奥利司他在制备治疗微孢子虫病的药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及奥利司他在制备治疗微孢子虫病的药物中的应用，属于药物制备技术领域。本发明专利技术提供了奥利司他在制备治疗微孢子虫病的药物中的应用。奥利司他能够抑制无脊椎动物微孢子虫代表

【技术实现步骤摘要】
奥利司他在制备治疗微孢子虫病的药物中的应用


[0001]本专利技术涉及药物制备
，具体涉及奥利司他在制备治疗微孢子虫病的药物中的应用。

技术介绍

[0002]微孢子虫(Microsporidia)是一类专性细胞内寄生的真核微生物。这类病原的宿主范围广泛，可以感染几乎所有无脊椎动物和脊椎动物。感染家蚕的家蚕微粒子虫，感染对虾的虾肝肠胞虫和感染蜜蜂的蜜蜂微孢子虫等均严重威胁畜牧水产行业。虽然微孢子虫一般不感染免疫系统正常的人群，但是可以感染免疫力较低的人群，例如艾滋病患者、器官移植者和先天遗传性免疫缺陷病患者等，由兔脑炎微孢子虫和海伦脑炎微孢子虫等微孢子虫引起的病例的报道频率也越来越高。
[0003]目前临床上可用于治疗人类微孢子虫病的药物为阿苯达唑和烟曲霉素。由于烟曲霉素具有一定的副作用，目前仅在美洲被批准用于人类和动物微孢子虫治疗，在欧盟和我国该药并未被批准使用。驱虫药阿苯达唑虽然被证实可以抑制微孢子虫的增殖，但是停药后往往会存在复发的现象。目前我国批准使用多菌灵用于家蚕制种过程中微孢子虫病的防治，但是该化合物有肝脏与生殖毒性，并不适用于人类与畜牧生产。因此，亟待开发出一种安全有效的广谱抗微孢子虫药物，用于治疗人与动物微孢子虫病。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供奥利司他在制备治疗微孢子虫病的药物中的应用。本专利技术制备得到的药物能够有效治疗微孢子虫病，抑制微孢子虫的增殖。
[0005]本专利技术提供了奥利司他在制备治疗微孢子虫病的药物中的应用。
[0006]本专利技术还提供了奥利司他在制备抑制微孢子虫增殖的药物中的应用。
[0007]优选的是，所述微孢子虫包括：无脊椎动物微孢子虫和/或脊椎动物微孢子虫。
[0008]优选的是，所述无脊椎动物微孢子虫包括家蚕微粒子虫和/或虾肝肠胞虫。
[0009]优选的是，所述脊椎动物微孢子虫包括海伦脑炎微孢子虫和/或兔脑炎微孢子虫。
[0010]本专利技术提供了奥利司他在制备治疗微孢子虫病的药物中的应用。奥利司他(Orlistat)为一种肥胖症治疗药。与常见的减肥药不同，其靶点为胃肠道脂肪酶，通过与胃、胰脂肪酶的丝氨酸残基结合使其脂肪酶失活，阻止三酰甘油水解为游离脂肪酸和单酰基甘油酯，减少对膳食中脂肪的吸收。目前奥利司他主要用于适度饮食控制和运动锻炼的肥胖症和超重者，包括已经出现与肥胖相关的危险因素的患者的长期治疗。本专利技术令人惊讶地发现奥利司他对可以感染家蚕的家蚕微粒子虫，可以感染对虾的虾肝肠胞虫，可以感染人类和其他哺乳动物的兔脑炎微孢子虫和海伦脑炎微孢子虫均具有良好的抑制能力。
附图说明
[0011]图1为本专利技术提供的细胞水平添加奥利司他对家蚕微粒子虫增殖的影响结果图；
[0012]图2为本专利技术提供的细胞水平添加奥利司他对兔脑炎微孢子虫增殖的荧光显微观察结果图；
[0013]图3为本专利技术提供的细胞水平添加奥利司他对兔脑炎微孢子虫增殖的影响结果图；
[0014]图4为本专利技术提供的细胞水平添加奥利司他对海伦脑炎微孢子虫增殖的影响结果图；
[0015]图5为本专利技术提供的饲料中添加奥利司他对虾肝肠胞虫增殖的影响结果图。
具体实施方式
[0016]本专利技术提供了奥利司他在制备治疗微孢子虫病的药物中的应用。为获得安全高效的微孢子虫治疗药物，本专利技术以草地贪夜蛾SF9III细胞系
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家蚕微粒子虫感染模型为基础，测试了大部分目前临床上常用的化合物，最终意外发现奥利司他对家蚕微粒子虫、海伦脑炎微孢子虫、兔脑炎微孢子虫和虾肝肠胞虫的增殖有显著的抑制效果。奥利司他是一种在临床上广泛使用的减肥药，生产成本低，安全性高且副作用少。本专利技术对奥利司他的来源没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的常规奥利司他市售产品即可。
