用于显微镜检查的微板制造技术

本发明专利技术涉及一种用于类器官(30)的显微镜检查的微板(10)，该微板包括：具有至少一个凹部(20)的主体(11)，该凹部(20)适于容纳类器官(30)并限制类器官(30)的移动，以及反射表面(40)，该反射表面(40)相对于凹部(20)倾斜，使得朝向微板(10)的入射光束沿基本上水平的方向被导向到类器官(30)上。向被导向到类器官(30)上。向被导向到类器官(30)上。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于显微镜检查的微板
专利

[0001]本专利技术涉及用于类器官的显微镜检查的微板(microplate)和用于对类器官进行显微镜检查的方法。
[0002]专利技术背景
[0003]用于生长细胞(诸如在类器官中的生长细胞)的普通容器，被称为微板。微板是平坦的板，最常见由塑料制成，微板上有布置成矩阵的多个孔(well)。每个孔通常可以容纳几纳升至几毫升之间的液体，并且用作可以在其中培养细胞的小试管。典型的微板可以在任意处具有布置成矩形矩阵的6个至1536个之间的孔。这些孔通常形成为微板中的圆柱，具有开放的顶部和封闭的底部，使得这些孔可以容纳少量液体。
[0004]当使细胞在微板的孔中生长时，期望能够监测细胞，例如监测细胞生长或细胞的当前数量。微板因此可以被放置在显微镜下，使得孔中的细胞可以从孔的上方或下方观察，最常见的是在沿着孔的深度延伸部的方向上观察。由于这个原因，微板或至少微板的位于孔下方的部分被制成透明的，使得孔中的细胞可以被显微镜监测。
[0005]因为大多数细胞是透明的，所以可能难以使用常规的光学显微镜来监测它们。为了更好地观察细胞和细胞结构，细胞和细胞结构可以在被观察之前着色。然而，这种着色经常导致细胞死亡，从而阻止了对活细胞的现象的观察。
[0006]可替代的技术是将荧光分子附着于活细胞。然后通过将具有合适波长的激发光束导向细胞，荧光分子将被激发并发出它们自己的彩色光，这些光可以在显微镜中观察到。典型地，激发光束是激光束。附着荧光分子的一个优点是，附着荧光分子允许通过仅用激发光束照射细胞的一部分来仅监测该部分。
[0007]常规微板的问题是，常规微板仅允许竖直照射并因此激发荧光分子。因此，将只能观察到在竖直方向上延伸的细胞部分。
[0008]不可能照射并因此激发在水平方向上延伸的细胞部分的荧光分子，该水平方向是垂直于成像轴的方向。这是因为微板本身挡住了感兴趣的特定孔。
[0009]因此，期望对微板进行改进，该改进允许水平照射孔中的细胞。
[0010]专利技术概述
[0011]本专利技术的目的是提供一种用于类器官的显微镜检查的微板，该微板允许对类器官进行水平照射。
[0012]根据第一方面，这些和其他目的全部或至少部分通过用于类器官的显微镜检查的微板来实现，该微板包括：
[0013]主体，该主体具有至少一个凹部，该凹部适于容纳类器官并限制类器官的移动，以及
[0014]反射表面，
[0015]其中反射表面相对于凹部倾斜，使得朝向微板的入射光束沿基本上水平的方向导向到类器官上。
[0016]通过这种微板，可以从水平方向照射位于微板中的类器官。因此，可以选择性地激
发类器官的在水平方向上延伸的一部分的荧光分子。如果激发光束是光片(light
‑
sheet)的形式，则可以选择性地激发在水平方向上延伸的类器官片。这允许类器官片的图像在与通过类器官的常规竖直照射显微镜检查所获取的图像相同的平面中延伸。因此，微板允许培养细胞，诸如类器官，并且微板允许荧光显微镜检查和常规竖直照射显微镜检查两者。不需要将类器官移出微板，以便能够通过显微镜检查(尤其是荧光显微镜检查)对类器官进行监测。
[0017]光束可以是激光束。激光束是用于激发荧光分子的合适光束。
[0018]入射光束可以在竖直方向入射。
[0019]入射光束可以在微板的顶部处入射。入射光束可以在微板的底部处入射。
[0020]反射表面可以形成在具有第一折射率的第一体积和具有第二折射率的第二体积之间。
[0021]通过这种方式，反射表面可以通过反射将入射光束导向类器官。优选地，满足了通过完全内部反射将光束导向类器官的条件。为了满足完全内部反射的条件，折射率的定额必须足够大，并且入射光束的入射角必须足够大。
[0022]第一折射率可以大于第二折射率。
[0023]由此，可以促进在第一体积中行进的光束入射朝向第二体积的反射。
[0024]第一体积可以是主体的具有第一折射率的一部分，并且第二主体可以是主体的具有第二折射率的一部分。
