【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】增强植物中基因表达的调节性核酸分子
[0001]专利技术描述
[0002]本专利技术属于植物分子生物学领域并且提供了用于产生高表达性启动子和产生核酸表达增强的植物的方法，其中增强核酸表达的核酸(NEENAs)与所述启动子功能性连接和/或引入植物中。
[0003]转基因或同源转基因(cisgene)在植物中的表达强烈地受多种外部及内部因素影响，从而导致水平变动和不可预测的转基因或同源转基因表达。经常必须产生并分析大量转化体，以鉴定出表达强度合乎需要的株系。由于转化并筛选表达强度合乎需要的株系是昂贵和耗费人力的，故需要植物中高表达一个或多个转基因或同源转基因。当必须在转基因植物或同源转基因植物中协调表达几个基因以实现特定效应时，鉴于必须鉴定其中每个基因均强烈表达的植物，这个问题尤其严重。
[0004]例如，取决于构建体设计和各个转化事件中T
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DNA插入基因座的位置效应，转基因或同源转基因的表达可以显著地变动。强启动子可以部分地克服这些难题。然而，显示强烈表达同时特异性合乎需要的合适启动子的可获得性经常有限。为了确保可获...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于增强源自植物启动子的表达的方法，所述植物启动子包含与启动子功能性连接的对所述启动子为异源的一种或多种增强核酸表达的核酸(NEENA)分子，所述方法包括i)具有SEQ ID NO:1或2的序列的核酸分子，或ii)具有与SEQ ID NO:1或2至少90％同一性的序列的核酸分子，所述核酸分子具有如具有SEQ ID NO:1或2的序列的相应核酸分子那样的增强表达活性，或iii)在严格条件下与具有SEQ ID NO:1或2的序列的核酸分子杂交的核酸分子，或iv)i)至iii)的核酸分子的30或更多个连续碱基的片段，所述片段具有如具有SEQ ID NO:1或2的序列的相应核酸分子那样的增强表达活性，或v)作为之前在i)至iv)下提到的核酸分子中任一者的互补物或反向互补物的核酸分子。2.用于产生植物或其部分的方法，所述植物或其部分与相应的对照植物或其部分相比，具有一个或多个核酸分子的增强表达，所述方法包括步骤a)向植物或其部分引入一种或多种包含如权利要求1i)至v)中所限定的NEENA分子和b)将所述一个或多个NEENA分子功能性连接至启动子并功能性连接至所述启动子控制下的核酸分子，其中NEENA分子对所述启动子为异源。3.根据权利要求1或2所述的方法，包括步骤a)向植物或其部分引入一种或多种包含如权利要求1i)至v)中所限定的NEENA分子，并且b)将所述一个或多个NEENA分子整合入所述植物或其部分的基因组中，其中所述一个或多个NEENA分子功能性连接至针对所述一个或多个NEENA分子为异源的内源启动子，并且任选地c)从所述转化的细胞再生出包含所述一个或多个NEENA分子的植物或其部分。4.根据权利要求3所述的方法，其中通过应用基因组编辑技术，将一个或多个NEENA分子整合入植物或其部分的基因组中。5.根据权利要求4所述的方法，其中基因组编辑技术包括使用核酸导引的核酸酶、TALEN、归巢核酸内切酶或锌指蛋白，在NEENA分子待整合入基因组的位置处引入单链断口或双链断口，和引入DNA修复模板，所述DNA修复模板包含NEENA分子并且在其3
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末端和5
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末端包含与单链断口或双链断口上游和下游基本上相同或互补的序列，促进在单链断口或双链断口的位置处重组。6.根据权利要求4所述的方法，其中基因组编辑技术包括在植物或其部分的基因组中引入点突变，因而在植物的基因组中引入NEENA的序列。7.根据权利要求1至4所述的方法，包括步骤a)提供包含一个或多个NEENA分子的表达构建体，所述NEENA分子包含如权利要求1i)至v)中限定的与相对于所述一个或多个NEENA分子为异源的启动子功能性连接的核酸分子，并且b)将包含所述一个或多个NEENA分子的所述表达构建体整合入所述植物或其部分的基因组，并且任选地
c)从所述转化的植物或其部分再生出包含所述一个或多个表达构建体的植物或其部分。8.根据权利要求1至7所述的方法，其中所述一个或多个NEENA分子与核酸分子的翻译起始位点上游或下游的启动子功能性连接，所述核酸分子的表达处在所述启动子控制下。9.根据权利要求1至8所述的方法，其中所述一个或多个NEENA分子...
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