一种降解氧四环素的酶及其编码基因和应用制造技术

本发明专利技术提供了一种降解氧四环素的酶及其编码基因和应用，属于生物工程技术领域。来源于保藏编号CGMCCNo.14393的克雷伯氏菌，其氨基酸序列为：SEQ ID No.2所示。本发明专利技术采用基因工程的方法将上述编码基因在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,发酵液离心后取菌种进行清洗，超声波破碎，采用Histrap1mL亲和柱进行纯化得到酶液；利用该酶液(200U)对氧四环素样品(初始浓度为20mmol/L)进行处理，其降解效率可达75.3％。该酶制剂具有成本低、周期短、操作简便等特点，有望应用到环境中四环素类抗生素的生物降解中。素的生物降解中。素的生物降解中。

【技术实现步骤摘要】
一种降解氧四环素的酶及其编码基因和应用


[0001]本专利技术属于生物工程
，具体涉及一种降解氧四环素的酶及其编码基因和应用。

技术介绍

[0002]四环素类抗生素可抑制肠道细菌繁殖，促进牲畜生长，是一类被广泛使用的饲料添加剂。然而，由于缺乏完善的监管，我国四环素类抗生素的滥用情况严重，2013年的使用量为12000吨。四环素类抗生素不能被动物完全吸收，部分会随粪便排出。如未经无害化处理直接施入农田，会导致残留的四环素在土壤中累积。随雨水进入河流系统，再通过食物链进入到人体，人类和动物体内持续的抗生素选择压力基因一旦被激活，耐药性的传播风险就会增加，从而对人类健康安全构成潜在危胁。因此，如何降解环境中的四环素类抗生素已经成为焦点问题。而微生物降解是成本最低且应用前景广阔的一种方法，其本质是酶制剂对四环素类抗生素的降解。本专利技术提供了一种微生物体内产生的可降解四环素类抗生素的酶制剂。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的在于针对上述现有技术存在的不足，提供一种降解氧四环素的酶及其编码基因和应用，该酶降解基因明确，安全本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种四环素类抗生素降解酶，其特征在于，来源于保藏编号CGMCC No.14393的克雷伯氏菌(Klebsiella sp.TR5)，其氨基酸序列为：SEQ ID No.2所示。2.编码权利要求1所述的四环素类抗生素降解酶的基因，其核苷酸序列为：SEQ ID No.1。3.一种表达权利要求1所述的四环素类抗生素降解酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：以从克雷伯氏菌菌液中提取其质粒DNA为模板，以SEQ ID No.3表示的引物1和SEQ ID No.4表示的引物2扩增目的基因；将目的基因连接入pET28(a+)表达载体后，转化至宿主细胞BL21(DE3)中，发酵重组宿主细胞，使目的基因获得...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱德伟，康贻军，印志峰，沈敏，夏丹，
申请(专利权)人：盐城师范学院，
类型：发明
国别省市：