结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药突变检测方法及检测试剂盒技术

本申请公开了一种结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药突变检测方法及检测试剂盒。本申请中，所述试剂盒包括用于检测结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药突变的PCR引物对组和探针的混合液。所述试剂盒基于荧光PCR熔解曲线法设计，检测准确性高，一次性检测的突变位点多，不仅避免交叉污染，而且检测周期短，检测成本低。检测成本低。检测成本低。

【技术实现步骤摘要】
结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药突变检测方法及检测试剂盒


[0001]本专利技术涉及生物
，特别涉及结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药突变检测方法及检测试剂盒。

技术介绍

[0002]结核病为结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)引起的慢性传染性疾病。结核病主要通过飞沫传播，可侵犯人体全身多个脏器，其中以肺结核(Pulmonary tuberculosis，PTB)最多见，具有高感染率、高发病率和高致死率。在20世纪40年代至60年代，链霉素(streptomycin，SM)、异烟肼(isoniazid，INH)、吡嗪酰胺(pyrazinamide，PZA)、乙胺丁醇(ethambutol，EMB)、利福平(rifampicin，RIF)等抗结核药物的问世给结核病的治疗带来了希望，并使结核病疫情在很大程度得到控制，抗结核化疗药物成为人们抵抗结核病的重要武器。然而，由于抗结核治疗的不规范以及免疫抑制剂的滥用，使得耐药结核病频繁发生。
[0003]PZA酶活性的降低和丧失是MTB产生PZA耐药的主要原因，编码PZA本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于检测结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药突变的PCR引物对组，其特征在于，所述PCR引物对组包括：第一引物对，所述第一引物对包括如SEQ ID NO.:1所示的正向引物；和，如SEQ ID NO.:4所示的反向引物；和/或第二引物对，所述第二引物对包括如SEQ ID NO.:2所示的正向引物；和，如SEQ ID NO.:5所示的反向引物；和/或第三引物对，所述第三引物对包括如SEQ ID NO.:3所示的正向引物；和，如SEQ ID NO.:6所示的反向引物。2.一种用于检测结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药突变的引物探针混合液，其特征在于，所述引物探针混合液包括如权利要求1所述的PCR引物对组和选自下组的一个或多个探针：第一探针，特异性靶向吡嗪酰胺耐药基因pncA的第
‑
7和/或第
‑
11位突变位点；第二探针，特异性靶向吡嗪酰胺耐药基因pncA的第29和/或第34位突变位点；第三探针，特异性靶向吡嗪酰胺耐药基因pncA的第137和/或第139位突变位点；第四探针，特异性靶向吡嗪酰胺耐药基因pncA的第202、第203和/或第208位突变位点；第五探针，特异性靶向吡嗪酰胺耐药基因pncA的第254位突变位点；和第六探针，特异性靶向吡嗪酰胺耐药基因pncA的第281位突变位点。3.根据权利要求2所述的引物探针混合液，其特征在于，所述第一探针如SEQ ID NO：7所示；和/或所述第二探针如SEQ ID NO：8所示；和/或所述第三探针如SEQ ID NO：9所示；和/或所述第四探针如SEQ ID NO：10所示；和/或所述第五探针如SEQ ID NO：11所示；和/或所述第六探针如SEQ ID NO：12所示。4.根据权利要求2所述的引物探针混合液，其特征在于，所述第一探针和所述第四探针具有第一荧光标记；所述第二探针和所述第五探针具有第二荧光标记；所述第三探针和所述第六探针具有第三荧光标记；且，所述第一荧光标记、所述第二荧光标记和所述第三荧光标记互不相同。5.根据权利要求4所述的引物探针混合液，其特征在于，所述第一荧光标记、所述第二荧光标记和所述第三荧光标记分别独立地选自Texas Red、CY5和VIC。6.根据权利要求4所述的引物探针混合液，其特征在于，SEQ I...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱小亚，蒋析文，徐小解，王燕灵，申莹，
申请(专利权)人：广州达安基因股份有限公司，
类型：发明
国别省市：