一种基于核酸介导的酶级联用于肌氨酸的检测方法技术

本发明专利技术属于化学检测领域，涉及一种基于核酸介导的酶级联用于肌氨酸的检测方法及试剂盒。该方法包括：通过核酸调控肌氨酸氧化酶(SOX)和过氧化物氧化酶(HRP)之间的间距，以将酶级联反应限定在纳米级的特定区域；显色反应，并测定肌氨酸含量。该方法中核酸分子实现间距的精确调控和高特异性。该方法特异性强，效率高，显著提高检测的灵敏度和精确度，所需要的检测设备和场地苛刻度不高，成本低，具有重要的研究意义和应用价值。重要的研究意义和应用价值。重要的研究意义和应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种基于核酸介导的酶级联用于肌氨酸的检测方法


[0001]本专利技术属于化学检测领域，涉及一种基于核酸介导的酶级联用于肌氨酸的检测方法及试剂盒，更具体地，是一种测定前列腺癌特异性靶标肌氨酸的检测方法及试剂盒。

技术介绍

[0002]前列腺癌作为男性发病率第二大高的癌症，越来越受到人们的关注。而当前检测前列腺癌的技术主要是通过检测前列腺癌特异性抗原(PSA)，但是PSA检测存在灰度区间2ng/ml
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10ng/ml，当PSA含量处于此区间时，其检测准确度不高，这不利于前列腺癌的早期诊断。PSA检测灵敏度、精准度均有待提高。
[0003]2009年，Sreekumar等人提出肌氨酸与前列腺癌发展有非常密切的相关性，肌氨酸的含量与疾病的发展具有密切的相关性。传统的肌氨酸测定的方法包括：电化学方法(中国专利CN106596693A，专利技术名称：一种用于肌氨酸的电化学检测方法)；紫外光谱法：(中国专利CN110702670A，专利技术名称：一种基于金属有机框架材料的肌氨酸检测方法)；电泳法：(中国专利CN101718746A，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于核酸介导的酶级联反应的肌氨酸的检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤1：通过核酸调控肌氨酸氧化酶SOX和过氧化物氧化酶HRP之间的间距，以将酶级联反应限定在纳米级的特定区域；步骤2：显色反应，并测定肌氨酸含量。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1包括：向SOX酶溶液中加入交联剂，孵育，测定其SOX的浓度；加入第一核酸，孵育使所述第一核酸连接SOX酶分子，获得连接第一核酸的SOX酶分子；其中所述连接第一核酸的SOX酶中每个SOX酶分子连接至少1条第一核酸链；和向HRP酶溶液中加入交联剂，孵育，测定其HRP酶的浓度；加入第二核酸，孵育使所述第二核酸连接HRP酶分子，获得连接第二核酸的HRP酶分子；其中所述连接第二核酸的SOX酶中每个SOX酶分子连接至少1条第二核酸链。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述第一核酸和第二核酸是脱氧核糖核酸，且所述第一核酸的序列与所述第二核酸的序列是相同或不同的。4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述第一核酸、第二核酸和第三核酸是寡核苷酸，且所述第一核酸的序列与所述第二核酸的序列是相同或不同的。5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述第一核酸和第二核酸是脱氧核糖核酸，且所述第一核酸的序列与所述第二核酸的序列是相同或不同的。6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述第一核酸与所述SOX酶的摩尔比为至少5:1，且所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：左小磊，董柏君，樊春海，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属仁济医院，
类型：发明
国别省市：