一种人白细胞介素2变体及其用途制造技术

本公开涉及一种人白细胞介素2变体及其用途。具体而言，本公开涉及一种IL

【技术实现步骤摘要】
一种人白细胞介素2变体及其用途
[0001]本申请要求2021年7月30日提交的专利申请(申请号2021108684095，一种人白细胞介素2变体及其用途)的优先权。


[0002]本公开涉及具有一个或多个氨基酸突变的人白细胞介素
‑
2(IL
‑
2)变体或其衍生物。所述IL
‑
2变体或衍生物具有消除或降低的对高亲和力受体(IL
‑
2Rα/β/γ)的亲和力，并保留对中等亲和力受体(IL
‑
2Rβ/γ)的亲和力。本公开还涉及包含所述人IL
‑
2变体的免疫缀合物、编码多核苷酸、载体、宿主细胞、药物组合物、制备方法及治疗方法和用途。

技术介绍

[0003]人白细胞介素
‑
2(Interleukin
‑
2，IL
‑
2)，也称为T细胞生长因子(TCGF)。IL
‑
2基因位于4号染色体(4q27)，包括共约7kb的序列。IL
‑
2由约133个氨基酸组成，分子量约15kD。Doris Morgan等人1976和1977分别发现活化后的T细胞培养液可以促进T细胞增殖。培养液中的刺激因子被纯化并被鉴定为IL
‑
2。
[0004]最初的体外细胞实验表明T细胞在通过TCR和CD28活化之后，可以分泌IL
‑
2并在细胞表面表达IL
‑
2受体(IL
‑
2R)。IL<br/>‑
2和IL
‑
2R的结合可以引起T细胞的增殖和使T细胞产生效应。IL
‑
2是T细胞免疫反应中起到中心作用的分子。体内实验发现在敲除IL
‑
2或其受体后，动物产生了自身免疫。IL
‑
2不仅可以激活效应细胞(如T细胞和NK细胞)，还可以激活调节性T细胞，从而抑制过量针对自身的免疫。
[0005]IL
‑
2通过IL
‑
2R发生作用。IL
‑
2R包括三个亚基：IL
‑
2Rα(即CD25)、IL
‑
2Rβ(即CD122)和IL
‑
2Rγ(即CD132)。三个亚基可以形成三种受体形式：高亲和力受体包含所有三个亚基IL
‑
2Rα/β/γ，中亲和力受体包含IL
‑
2Rβ/γ和低亲和力受体IL
‑
2Rα。IL
‑
2Rβ和IL
‑
2Rγ是IL
‑
2激活下游信号通路所必需的，当IL
‑
2同时结合IL
‑
2Rβ和IL
‑
2Rγ时，两个受体亚基形成异源二聚体，磷酸化细胞内的STAT5，进入细胞核导致相应的基因转录和表达；IL
‑
2Rα并非信号所必需，但可以促进IL
‑
2与IL
‑
2Rβ和IL
‑
2Rγ的结合。
[0006]IL
‑
2Rγ在所有免疫细胞中均有表达；IL
‑
2Rβ在CD8+T细胞、NK细胞、调节性T细胞中均有表达，而且在T细胞被激活后还会提升表达水平；IL
‑
2Rα在调节性T细胞持续高表达，在被激活的CD8+T细胞中会有短暂表达，随即下调表达水平。
[0007]IL
‑
2主要由活化的T细胞，尤其是CD4+辅助T细胞合成。它刺激T细胞的增殖和分化，诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的生成以及外周血淋巴细胞分化成细胞毒性细胞和淋巴因子激活的杀伤(LAK)细胞，促进T细胞表达细胞因子和细胞溶解分子，促进B细胞的增殖和分化以及通过B细胞的免疫球蛋白合成，并刺激天然杀伤(NK)细胞的生成、增殖和活化。IL
‑
2在体内扩充淋巴细胞群体和提高这些细胞的效应器功能的能力使得其具有抗肿瘤效果，IL
‑
2免疫疗法成为某些转移性癌症患者的治疗选择。目前，高剂量IL
‑
2已被批准用于治疗转移性肾细胞癌和恶性黑素瘤。
[0008]WO2009135615公开的IL
‑
2变体在20、88或126位具有突变。WO2012062228公开的
IL
‑
2变体在38、42、45、62、68或88中的至少一个位置上具有突变。US8906356公开的IL
‑
2变体在91、126位具有突变。US9732134公开的IL
‑
2变体在15、16、22、84、88或95中的至少一个位置上具有突变。US7803361和US8124066公开的IL
‑
2变体包含R38W突变。

