一株葡萄根际拮抗促生链霉菌F2及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株葡萄根际拮抗促生链霉菌F2及其应用，其为卡伍尔链霉菌,保藏号为GDMCC No:61143，于2020年8月14日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址是广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，分类命名为Streptomyces sp.菌株F2的发酵液和无菌滤液对辣椒疫霉病菌等10植物病原菌有拮抗作用，抑菌率最高达80%以上，其中两者对辣椒疫霉病菌的抑制作用优良，抑制率分别为80.58%、87.71%。菌株F2发酵液对辣椒疫霉菌丝块的防治效果为61.09％。菌株F2发酵液对辣椒疫霉病具有明显的防治效果，最高防效达83.31%。F2具有解有机磷、固氮作用，能分泌胞外蛋白酶和产IAA。菌株F2发酵液灌根处理对辣椒生长具有显著的促进作用。链霉菌F2既具有广谱的拮抗植物病原菌作用，又具有促生作用。用。用。

【技术实现步骤摘要】
一株葡萄根际拮抗促生链霉菌F2及其应用


[0001]本专利技术涉及植物根际促生菌，具体地说，涉及一种促生链霉菌及其应用。

技术介绍

[0002]由土壤病原菌从作物根部或茎部侵害作物而引起的土传病害是农业植物病 原菌的重要种类，土传病害的防治是农业可持续发展的重要限制因子。土传病害 的危害程度跟土壤中病原菌的分泌物成分和浓度相关。因此，抑制根围系统病原 物的活动成为进行土传病害防治的基础。植物、土壤微生物和土壤病原物三者之 间相互关系的制约作用。有学者将根际生态系统抵御土壤病原菌入侵的现象和能 力定义为根际免疫。因此，具有溶磷、嗜铁、分泌植物激素、固氮、拮抗病原菌 等作用的根际拮抗促生菌为高效防控土传病害的有益菌群构建提供基本的材料 和方法。
[0003]链霉菌是最高等的革兰氏阳性放线菌，广泛存在于土壤、海洋等不同的自然 生态环境中，具有种类繁多、代谢功能各异等特点。链霉菌既可产生春雷霉素、 井冈霉素和武夷霉素等多种抗生素，几丁质酶、纤维素酶、β
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1,3
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葡聚糖酶等其 他具有防病作用的次生代谢物质，又具有分泌IAA、嗜铁素、溶磷、协助微生物 进行固氮作用等促进植物生长的作用。因此，链霉菌是根际生防促生菌的明星菌 种。依据链霉菌的生存环境不同，可以将链霉菌初步分为土壤链霉菌、海洋链霉 菌与植物内生链霉菌。近年来，从各种植物根际土壤，包括红豆杉、香蕉、甘蔗、 辣椒筛选到有拮抗促生作用的链霉菌。葡萄根际土壤拮抗促生链霉菌的筛选还未 有研究。此外，有研究表明，发病较为严重地块的健康植株根际土壤是优良生防 菌株的储备库。本研究从发病严重葡萄园试验基地选取健康植株的根际土壤分离 筛选一株链霉菌，对其进行分离鉴定和拮抗促生作用研究，为开发高效微生物菌 肥储备菌株和提供理论依据，助力生态农业的可持续发展。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，提供一种葡萄根际拮抗促生链霉 菌F2及其应用。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0006]本专利技术为获得拮抗作用优的植物根际促生菌，从葡萄根际土壤样品中分离获 得菌株F2。经形态特征、生理生化特征观察和16S rRNA序列分析，确定菌株F2 为为卡伍尔链霉菌(Streptomyces cavourensis)。菌株F2的发酵液和无菌滤液 对辣椒疫霉病菌等10植物病原菌有拮抗作用，抑菌率最高达80％以上，其中两者 对辣椒疫霉病菌的抑制作用优良，抑制率分别为80.58％、87.71％。辣椒疫霉病的 叶片防效结果表明，菌株F2发酵液对辣椒疫霉菌丝块的防治效果为61.09％。室 内盆栽试验结果表明，菌株F2发酵液对辣椒疫霉病具有明显的防治效果，最高防 效达83.31％。促生拮抗因子的测定结果表明，F2具有一定解有机磷、固氮作用， 能分泌胞外蛋白酶和产IAA。菌株F2发酵液灌根处理对辣椒生长具有显著的促进 作用。链霉菌F2既具有广谱的拮抗植物病原菌作用，又具有促生作用，在农药
化 肥减量化使用方面具备良好的应用前景。
[0007]一株葡萄根际拮抗促生链霉菌F2，其为卡伍尔链霉菌(Streptomyces cavourensis),于2020年8月14日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为 GDMCC No:61143。地址是广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，分类命名为 Streptomyces sp.