[0025]由此，反射表面可以由主体本身制成。例如通过以下方式制成：在主体中形成具有不同于主体的主要部分的折射率的结构，光束可以在该结构处被反射。
[0026]第一体积可以由第一材料制成，并且第二体积可以由第二材料制成。
[0027]由此，反射表面可以通过以下方式制成：在主体中形成由不同于主体的主要部分的材料制成的结构，该结构具有不同于主体的主要部分的折射率，光束可以在该结构处被反射。
[0028]第一体积可以是主体的一部分，并且第二体积可以由主体的底部中的凹槽中存在的周围介质构成。
[0029]通过这种方式，可以以简单的方式实现反射表面，而无需在主体本身中形成任何复杂的结构。
[0030]凹槽可以被形成为三角形形状。
[0031]这允许凹槽具有不管光束在何处碰到凹槽都特别适合于将入射光束导向类器官的形状。此外，这种形状可以允许光束在凹槽的至少两侧反射，从而允许凹槽被用于微板的多于一个的孔。
[0032]凹部可以被形成为圆柱或棱柱。
[0033]这是一种既适合于在其中培养细胞又适合于细胞的显微镜检查的形状。
[0034]另一种可能的形状是圆锥或棱锥的形状，其中圆锥或棱锥的顶点被定位成朝向微板的底侧。圆锥或棱锥可以是截头的，或者可以不是截头的。
[0035]反射表面可以被布置成使得类器官的每个点可以被入射朝向反射表面的相应点的光束照射。
[0036]这样，微板允许选择性地水平照射类器官的每个部分。类器官可以被一次全部水
平照射，或者类器官的所选部分可以被水平照射。通过将光束一部分接一部分地导向反射表面的相应部分，可以一部分接一部分地水平照射类器官的整个部分。
[0037]反射表面的“相应点”在本文意指反射表面上的一个点，该点将入射光束沿水平方向导向类器官上的点。
[0038]反射表面可以相对于凹部倾斜45度。
[0039]通过这种方式，反射表面可以将入射光束沿水平方向导向类器官，该入射光束沿竖直方向入射。
[0040]反射表面可以相对于凹部倾斜40度至50度之间。这将允许反射表面将入射光束沿水平方向导向类器官，该入射光束沿接近竖直方向的方向入射。
[0041]凹部可以包括第一部分，该第一部分适于通过具有水平横截面面积来容纳类器官并限制类器官的移动，使得类器官的移动受到限制。
[0042]通过这种方式，类器官可以保持在适当位置，使得可以获取该类器官的图像。
[0043]凹部可以包括适于接收移液管的第二部分，
[0044]其中第二部分具有水平横截面面积，使得第二部分可以接收移液管。
[0045]通过这种方式，可以容易地进入细胞培养的环境，并且例如，可以向细胞提供营养。
[0046]第二部分可以具有比第一部分大的水平横截面面积。第一部本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于类器官(30)的显微镜检查的微板(10)，包括：主体(11)，所述主体具有至少一个凹部(20)，所述凹部(20)适于容纳所述类器官(30)并限制所述类器官(30)的移动，以及反射表面(40)，其特征在于，所述反射表面(40)相对于所述凹部(20)倾斜，使得朝向所述微板(10)的入射光束沿基本上水平的方向被导向到所述类器官(30)上。2.根据权利要求1所述的微板(10)，其中，所述反射表面(40)形成在具有第一折射率的第一体积(41)和具有第二折射率的第二体积(42)之间。3.根据权利要求2所述的微板(10)，其中，所述第一折射率大于所述第二折射率。4.根据权利要求2或3所述的微板(10)，其中，所述第一体积(41)是所述主体(11)的具有第一折射率的一部分，并且所述第二体积(42)是所述主体(11)的具有第二折射率的一部分。5.根据权利要求2至4所述的微板(10)，其中，所述第一体积(41)由第一材料制成，并且所述第二体积(42)由第二材料制成。6.根据权利要求2所述的微板(10)，其中，所述第一体积(41)是所述主体(11)的一部分，并且所述第二体积(42)由在所述主体(11)的底部中的凹槽(42)中存在的周围介质构成。7.根据权利要求6所述的微板(10)，其中，所述凹槽(42)形成为三角形形状。8.根据前述权利要求中任一项所述的微板(10)，其中，所述凹部(20)被形成为圆柱或棱柱。9.根据前述权利要求中任一项所述的微板(10)，其中，所述反射表面(40)被布置成使得所述类器官(30)的每个点能够被入射朝向所述反射表面(40)的相应点的光束照射。10.根据前述权利要求中任一项所述的微板(10)，其中，所述反射表面(40)相对于所述凹...

【专利技术属性】
技术研发人员：彼得，
申请(专利权)人：相位全息成像PHI有限公司，
类型：发明
国别省市：