一种布鲁氏菌蛋白抗原及其原核表达方法和应用技术

技术编号:31820394 阅读:19 留言:0更新日期:2022-01-12 12:11
本发明专利技术属于基因工程技术领域,特别是涉及一种布鲁氏菌蛋白及其原核表达方法和应用。本发明专利技术采用原核表达载体构建包含抗原蛋白BAB的编码基因的重组载体,实现了抗原蛋白BAB的原核表达,方法简单易行,获得的表达产物在纯化后不经任何处理即具有明显的免疫效果,为布鲁氏菌诊断方法及iELISA诊断试剂盒的建立提供基础。基础。

【技术实现步骤摘要】
一种布鲁氏菌蛋白抗原及其原核表达方法和应用


[0001]本专利技术属于基因工程
,特别是涉及一种布鲁氏菌蛋白抗原及其原核表达方法和应用。

技术介绍

[0002]布鲁菌病(布病)是由布鲁氏菌引起的以流产和发热为特征的人兽共患病,严重地威胁着人和多种动物的生命健康,对农业生产和公共卫生造成了巨大的威胁。布鲁氏菌具有内寄生的特性,因此被感染的人或动物一般需要接受长时间的抗生素治疗,而且往往会留下严重后遗症。
[0003]反刍动物和猪对布鲁氏菌高度易感。布鲁氏菌特征性地侵害其生殖器官并导致母畜流产和不孕。当患病母畜分娩时,胎盘组织中布鲁氏菌达到极高数量,每克组织中细菌数可高达1014个,因此母畜流产是该病的传染性病症。在世界卫生组织(WHO)实验室生物安全手册中,布鲁氏菌被列为Ⅲ类危险级。布鲁氏菌病易传播给人,引起急性发热性疫病(波浪热),可进一步发展成慢性型,引起肌肉-骨骼系统、心血管系统和中枢神经系统的严重并发症。本病流行区域应采取预防措施,防止人感染。职业性接触是常见的感染原因,口腔、呼吸道和结膜是基本感染途径。
[0004本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种编码布鲁氏菌蛋白抗原的基因序列,其特征在于,所述基因序列的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。2.一种布鲁氏菌蛋白抗原的重组载体,其特征在于,所述重组载体中包含如SEQ ID No.1所示的基因序列。3.一种布鲁氏菌蛋白抗原的原核表达的方法,其特征在于,至少包括以下步骤:(1)扩增编码布鲁氏菌蛋白抗原的基因序列,所述基因序列的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,(2)构建重组载体:将含有SEQ ID No.1所示核苷酸序列的PCR扩增产物连接到pMD19-T克隆载体中,构建得到重组质粒pMD19-BAB;分别酶切重组质粒pMD19-BAB和原核表达载体pET-30a(+),构建得到包含BAB的编码基因的重组载体pET30-BAB;(3)表达重组载体pET30-BAB:将重组载体pET30-BAB转化至BL21菌株中,利用IP...

【专利技术属性】
技术研发人员:温永俊刘国英关平原范秀丽杭天宇刘建奇魏学峰
申请(专利权)人:内蒙古农业大学
类型:发明
国别省市:

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