一种免疫检测方法和装置制造方法及图纸

本发明专利技术公开了一种免疫检测方法和装置，该方法包括如下步骤：分别制备发光微球、感光球和固相载体；将所述发光微球或所述感光球固定在固相载体上；对经过固定处理的所述固相载体进行激光照射，以检测通过单线氧传递发光。利用单线氧传递原理实现均相免疫反应，达到免洗涤、免分离、快速反应、快速检测的目的；反应过程中利用生物素

【技术实现步骤摘要】
一种免疫检测方法和装置


[0001]本专利技术涉及医疗检测
，具体涉及一种免疫检测方法和装置。

技术介绍

[0002]光激化学发光技术是一种以高分子微粒为基础的化学发光技术，它可以通过感光微粒和发光微粒在一定距离范围内结合，产生离子氧能量传递，发出光信号，从而对待测样品进行检测。感光微粒是填充有感光化合物的高分子微粒，发光微粒是填充有发光化合物和铜系元素的高分子微粒。光激化学发光技术的核心原理是能量的近距离转移，转移的介质是高能态的离子氧。当红色激光照射感光微粒后，释放单线态氧离子，其传播距离为200nm左右，只有当感光微粒和发光微粒的距离足够接近的情况下，感光微粒释放的单线态氧离子才能到达发光微粒，从而产生一系列化学反应，发射出高能级的光。由于反应体系中，微粒的浓度很低，碰撞几率非常小，因此本底信号微弱，只有感光微粒和发光微粒通过免疫反应结合以后，才会发射岀明显的光，因此系统灵敏度很高。
[0003]但是，由于受到抗原
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抗体反应条件的制约，单线氧传递的方法应用到免疫学检测会出现检测范围非常窄的现象。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种免疫检测方法，其特征在于，包括如下步骤：分别制备发光微球、感光球和固相载体；将所述发光微球或所述感光球固定在固相载体上；以及对经过固定处理的所述固相载体进行激光照射，以检测通过单线氧传递发光。2.根据权利要求1所述的免疫检测方法，其特征在于，所述将所述发光微球或所述感光球固定在固相载体上包括：取样本稀释液加入到反应容器内；取待检样本加入到所述样板稀释液中；37℃震荡搅拌5分钟；加入感光微球；加入发光微球；37℃震荡搅拌20分钟；加入固相载体；以及37℃震荡搅拌5分钟。3.根据权利要求2所述的免疫检测方法，其特征在于，所述固相载体包括以下几项中的一种或多种组合：磁颗粒、胶乳微球、发光板、发光管、硝酸纤维素膜。4.根据权利要求3所述的免疫检测方法，其特征在于，所述固相载体为富集磁颗粒，所述富集磁颗粒为50ul，所述感光微球为50ul，所述发光微球为50ul，所述样本稀释液为200ul，所述待检样本为10ul。5.根据权利要求1所述的免疫检测方法，其特征在于，所述对经过固定处理的所述固相载体进行激光照射，以检测通过单线氧传递发光包括：所述激光照射的波长为680nm、所述检测的波长为610
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615nm。6.根据权利要求4所述的免疫检测方法，其特征在于，所述发光微球的制备包括如下步骤：称取碳二亚胺10mg，用去离子水配制成2.0mg/ml的溶液；取1.0％浓度的感光微球置于1.0ml小玻璃瓶中并加入一个大小合适的磁力搅拌子；再将加入所述磁力搅拌子的溶液置于磁力搅拌器上搅拌400转/分；将所述去离子水配制成的2.0mg/ml溶液加入到所述磁力搅拌器上搅拌400转/分所得到的溶液中，按1.0ml微球比2.0mg碳二亚胺加样；室温搅拌60分钟；加入1.0mg/ml用磷酸盐配制的抗体或抗原，搅拌、滴加；室温搅拌2.0小时；加入0.5ml含有2.0％牛血清白蛋白的20mM Tris
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甘氨酸pH＝8.0缓冲液封闭；室温搅拌2.0小时；12000转/分离心30分钟；弃上清；用含有2.0％牛血清白蛋白的20mM Tris
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甘氨酸pH＝8.0缓冲液溶解沉淀物。7.根据权利要求1所述的免疫检测方法，其特征在于，在将所述发光微球或所述感光球固定在固相载体上之前，进一步包括：
4℃储存、备用制备好的所述发光微球。8.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：邢佑尚，
申请(专利权)人：南京开泰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：