，获得混合粉料；S2，在步骤S1中的混合粉料加入60％热量比的油脂物质进行搅拌，获得油料混合物；S3，将步骤S2中的油料混合物置于冷却桶内进行降温处理，加入水分搅拌混合均匀，通过制粒机进行制粒，获得软颗粒饲料；S4，将步骤S3中的软颗粒饲料进行低温干燥脱水，获得昆明小鼠非酒精性脂肪肝病模型饲料。2.根据权利要求1所述的昆明小鼠非酒精性脂肪肝病模型饲料的制备方法，其特征在于，在步骤S1中，所述基础饲料的原料组分及其占模型饲料的质量百分比为25.45％酪蛋白、0.38％L
‑
胱氨酸、15.9％麦芽糊精、8.76％蔗糖、6.36％纤维素、5.73％复合维生素、1.27％复合矿物质和0.25％重酒石酸氢胆碱。3.根据权利要求1所述的斑马鱼高脂血症模型饲料的制备方法，其特征在于，在步骤S2中...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜海善，
申请(专利权)人：常州鼠一鼠二生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：