分离缺少能够结合至蛋白A的Fc区域的抗体或抗体片段的方法技术

本发明专利技术公开分离抗体或抗体片段的方法，其包含以下步骤：a）提供包含具有VH3区域且缺少能够结合至蛋白A的Fc区域的抗体或抗体片段的进料；b）将进料与具有共价偶联配体的分离树脂接触，其中配体包含如SEQ ID NO 1所定义的多肽且其中抗体或抗体片段结合至分离树脂；c）可选地用清洗液清洗分离树脂；d）用洗脱液从分离树脂中洗脱该抗体或抗体片段并回收该抗体或抗体片段。抗体片段。抗体片段。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】分离缺少能够结合至蛋白A的Fc区域的抗体或抗体片段的方法
[0001]专利技术的
本专利技术涉及免疫球蛋白的分离，以及更具体地涉及用于分离具有VH3区域且缺少能够结合至蛋白A的Fc区域的抗体或抗体片段的方法。
[0002]专利技术背景蛋白A亲和色谱广泛地使用于免疫球蛋白（如治疗抗体）的分离。蛋白A配体选择性结合至免疫球蛋白的Fc区域并且因此允许高效的捕获步骤。对于缺乏Fc区域的抗体构建体（如抗体片段）或对于具有不结合至蛋白A的Fc区域变体的免疫球蛋白（如IgG3或IgM），天然的蛋白A仍可为有用的，因为它也结合至免疫球蛋白的VH3区域。然而，天然的蛋白A在生物工艺中使用的碱清洁条件下并不稳定，且碱稳定的蛋白A变体通常具有抑制VH3相互作用的突变，例如参见US20060194950，在此通过引用以其整体并入。此文献讨论了商业产品MabSelect
TM SuRe中使用的蛋白A Fc结合B结构域中的G29A突变对VH3相互作用的抑制。能够结合缺乏Fc区域的抗体/片段的替代的配体包括蛋白L、蛋白G和骆驼科动物抗体。然而它们都对碱清洁条件高度敏感。
[00本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.分离抗体或抗体片段的方法，其包含以下步骤：a）提供包含具有VH3区域且缺少能够结合至蛋白A的Fc区域的抗体或抗体片段的进料；b）将所述进料与具有共价偶联至载体的配体的分离树脂接触，其中所述配体包含如SEQ ID NO 1所定义的多肽AQX1AFYEILX2LPNLTEEQRX3AFIQSLKDDPSVSKAILAEAKKLNX4AQ SEQ ID NO 1其中：X
1 = E、K、Y、T、F、L、W、I、M、V、A、H或R，X
2 = H或K，X
3 = N或A，以及X
4 = D、F、Y、W、K或R并且其中所述抗体或抗体片段结合至所述分离树脂；c）可选地用清洗液清洗所述分离树脂；以及d）用洗脱液从所述分离树脂中洗脱所述抗体或抗体片段并且回收所述抗体或抗体片段。2.权利要求1的方法，其中X
1 = E。3.权利要求1或2的方法，其中X
2 = K。4.任意前述权利要求的方法，其中 X
3 = N。5.任意前述权利要求的方法，其中 X
4 = D。6.任意前述权利要求的方法，其中所述配体包含通过包含0
‑
15个氨基酸残基的接头区域连结的所述多肽的多聚体。7.权利要求6的方法，其中所述多聚体为四聚体、五聚体或六聚体。8.权利要求6或7的方法，其中所述多聚体通过来源于所述多聚体上的C...

【专利技术属性】
技术研发人员：G，
申请(专利权)人：思拓凡生物工艺研发有限公司，
类型：发明
国别省市：