一种利用UPLC-PDA同时检测多种中药提取物中多成分的方法技术

本发明专利技术属于中药检测技术领域，尤其涉及一种利用UPLC

【技术实现步骤摘要】
一种利用UPLC
‑
PDA同时检测多种中药提取物中多成分的方法


[0001]本专利技术属于中药检测
，尤其涉及一种利用UPLC
‑
PDA同时检测多种中药提取物中多成分的方法。

技术介绍

[0002]在畜牧养殖业，随着中兽药研发和生产的日益壮大，中兽药的生产过程中，中药提取物作为一种中间产物，迫切的需要进行质量控制，来最终控制最终产品的质量。2020版药典和2020版兽药典均未有收载紫锥菊提取物、金银花提取物和蒲公英提取物的标准方法。本专利技术意在为以后制定三种提取物的国家质量标准提供研究基础。

技术实现思路

[0003]为解决上述现有技术中存在的问题，本专利技术提供了一种利用UPLC
‑
PDA同时检测多种中药提取物中多成分的方法，采用超高效液相色谱
‑
二极管阵列检测法(UPLC
‑
PDA)，使用光谱图、色谱图进行鉴别，使用色谱图峰面积进行含量定量检测。
[0004]为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0005]一种利用UPLC
‑
PDA同时检测多种中药提取物中多成分的方法，包括以下步骤：
[0006](1)制备供试品溶液：取供试品，加溶剂，超声提取、离心，过滤得到上清液即为供试品溶液，备用；
[0007](2)制备对照品储备溶液：分别取各个要检测的成分作为对照品，加溶剂制成各对照品储备溶液，备用；
[0008](3)UPLC
‑<br/>PDA检测：分别取上述步骤1得到的供试品溶液和步骤2得到的各对照品储备溶液，注入超高效液相色谱仪(UPLC)，PDA检测器进行梯度洗脱，分别得到供试品和对照品的色谱图和光谱图；
[0009](4)结果判定：通过对供试品和对照品的光谱图、色谱图进行比对分析，对各成分进行定性鉴别和定量测定。
[0010]优选的，所述步骤1中，溶剂为甲醇水溶液或乙醇水溶液，超声提取25
‑
35min，10000rpm/min离心5min。
[0011]优选的，所述步骤3中，UPLC
‑
PDA检测的进样量：0.2～2μL；梯度洗脱的流速：0.40～0.44mL/min；柱温：30
‑
40℃。
[0012]优选的，所述步骤3中，UPLC
‑
PDA检测的流动相系统：流动相A：乙腈(含0.1％磷酸)是指乙腈中含有0.1％磷酸，是体积含量；流动相B：水(含0.1％磷酸，是体积含量)。
[0013]优选的，所述步骤3中，UPLC
‑
PDA检测的波长扫描范围：190
‑
400nm，检测波长324nm、327nm、330nm。
[0014]优选的，所述步骤3中，UPLC
‑
PDA检测的梯度洗脱包括以下阶段：每个阶段之间通过曲线6梯度变化。
[0015]阶段一：0～8min，4％流动相A，96％流动相B；
[0016]阶段二：16min，10％流动相A，90％流动相B；
[0017]阶段三：18～20min，12％流动相A，88％流动相B；
[0018]阶段四：24～27min，16％流动相A，84％流动相B；
[0019]阶段五：30～32min，18％流动相A，82％流动相B；
[0020]阶段六：35～38min，55％流动相A，45％流动相B；
[0021]阶段七：39～40min，4％流动相A，96％流动相B。
[0022]优选的，所述的方法可同时检测3种中药提取物中的7种主成份。所述3种中药提取物为紫锥菊提取物、蒲公英提取物、金银花提取物。所述7种主成份为绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、4,5
‑
二
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O
‑
咖啡酰奎宁酸、菊苣酸和单咖啡酰酒石酸、咖啡酸。
[0023]优选的，所述步骤4中，使用光谱图、色谱图进行定性鉴别，使用色谱图峰面积进行含量定量检测，具体为：根据对照品和待测样品的光谱图、色谱图的比对进行定性鉴别；根据对照品和待测样品色谱图峰面积的比值来计算待测样品中各化合物的含量。
[0024]有益效果
[0025]本专利技术公开了一种利用UPLC
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PDA同时检测多种中药提取物中多成分的方法，该方法快速、灵敏、准确、专属性强，通过一次样品处理，采用一套液相色谱系统可同时鉴别多种中药提取物中的多种化合物，不仅节省了试剂、时间，提高了工作效率，而且解决了药典没有方法的问题，从而更好地对提取物进行质量控制。
附图说明
[0026]图1：7种混合对照品溶液色谱图(进样体积1.0μL)；
[0027]图2：7种混合对照品溶液色谱图(进样体积0.5μL)；
[0028]图3：紫锥菊提取物的色谱图(进样体积1.0μL)；
[0029]图4：北京生泰尔公司提供的蒲公英提取物的色谱图；
[0030]图5：大兴安岭提取物公司提供的蒲公英提取物的色谱图；
[0031]图6：潍坊诺达兽药有限公司提供的金银花提取物(50％甲醇)的色谱图；
