自动分析装置的预处理方法制造方法及图纸

本发明专利技术所实现的自动分析装置的预处理方法能使用能够结合多个测定对象物质的多个磁珠，通过一系列处理对多个测定对象物质进行预处理。在自动分析装置的预处理方法中，将磁珠(801)添加到含有测定对象物质的样品中，将测定对象物质与磁珠(801)结合，从样品中提取磁珠(801)，并通过洗脱液从磁珠(801)中分离出所述测定对象物质。将与多种测定对象物质结合的多个磁珠添加到样品中，并且通过洗脱液将多种测定对象物质与磁珠(801)分离。测定对象物质与磁珠(801)分离。测定对象物质与磁珠(801)分离。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】自动分析装置的预处理方法


[0001]本专利技术涉及对样品进行分析的自动分析装置的预处理方法。

技术介绍

[0002]自动分析装置通过对检查步骤的一部分进行自动化，对快速高效的临床检查业务做出了贡献。一般自动分析装置具有用于将规定量的样品、试剂等溶液分注到反应容器中的分注机构和用于搅拌反应容器内的样品、试剂等的搅拌机构。其中，免疫系统通过在磁珠表面结合了官能团的载体来保持测定对象物质，使用作为免疫测定法之一的电化学发光免疫测定法(ECLIA)，能够进行高精度、高灵敏度和宽范围的检查。
[0003]液相色谱质量分析装置(HPLC/MS)是液相色谱仪和质谱仪相结合的装置。
[0004]通过液相色谱仪(HPLC)对利用测定对象物质的化学结构和物理性质所进行的分离与质谱仪(MS)对利用测定对象物质的质量所进行的分离相结合，能对样品中的各组分进行定性/定量。根据这一优点，例如，即使如生物样品中的医药品那样在体内代谢的多数类似物质混合存在的情况下，也可以对测定对象物质进行定性/定量，可期待应用于临床检查领域。
[0005]在检查中心、大学医院等，使用HPLC/MS，进行免疫抑制剂、抗癌剂、新生儿代谢异常检查以及TDM(Therapeutic Drug Monitoring：热诊断监测)等检查。
[0006]预处理通过检查试剂盒、用手法来进行，用于HPLC/MS试验。各检查方法的验证(确认)在各检查机构的责任下实施，保证检查结果。
[0007]由于预处理过程复杂，检查技师的熟练程度会导致检验结果产生偏差。另外，在预处理、HPLC/MS的测定中，有可能出现人为错误导致的检查结果的缺陷。
[0008]因此，从预处理到HPLC/MS，要求能够全自动处理批量步骤的自动分析装置扩展到临床检查领域。
[0009]作为这样的自动分析装置之一，在专利文献1中公开了能够全自动地进行从预处理到HPLC/MS的批量步骤的自动分析装置。
[0010]一般的免疫系统的预处理步骤是在测定对象物质与磁珠的官能团结合的状态下，将液体送到送液流路，在流路内聚磁，通过电化学发光进行测量的方法。作为免疫系统中使用的方法之一的ECLIA是使用与抗体结合的磁珠与抗原反应后，使用钌吡啶络合物标记的抗体与抗原进行2次反应，通过电化学反应测定钌吡啶络合物的发光强度的方法，使用与1个测定对象物质的抗体结合的一种磁珠。
[0011]另一方面，作为使用多个磁珠的方法，有荧光免疫染色法、DNA微阵列分析、免疫原位杂交等。荧光免疫染色法是使在表面上结合有接合了荧光色素的1次抗体的磁珠与测定对象物质结合，并使标记后的2次抗体与1次抗体结合，从而增强荧光信号的方法。
[0012]DNA微阵列分析是在进行了多个荧光标记后的核酸模板即cDNA、rDNA上结合微珠，使之与目标DNA反应，用扫描仪观察显色情况的方法。
[0013]免疫原位杂交是在不提取DNA、RNA的情况下，以原位方式结合核酸模板，观察显色
情况的方法。
[0014]显色方法使用含有Cy3或Cy5那样的有机染色、量子点那样的无机标记那样的染料的溶液。即使在使用一种磁珠的方法中，当多克隆抗体而不是具有高特异性的单克隆抗体结合在磁珠的表面上时，也能通过一种磁珠结合多个测定对象物质。
[0015]专利文献2中公开了一种在微反应器内包括地实施上述方法的专利技术。
[0016]作为HPLC/MS的一般预处理，使用固相提取，在填充剂与测定对象物质结合后，使用多种洗脱液，进行多段提取。例如，在进行封入了C18的填充剂的固相提取的情况下，存在通过使用具有不同有机溶剂浓度的多种洗脱液来分离测定对象物质和杂质的技术。现有技术文献专利文献
[0017]专利文献1：美国专利第9236236号公报专利文献2：日本专利特开2018
‑
46848号公报