技术实现思路

[0009]本公开涉及具有一个或多个氨基酸突变的IL
‑
2变体(或其衍生物)、及其缀合物；还涉及所述IL
‑
2变体的用途、制备方法。
[0010]IL
‑
2变体或其衍生物
[0011]第一方面，本公开提供一种IL
‑
2变体(或其衍生物)，其与成熟野生型人IL
‑
2(SEQ ID No.11)相比包含一个或多个氨基酸突变。
[0012]“白介素
‑
2”或“IL
‑
2”指来自任何哺乳动物(如灵长类(如人)、啮齿动物(例如小鼠和大鼠))的任何天然的IL
‑
2。该术语涵盖未加工的IL
‑
2以及源自细胞中任何加工形式的IL
‑
2。该术语还涵盖天然存在的IL
‑
2变体(例如剪接变体或等位变体)。
[0013]“野生型人IL
‑
2”在其它方面与IL
‑
2变体相同，只是在IL
‑
2变体的每个氨基酸位置具有野生型氨基酸的IL
‑
2形式。术语“野生型”意图涵盖：包含一处或多处不影响对IL
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2受体结合能力的天然存在的氨基酸突变。
[0014]“成熟野生型人IL
‑
2”是指野生型人IL
‑
2的成熟形式。未加工的人IL
‑
2额外包含N端约20个氨基酸的信号肽，在成熟IL
‑
2分子中缺乏信号肽。示例性成熟野生型人IL
‑
2的氨基酸序列例如但不限于：数据库登录号INSDC的CAA25742.1、Swiss
‑
Prot的P60568.1、Genbank中NP_000577.2的21
‑
153段。在一些实施方案中，成熟野生型人IL
‑
2是SEQ ID NO.11所示的氨基酸序列。应当注意的是，S本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种人白细胞介素2(IL
‑
2)变体，相对于成熟野生型人IL
‑
2，所述IL
‑
2变体在第31至45中的一个或多个位点处包含氨基酸突变；优选地，其中所述突变是选自以下的任一项或其组合：成熟野生型人IL
‑
2第31至45位氨基酸残基突变为SEQ ID No.9所示序列；成熟野生型人IL
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2第35至41位氨基酸残基突变为SEQ ID No.10所示序列；成熟野生型人IL
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2第31至32位氨基酸残基突变为GG；成熟野生型人IL
‑
2第43至45位氨基酸残基突变为G。2.根据权利要求1所述的IL
‑
2变体，其中所述IL
‑
2变体是选自以下任一序列所示：SEQ ID No.1至8、12至17。3.根据权利要求1至2中任一项所述的IL
‑
2变体，其中：所述IL
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2变体与IL
‑
2Rα的亲和力降低；和/或所述IL
‑
2变体维持与IL
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2Rβ的亲和力；和/或所述IL
‑
2变体维持与IL
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2Rγ的亲和力；优选地，所述IL
‑
2变体与IL
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2Rα/β/γ的亲和力降低，并且维持所述IL
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2变体对IL
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2Rβ/γ的亲和力。4.一种IL
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2变体的衍生物，其包含权利要求1至3中任一项所述的IL
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2变体，所述IL
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2变体具有选自以下任一项的修饰或其组合：PEG化、糖基化、缀合至白蛋白、缀合至Fc、羟乙基化、去O
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糖基化；所述PEG化是指PEG连接至所述IL
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2变体的N端；优选地，PEG的...

【专利技术属性】
技术研发人员：陆雍涛，刘建光，
申请(专利权)人：西安龙腾景云生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：