[0032]图7：潍坊诺达兽药有限公司提供的金银花提取物(75％乙醇)的色谱图。
[0033]图8：7种化合物光谱图。
具体实施方式
[0034]以下，将详细地描述本专利技术。在进行描述之前，应当理解的是，在本说明书和所附的权利要求书中使用的术语不应解释为限制于一般含义和字典含义，而应当在允许专利技术人适当定义术语以进行最佳解释的原则的基础上，根据与本专利技术的技术方面相应的含义和概念进行解释。因此，这里提出的描述仅仅是出于举例说明目的的优选实例，并非意图限制本专利技术的范围，从而应当理解的是，在不偏离本专利技术的精神和范围的情况下，可以由其获得其他等价方式或改进方式。
[0035]以下实施例仅是作为本专利技术的实施方案的例子列举，并不对本专利技术构成任何限制，本领域技术人员可以理解在不偏离本专利技术的实质和构思的范围内的修改均落入本专利技术的保护范围。除非特别说明，以下实施例中使用的试剂和仪器均为市售可得产品。
[0036]实施例
[0037]一种采用UPLC
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PDA检测器同时测定3种中药提取物中的7种成分的检测方法，所述3种中药提取物为紫锥菊提取物、蒲公英提取物、金银花提取物，所述7种主成份为绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、4,5
‑
二
‑
O
‑
咖啡酰奎宁酸、菊苣酸和单咖啡酰酒石酸、咖啡酸。
[0038]具体包括下述步骤：
[0039]第一步：供试品溶液的制备：取供试品，加不同浓度的甲醇水溶液或乙醇水溶液，超声提取25
‑
35min，10000rpm/min离心5min，上清液过滤后上机测定；
[0040]第二步，对照品溶液的制备：分别取绿原酸、隐本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用UPLC
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PDA同时检测多种中药提取物中多成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）制备供试品溶液：取供试品，加溶剂，超声提取、离心，过滤得到上清液即为供试品溶液，备用；（2）制备对照品储备溶液：分别取各个要检测的成分作为对照品，加溶剂制成各对照品储备溶液，备用；（3）UPLC
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PDA检测：分别取上述步骤1得到的供试品溶液和步骤2得到的各对照品储备溶液，注入超高效液相色谱仪(UPLC)，PDA检测器进行梯度洗脱，分别得到供试品和对照品的色谱图和光谱图；（4）结果判定：通过对供试品和对照品的光谱图、色谱图进行比对分析，对各成分进行定性鉴别和定量测定。2.根据权利要求1所述的利用UPLC
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PDA同时检测多种中药提取物中多成分的方法，其特征在于，所述步骤1中，溶剂为甲醇水溶液或乙醇水溶液，超声提取25
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35min，10000rpm/min离心5min。3.根据权利要求1所述的利用UPLC
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PDA同时检测多种中药提取物中多成分的方法，其特征在于，所述步骤3中，UPLC
‑
PDA检测的进样量：0.2～2μL；梯度洗脱的流速：0.40～0.44 mL/min；柱温：30
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40℃。4.根据权利要求3所述的利用UPLC
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PDA同时检测多种中药提取物中多成分的方法，其特征在于，所述步骤3中， UPLC
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PDA检测的流动相系统：流动相A：乙腈，乙腈中含有体积含量0.1%的磷酸；流动相B：水，水中含有体积含量0.1%的磷酸。5.根据权利要求4所述的利用UPLC
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PDA同时检测多种中药提取物中多成分的方法，其特征在于，所述步骤3中， UPLC
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PDA检测的波长扫描范围：190
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400nm...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏秀丽，邹明，王海挺，张传津，张志民，刘明强，
申请(专利权)人：青岛农业大学，
类型：发明
国别省市：