【技术实现步骤摘要】
一种基于深度学习的hRPE细胞微管自动检测方法
[0001]本专利技术涉及一种细胞检测方法,具体涉及一种基于深度学习的hRPE细胞微管自动检测方法。
技术介绍
[0002]随着单细胞分析技术和超分辨成像技术的发展,生物领域的研究已经进入细胞层面,通过研究细胞组分数量及其空间分布、动态变化和相互作用,对细胞类型进行区分,对细胞行为进行解释。微管网络是真核细胞中蛋白质纤维网络结构,对于维持细胞形状、细胞内运动、细胞内的物质传输等方面有着重要作用。通过观察细胞微管结构,能够快速了解细胞状态,同时也能够以细胞微管作为参考坐标系,观察细胞各组分的空间分布。
[0003]现有hRPE细胞微管研究方法主要是通过荧光染液进行细胞染色,由人工通过移动载物台,肉眼观察每个样品孔中的所有细胞,寻找理想细胞进行拍摄,留存图像进行进一步的分析。由于显微镜视野优先,细胞在样品孔中分布不定,研究人员很难快速找到理想细胞进行拍摄,而荧光染液持续时间有限,单次实验往往只能进行几组细胞微管图像的拍摄。整个过程需要耗费大量时间与精力。为了降低科研人员的负 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种基于深度学习的hRPE细胞微管自动检测方法,其特征在于,包括以下步骤:S1,图像预拍摄:对样品孔中的细胞进行扫描拍摄,记录获取单张细胞微管图像的位置信息,将单张细胞微管图像进行拼接处理,获取多视野拼接图像,作为深度学习网络的输入图像;S2,深度学习网络进行细胞检测:通过深度学习模型,根据标注信息,自动提取特征,对输入检测图像进行细胞微管检测,获取细胞微管的位置信息、轮廓信息、类别信息;S3,细胞微管拍摄路径规划:将所述细胞微管的位置信息、轮廓信息、类别信息作为输入信息,进行拍摄路径规划,控制显微镜移动到固定位置,完成拍摄。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤S1,所述图像拼接处理具体包括以下步骤:S11,设置图像拼接的视野数量和重叠量;S12,根据视野数量和重叠量规划扫描拍摄路径,拍摄hRPE细胞微管图像,记录所述图像的中心位置信息,其中,所述图像原点的坐标为设拍摄启动视野中心坐标为(x1,y1),单视野范围大小为d
×
d,重叠量为overlap,则每一个视野的中心(x
n1
,y
n2
)的位置为:)的位置为:(n1=1,2,3,...,n,n2=1,2,3,...,n)根据所述图像的位置信息进行排列和粗配准;S13,采取最小二乘法计算相邻图像重叠区域的灰度值的差异,通过选取灰度值差异最小的重叠区域进行精配准,得到拼接图像。3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤S2,具体包括以下步骤:S21,建立训练数据集,将步骤S1所述的输入图像下采样;S22,对数据集进行手动标注,将hRPE细胞分为三种类型:Unit细胞,即细胞伸展,具有很好观察价值的细胞;Part细胞,即只有部分具有观察价值的细胞;Bad细胞,不具有观察价值的细胞;S23,将标注完成的数据集分为训练集、验证集、测试集;S24,对训练集和验证集中的图像进行数据增强操作;S25,构建Mask
‑
RCNN卷积神经网络模型;S26,模型训练,导入训练集、验证集,通过深度卷积神经网络从数据集自动获取图像特征信息,采用验证集来调整模型训练的超参数;S27,将测试图像输入到深度学习网络中进行预测,得到细胞微管位置信息、轮廓信息、类别信息。4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述步骤S25,所述构建Mask
‑
RCNN卷积神经网络模型,具体为:构建骨干网络,通过多层的卷积、池化操作进行图像特征提取,生成特征图,供后续网络使用;特征金字塔网络,针对小尺寸目标检测,通过FPN特征金字塔网络对底层到高层的特征
图进行特征融合,生成包含有不同尺寸的特征图集,针对尺寸不同的对象,采用不同特征图进行特征提取;区域推荐网络,将特征金字塔网络提取的多层特征图输入到RPN区域推荐网络中;通过对锚的尺寸和形状的设置,生成候选框;同时对前景框和背景框采用非极大值抑制,当任意框重叠超过设定值,只保留其中经过Softmax处理后类置信度最高的框;其中Softmax函数为:其中a
j
表示类别j经过网络前向传播计算出来的得分;a
k
表示类别k经网络前向传播计算出来的得分,k取值1~T,表示包含所有类别;S
j
表示类别j经过Softmax函数后换算得到的概率;RoIAlign目标区域对齐算法,经过RPN网络后,获取了不同大小、形状的候选框,RoIAlign算法通过双线性插值在像素点之间进行插值,对插值后的图像进行最大池化操作,得到最终的固定尺寸的特征图;获取特征图后,对特征图进行处理,通过分类网络获取检测目标的类别信息和边界框信息,通过轮廓预测网络获取检测目标的轮廓信息;分类网络通过两层1*1*1024的卷积层,经过全连接层和Softmax处理得到类别概率矩阵,采取非极大值抑制操作,获取预测概率最高的类别作为预测类别;预测边界框操作一致,全连接层进行替换,改为对边界框的长宽和位置四个参数(w,h,x,y)进行预测;轮廓预测网络通过FCN全卷积网络,对每一个候选框...
【专利技术属性】
技术研发人员:肖文磊,吴少宇,孙育杰,蒿慧文,
申请(专利权)人:北京航空航天大学,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。