[0008]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0009]本专利技术从葡萄根际土壤样品中分离获得菌株卡伍尔链霉菌F2，其发酵液和 无菌滤液对辣椒疫霉病菌等10植物病原菌有拮抗作用，抑菌率最高达80％以上。 辣椒疫霉病的叶片防效结果表明，菌株F2发酵液对辣椒疫霉菌丝块的防治效果 为61.09％。室内盆栽试验结果表明，菌株F2发酵液对辣椒疫霉病具有明显的防 治效果，最高防效达83.31％。首次报道卡伍尔链霉菌具有促生作用。通过对卡 伍尔链霉菌F2促生因子的测定结果表明，F2具有一定的解有机磷作用；在阿须 贝培养基生长良好，固氮酶活性为173.4U/L；在酪蛋白培养基上，菌落周围产 生22
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24mm的透明圈；通过Salkowski法测定菌株F2产9.62mg/mLIAA。室内 盆栽辣椒促生作用测定结果菌株F2发酵液灌根处理对辣椒生长具有显著的促进 作用。菌株发酵液处理后，辣椒植株的根长、株高、鲜重分别为23.14cm、34.79 cm、18.11g/株，比对照增加46.74％、61.33％、59.76％。
附图说明
[0010]图1为菌株F2在高氏一号培养基上的形态学特征图；
[0011]其中A：菌落形态；B：显微形态(10
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100)；
[0012]图2为基于16S rDNA序列的F2系统发育进化树图；
[0013]图3为菌株F2的拮抗作用图；
[0014]A.花生褐斑病菌，B.甘蔗赤腐病菌，C.辣椒疫霉病菌，D.玉米小斑病菌，E.香蕉 枯萎病菌，F.水稻纹枯病菌，G.西瓜炭疽病菌，H.苹果轮纹病菌，I.冬瓜枯萎病 菌，J.水稻稻瘟病菌。每幅图培养皿1为空白平板对照，培养皿2为添加发酵液 平板，培养皿3为添加无菌滤液平板。
[0015]图4为链霉菌F2促生试验结果；
[0016]其中有机磷(A)、固氮(B)、分泌蛋白酶(C)；
[0017]图5为菌株F2发酵液对辣椒疫霉病的叶片防治效果图；
[0018]A：P.capsfci菌丝块，B：F2+P.capsici菌丝块；
[0019]图6为F2菌株发酵液对盆栽辣椒苗生长的影响。
具体实施方式
[0020]试验材料和方法
[0021]1.1试验材料
[0022]1.1.1土样
[0023]土壤样品采集，于2020年3月份东莞市农业科学研究中心葡萄白粉病发病 果园的发病果园中健康植株根际土壤，采用五点法取样后混合为1份，用无菌 袋密封带回实验室。
[0024]1.1.2培养基
[0025]高氏一号培养基、放线菌液体培养基、有机磷细菌培养基(含琼脂)、硅酸 盐培养
基、酪蛋白琼脂培养基、阿须贝无氮培养基、CAS检测培养基：青岛高科 技公园海博生物技术有限公司；营养肉汤：北京陆桥技术股份有限公司；马铃薯 琼脂培养基：广东环凯微生物科技有限公司。
[0026]1.1.3供试病原菌
[0027]由华南农业大学植物病理系提供。由华南农业大学植物病理系提供。1、花 生褐斑病菌(Cercospora arachidicola Hori)；2、辣椒疫霉病菌(Phytophthoracapsici)；3、冬瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum(schl.)f.sp.benincasae)；4、水 稻稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)；5、水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)；6、 西瓜炭疽病菌(Collet本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株葡萄根际拮抗促生链霉菌F2，其为卡伍尔链霉菌，于2020年8月14日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址是广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，分类命名为Str...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡珊，梁卫驱，黄皓，徐匆，罗华建，胡楚维，莫坚强，黄晓彦，陈仕丽，
申请(专利权)人：东莞市农业科学研究中心，
类型：发明
国别省市：