技术实现思路

专利技术所要解决的技术问题
[0018]在使用了磁珠的自动分析装置的预处理方法中，希望提高吞吐量、减少样品量、提高检测精度。
[0019]在专利文献1中公开的自动分析装置的预处理方法中，采用了使用液/液提取或固相提取的预处理方法，但是关于使用了磁珠的预处理方法没有任何记载，并且难以提高使用磁珠的预处理的检测精度等。
[0020]如磁珠免疫系统那样，在使用了HPLC/MS作为检测器的自动分析装置的预处理步骤中使用磁珠的预处理方法中，将测定对象物质结合到磁珠的官能团上，清洗后在聚磁状态下添加洗脱溶液，将仅洗脱测定对象物质的溶液用于HPLC/MS试验。
[0021]另外，为了提高MS的定量精度，还需要添加测定对象物质的稳定同位素物质。
[0022]使用了磁珠的预处理方法由于步骤数比一般的免疫系统多，处理时间比一般的免疫系统长，需要提高吞吐量。
[0023]在专利文献2中公开的使用与抗体和荧光标记物结合的磁珠的各种方法中，测定荧光标记物的显色。因此，最终不需要从测定对象物质中解离磁珠。
[0024]另一方面，在能够全自动地进行从本专利技术作为对象的预处理到HPLC/MS的批量步骤的本自动分析装置中，为了通过HPLC/MS进行分离/检测，需要在预处理步骤中从测定对象物质中解离磁珠的洗脱过程。
[0025]此外，专利文献2没有公开当使用多个磁珠时，为了提高吞吐量而不降低检测精度所需的洗脱步骤的方法和定时。
[0026]在固相提取的情况下，不需要使用磁珠作为填充剂，没有搅拌、聚磁的步骤，这与本专利技术作为对象的预处理步骤不同。
[0027]本专利技术的目的是实现一种自动分析装置的预处理方法，该自动分析装置的预处理方法通过将测定对象物质与磁珠结合来进行处理，并且从预处理到液相色谱质量分析装置全自动地进行批量步骤，通过使用能够结合多个测定对象物质的多个磁珠，从而能在一系列处理中对多个测定对象物质进行预处理。
用于解决技术问题的技术手段
[0028]为了达到上述目的，本专利技术构成如下。
[0029]一种自动分析装置的预处理方法，将磁珠添加到含有测定对象物质的样品中，使所述测定对象物质与所述磁珠结合，从所述样品中提取出所述磁珠，并通过洗脱液从所述磁珠中分离出所述测定对象物质，在所述样品中添加与多种测定对象物质结合的多个磁珠，通过所述洗脱液从所述磁珠中分离出多种所述测定对象物质。专利技术效果
[0030]根据本专利技术，能实现一种自动分析装置的预处理方法，该自动分析装置的预处理方法将测定对象物质与磁珠结合来进行处理，并且从预处理到液相色谱质量分析装置全自动地进行批量步骤，该自动分析装置的预处理方法使用能够结合多个测定对象物质的多个磁珠，从而能在一系列处理中对多个测定对象物质进行预处理。
附图说明
[0031]图1是本专利技术的执行预处理方法的自动分析装置的示意图。图2是HPLC部的简要结构图。图3A是HPLC部的注射阀的动作说明图。图3B是HPLC部的注射阀的动作说明图。图4A是HPLC部的注射阀的动作说明本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种自动分析装置的预处理方法，将磁珠添加到含有测定对象物质的样品中，使所述测定对象物质与所述磁珠结合，从所述样品中提取出所述磁珠，并通过洗脱液从所述磁珠中分离出所述测定对象物质，其特征在于，向所述样品中添加与多种测定对象物质结合的多个磁珠，通过所述洗脱液从所述磁珠中分离出多种所述测定对象物质。2.如权利要求1所述的自动分析装置的预处理方法，其特征在于，多个所述磁珠是与多种所述测定对象物质中的任一种测定对象物质结合的多种磁珠。3.如权利要求2所述的自动分析装置的预处理方法，其特征在于，通过与所述磁珠的种类相对应的洗脱液从所述磁珠中分离出任意种类的所述测定对象物质。4.如权利要求1所述的自动分析装置的预处理方法，其特征在于，多个所述磁珠分别是与多种所述测定对象物质中的任一种结合的磁珠。5.如权利要求2所述的自动分析装置的预处理方法，其特征在于，多种所述磁珠具有第一磁珠和第二磁珠，所述第一磁珠是在表面上修饰有抗体作为官能团的磁珠，所述第二磁珠是在表面上修饰有反相模式官能团的磁珠。6.如权利要求5所述的自动分析装置的预处理方法，其特征在于，所述第一磁珠在第二磁珠之前与测定对象物质发生反应。7.如权利要求2所述的自动分析装置的预处理方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：野上真，松冈晋弥，海老原大介，桥本雄一郎，
申请(专利权)人：株式会社日立高新技术，
类型：发明
国别省市：