[0017]本专利技术还提供了奥利司他在制备抑制微孢子虫增殖的药物中的应用。奥利司他能够抑制无脊椎动物微孢子虫代表
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家蚕微粒子虫和虾肝肠胞虫的增殖，亦可抑制脊椎动物微孢子虫代表
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海伦脑炎微孢子虫和兔脑炎微孢子虫的增殖。
[0018]在本专利技术中，所述微孢子虫包括：无脊椎动物微孢子虫和/或脊椎动物微孢子虫。
[0019]在本专利技术中，所述无脊椎动物微孢子虫包括家蚕微粒子虫和/或虾肝肠胞虫。
[0020]在本专利技术中，所述脊椎动物微孢子虫包括海伦脑炎微孢子虫和/或兔脑炎微孢子虫。
[0021]本专利技术所述应用中，当所述微孢子虫为家蚕微粒子虫时，奥利司他的添加终浓度优选为0.8～1.5μg/mL，更优选为1μg/mL。当所述微孢子虫为虾肝肠胞虫时，奥利司他的添加终浓度优选为3～12mg/kg，更优选为6mg/kg。当所述微孢子虫为海伦脑炎微孢子虫时，奥利司他的添加终浓度优选为8～12μg/mL，更优选为10μg/mL。当所述微孢子虫为兔脑炎微孢子虫时，奥利司他的添加终浓度优选为8～12μg/mL，更优选为10μg/mL。
[0022]试验结果表明，奥利司他处理的实验组中，病原含量均远低于仅添加等量溶剂的对照组，证明添加奥利司他可以显著抑制相应微孢子虫的增殖。
[0023]下面结合具体实施例对本专利技术所述的奥利司他在制备治疗微孢子虫病的药物中的应用做进一步详细的介绍，本专利技术的技术方案包括但不限于以下实施例。
[0024]实施例1
[0025]SF9III细胞传代培养
[0026](1)显微观察确定草地贪夜蛾细胞SF9III处于良好的生长状态与较高的细胞汇合度；
[0027](2)用无菌玻璃吸管轻轻吹起贴壁的细胞；
[0028](3)将细胞悬液转移至离心管中，1000g离心5min，弃上清；
[0029](4)向离心管中添加1mL Grace昆虫细胞培养基，轻轻吹散细胞沉淀；
[0030](5)取两个新的细胞培养瓶，各添加2mL培养基，然后分别添加500μL细胞悬液，轻
轻混匀，静置2min，等待细胞贴壁后弃去培养基；
[0031](6)在新细胞培养瓶中添加3mL Grace昆虫细胞培养基，做好标记，置于28℃恒温培养箱培养。
[0032]SF9III细胞铺孔及添毒
[0033](1)打开12孔细胞培养板，每孔添加300μL培养基铺满孔底；
[0034](2)向细胞培养瓶中添加1mL的Grace昆虫细胞培养基，用玻璃吸管(已灭菌)轻轻吹下贴壁细胞，吹打混匀，取50μL悬液滴入血球计数板后用显微镜进行直接计数；
[0035](3)将4mL细胞悬液均匀分到12个样品孔中，轻轻摇匀，使细胞悬液充满孔底，静置3min，吸去培养基，添加600μL新的Grace昆虫细胞培养基；
[0036](4)按照细胞：家蚕微粒子虫为1：20的比例吸取一定量的家蚕微粒子虫的成熟孢子悬液，3500g离心3min，弃上清；
[0037](5)用0.1M的KOH溶液(以0.22μm无菌滤膜过滤除菌)处理孢子沉淀2min，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.奥利司他在制备治疗微孢子虫病的药物中的应用。2.奥利司他在制备抑制微孢子虫增殖的药物中的应用。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述微孢子虫包括：无脊椎动物微孢子虫和/或脊椎动物微孢子虫。4.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：韦俊宏，费志慧，李春峰，郭森文，杜士阁，潘国庆，周泽扬，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：