基于Crispr-cas9技术构建HCMV编码miRNA缺失株的方法及其应用技术

技术编号:31820396 阅读:35 留言:0更新日期:2022-01-12 12:11
本发明专利技术提供一种构建重组人巨细胞病毒的方法及其应用。本发明专利技术构建重组人巨细胞病毒的方法利用Crispr

【技术实现步骤摘要】
HCMV病毒株(HCMV编码miRNA缺失株)。
[0006]为了解决上述技术问题,本专利技术提供了一种构建重组人巨细胞病毒的方法,包括利用CRISPR/Cas9方法敲除目的人巨细胞病毒中miRNA基因,得到所述miRNA表达量低于所述目的人巨细胞病毒的重组病毒。
[0007]上述方法中,所述miRNA分子能抑制宿主IFNAR1表达,所述miRNA分子的核苷酸序列是序列表中序列1。
[0008]上述方法中,所述CRISPR/Cas9方法利用CRISPR/Cas9系统敲除目的人巨细胞病毒中miRNA基因,所述CRISPR/Cas9系统包括表达sgRNA的载体,所述sgRNA的编码序列为序列表中序列2第1-19位序列和/或序列表中序列2第1-19位序列的反向互补序列。
[0009]为了解决上述技术问题,本专利技术还提供上述的方法在鉴定人巨细胞病毒miRNA功能中的应用,以及在制备鉴定人巨细胞病毒miRNA功能的产品(试剂或试剂盒)中的应用。
[0010]由上述的方法构建的重组人巨细胞病毒也属于本专利技术的保护范围。
[0011]为了解决上述技本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种构建重组人巨细胞病毒的方法,其特征在于:包括利用CRISPR/Cas9方法敲除目的人巨细胞病毒中miRNA基因,得到所述miRNA表达量低于所述目的人巨细胞病毒的重组病毒。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述miRNA能抑制宿主IFNAR1表达,所述miRNA的核苷酸序列是序列表中序列1。3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述CRISPR/Cas9方法利用CRISPR/Cas9系统敲除目的人巨细胞病毒中miRNA基因,所述CRISPR/Cas9系统包括表达sgRNA的载体,所述sgRNA的编码序列为序列表中序列2第1-19位序列和/或序列表中序列2第1-19位序列的反向互补序列。4.权利要求1-3任一项所述的方法在鉴定人巨细胞病毒miRNA功能中的应用。5...

【专利技术属性】
技术研发人员:张艳宇邓江宋鑫马平吕丽萍张骞张阳阳周锡鹏许金波
申请(专利权)人:中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
类型:发明
国别省市:

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