一种基于核酸适配体传感器高灵敏检测氧氟沙星的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于核酸适配体传感器高灵敏检测氧氟沙星的方法，涉及生物传感器检测氟喹诺酮类抗生素领域。包括以下步骤：1)Cy3

【技术实现步骤摘要】
一种基于核酸适配体传感器高灵敏检测氧氟沙星的方法


[0001]本专利技术属于生物化学、分子生物学和分析化学
，涉及生物传感器检测氟喹诺酮类抗生素，具体涉及一种基于核酸适配体传感器高灵敏检测氧氟沙星的方法。

技术介绍

[0002]喹诺酮类药物构成了一大类合成类抗生素药物，在治疗多种疾病时具有显著的效果，特别是它们的氟化衍生物，称为氟喹诺酮类抗生素(Fluoroquinones，FQs)。FQs是一种潜在的高污染物质，在低浓度下不仅会污染水环境，还会对地表水造成毒性影响。氧氟沙星(Ofloxacin，OFL)作为一种典型的、用途广泛的氟喹诺酮类抗生素，对大多数革兰氏阴性菌和许多革兰氏阳性菌具有广泛药用活性。在机体内广泛使用氧氟沙星会导致其体内代谢不完全，且具有抗降解和高吸收特性，会在环境中积累，特别是在土壤环境中。更为严重的是，抗生素的滥用正在加速微生物耐药性(AMR)的出现，这使得微生物诱导的感染难以治疗，有时甚至无法治愈。
[0003]当前，氟喹诺酮类抗生素的检测方法主要有高效液相色谱法、电化学方法、荧光检测、萃取分光光度法和液相本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于检测氧氟沙星的核酸适配体传感器，其特征在于，包括Cy3
‑
适配体和BHQ2
‑
cDNA；所述Cy3
‑
适配体为Cy3荧光标记的OFL核酸适配体，是在SEQ ID NO.1所示序列的3
′
端修饰有荧光基团Cy3；所述BHQ2
‑
cDNA为BHQ2修饰的互补链cDNA，是在SEQ ID NO.2所示序列的5
′
端修饰有猝灭基团BHQ2。2.基于权利要求1所述的核酸适配体传感器高灵敏检测氧氟沙星的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)Cy3
‑
适配体与BHQ2
‑
cDNA结合，形成混合物，BHQ2猝灭了Cy3的荧光；2)将待测样品加入到步骤1)中的混合物，静置反应，当待测样品中存在目标物OFL时，发生亲和力竞争，Cy3
‑
适配体与OFL结合形成Cy3
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适配体/OFL混合物，解开适配体/cDNA的碱基对，通过Cy3荧光基团释放恢复荧光，且Cy3的荧光被邻近的OFL增强；3)建立OFL浓度与荧光恢复和增强程度之间的线性回归方程，根据荧光的恢复和增强程度，测定待测样品中OFL的浓度。3.根据权利要求2所述的基于核酸适配体传感器高灵敏检测氧氟沙星的方法，其特征在于，步骤1)中，所述Cy3
‑
适配体是在SEQ ID NO.1所示序列的3
′
端修饰有荧光基团Cy3；所述BHQ2
‑
cDNA是在SEQ ID NO.2所示序列的5
′
端修饰有猝灭基团BHQ2。4.根据权利要求2所述的基...

【专利技术属性】
技术研发人员：李胎花，王婷，李滨汐，金龙，吕新月，王雪，
申请(专利权)人：南京林业大学，
类型：发明
国别省市：