一种侏儒综合征动物模型的构建方法技术

本发明专利技术公开了一种侏儒综合征动物模型的构建方法。本发明专利技术利用“All

【技术实现步骤摘要】
一种侏儒综合征动物模型的构建方法


[0001]本专利技术涉及遗传工程
，特别涉及一种侏儒综合征动物模型的构建方法。

技术介绍

[0002]生长激素受体基因(Growth hormone receptor,GHR)是细胞接受生长激素的细胞膜受体，生长激素通过与GHR结合来触发细胞内信号，发挥刺激细胞生长和分裂的生物学效应。人类GHR功能缺失性突变将引发Laron综合征(Laron syndrome)，猪GHR功能缺失性突变将引发类似Laron综合征的身材矮小和发育迟缓等表型，因此GHR基因敲除猪是模拟人类Laron综合征的理想大动物模型。
[0003]猪的传统遗传改良受育种周期长和遗传资源局限等因素的限制，凸显出基因修饰技术在猪遗传改良中的巨大潜力。通过基因修饰技术能够只经一个世代就可使猪的某项可遗传生产性状得到显著提升。利用基因修饰技术，国内外科技工作者们先后培育出多种具有优良生产性状的基因修饰猪，使得猪的饲料利用率、瘦肉率、抗病力以及脂肪酸健康品质等得到显著改善。除了在农业生产领域具有巨大应用潜力之外，基因修饰猪作为一种理想的动本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种侏儒综合征动物模型的构建方法，其特征在于，以猪GHR基因6号外显子为跳跃目标，通过腺嘌呤碱基编辑器介导的外显子跳跃实现猪GHR基因敲除，从而构建侏儒综合征动物模型。2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：1)根据猪GHR基因6号外显子剪接受体或剪接供体合成sgRNA引物对并形成引物二聚体；2)用限制性内切酶将PX
‑
ABEmaxAW质粒线性化，与所述引物二聚体混合后用DNA连接酶于反应，得到连接产物；3)将所述连接产物转染猪成纤维细胞，获得基因敲除细胞；4)将所述基因敲除细胞的单细胞通过体细胞核移植技术克隆得到所述侏儒综合征动物模型。3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，根据猪GHR基因6号外显子剪接受体合成的sgRNA引物对为上游引物sgRNA1
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F和下游引物sgRNA1
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R，根据猪GHR基因6号外显子剪接供体合成的sgRNA引物对为上游引物sgRNA2
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F和下游引物sgRNA2
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R；所述sgRNA1
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F如SEQ ID NO.5所示，所述sgRNA1
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R如SEQ ID NO.6所示；所述sgRNA2
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F如SEQ ID NO.7所示，所述sgRNA2
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R如SE...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱向星，唐冬生，严爱芬，冯娟，刘连，张晓莉，盘家圣，林子盛，文健聪，
申请(专利权)人：佛山科学技术学院，
类型：发明
国别省市：