一种病理组织切片染色试剂盒制造技术

一种病理组织切片染色试剂盒，属于病理学组织切片染色领域，包括切片脱蜡液、转换液、清洗液、分化液、返蓝液、苏木精染色液、伊红染色液和封片剂；本发明专利技术提供了一种成分简单、效果良好、毒性低、新型的病理组织切片染色试剂盒及制备方法，主要用于病理组织H&E染色。本发明专利技术的特征在于1、减少二甲苯、酒精等传统染色试剂对操作者的危害；2、减少对环境的污染；3、染色过程不需要额外去离子水引入；4、分化液和返蓝液采用缓冲体系设计，作用更温和，H&E染色的着色效果更清晰、鲜明；5、与传统苏木素配方相比，本试剂盒引入β

【技术实现步骤摘要】
一种病理组织切片染色试剂盒


[0001]本专利技术属于病理学组织切片染色领域，具体地说是一种病理组织切片染色试剂盒。

技术介绍

[0002]在诸如组织病理学和微生物学的生命学科中，通常使用显微镜(例如光学显微镜)检验样本，这种方法需要将样本安置在载玻片上，经过染色后，使用玻璃盖玻片加以粘合剂进行封片。在病理学检查中通常使用苏木精伊红染色方法(H&E)对组织样本进行着色。H&E染色是将组织切片经过脱蜡、水化、苏木精染色、水洗、分化、水洗、返蓝、水洗、伊红染色、脱水、透明和封片等复杂繁琐的步骤，使组织细胞中的不同成分染成不同深浅的颜色，增强不同成分间的对比度，从而便于病理医生在光学显微镜下进行观察和研究。
[0003]在常规H&E染色过程中，使用二甲苯进行脱蜡和后续的透明封固处理，对操作者伤害很大；水化和脱水过程使用梯度酒精等易挥发、易燃化学品；分化液通常使用盐酸酒精分化，盐酸的使用一方面增加了分化的控制难度，另一方面对于前处理欠佳的组织切片极易在分化过程中发生掉片而影响诊断和造成交叉污染；返蓝液常使用氨水溶液，氨水原液因储存和厂家不同，浓度略有差异，这造成配制的返蓝液浓度差异问题，易引起批间差；在苏木精染色液配制过程中，为加速苏木精向苏木因转化，往往使用化学氧化剂，如氧化汞、双氧水和碘酸钠，但化学氧化剂的使用通常会产生无效的反应产物如氧化苏木因和复合的聚合物沉淀，这种方法配制的苏木素染色液比自然成熟的埃里希苏木精(Ehrlich
’
s hematoxylin)失效的更快，而造成染液有效期短，着色效果差，细胞核上色不鲜明。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种病理切片染色试剂盒，用以解决现有技术中的缺陷，保证均一的H&E染色效果。
[0005]本专利技术通过以下技术方案予以实现：
[0006]一种病理组织切片染色试剂盒，包括切片脱蜡液、转换液、清洗液、分化液、返蓝液、苏木精染色液、伊红染色液和封片剂；
[0007]所述的切片脱蜡液包括以下质量体积份数(即固体以重量计算，液体以体积计算，二者换算比为g/ml)的组分：溶剂油70
‑
90份、中长链烷烃10
‑
30份；
[0008]所述的转换液包括以下质量体积份数的组分：二丙二醇甲醚50份和丙二醇甲醚醋酸酯50份；
[0009]所述的清洗液包括以下质量体积份数的组分：去离子水70份、表面活性剂0.01
‑
0.02份和乙二醇30份；
[0010]所述的分化液包括以下质量体积份数的组分：去离子水70份、乙二醇30份、冰醋酸0.3
‑
0.5份和乙酸钠0.05份；
[0011]所述的返蓝液包括以下质量体积份数的组分：去离子水70份、乙二醇30份、三羟甲
基氨基甲烷1.21份和浓度为0.1mol/L盐酸2.8份；
[0012]所述的苏木精染色液包括以下质量体积份数的组分：去离子水75份、乙二醇25份、苏木素0.6份、碘酸钠0.06份、硫酸铝2.67份、二丁基羟基甲苯0.2份、环糊精0.1份和冰醋酸4份；
[0013]所述的伊红染色液包括一下质量份数的组分：去离子水50份、乙二醇50份、水溶性伊红0.1份、冰醋酸0.9份和乙酸钠0.3份；其中伊红染色液的pH值为4.5；
[0014]所述的封片剂为柠檬油精封片剂或环保封片剂其中的任意一种。
[0015]如上所述的一种病理组织切片染色试剂盒，所述的切片脱蜡液中，溶剂油为脱芳烃溶剂油D60，所述的中长链烷烃为正十二烷。
[0016]如上所述的一种病理组织切片染色试剂盒，所述的清洗液中表面活性剂包括如下重量百分比的物质：Triton X
‑
100 20％、Tween 20 40％、和壬基酚聚氧乙烯醚NP
‑
9 40％。
[0017]如上所述的一种病理组织切片染色试剂盒，所述的分化液的pH值为3.1。
[0018]如上所述的一种病理组织切片染色试剂盒，所述的返蓝液的pH值为8.5。
[0019]如上所述的一种病理组织切片染色试剂盒，所述的苏木素染色液的pH值为2.2。
[0020]如上所述的一种病理组织切片染色试剂盒，所述的环糊精为β
‑
环糊精，所述的硫酸铝为十八水合硫酸铝。
[0021]如上所述的一种病理组织切片染色试剂盒，所述的伊红染色液的pH值为4.5。
[0022]如上所述的一种病理组织切片染色试剂盒，制备苏木素染色液：将苏木素、硫酸铝、碘酸钠加入至50份去离子水中，加热至沸腾，搅拌均匀，加入乙二醇，搅拌均匀，自然冷却避光保存1h，即溶液A；将二丁羟基甲苯和环糊精加入至剩余25份去离子水中，加热并搅拌至环糊精完全溶解，即溶液B；将溶液B加入至溶液A中，加入冰醋酸，混合均匀，即得到苏木素染色液
[0023]如上所述的一种病理组织切片染色试剂盒，包括如下步骤：
[0024]步骤a：按照配比称取制备切片脱蜡液、转换液、清洗液、分化液、返蓝液、苏木精染色液、伊红染色液所需原料；
[0025]步骤b：将步骤a中称取的各组分倒入对应的混合容器中，室温下搅拌20
‑
30min，以使配制的各溶液混合均匀，然后将配置好的切片脱蜡液、转换液、清洗液、分化液、返蓝液、苏木精染色液、伊红染色液和封片剂试剂盒中。
[0026]如上所述的一种病理组织切片染色试剂盒，
[0027]本专利技术的优点是：本专利技术提供了一种成分简单、效果良好、毒性低、新型的病理组织切片染色试剂盒及制备方法，主要用于病理组织H&E染色。本专利技术的特征在于1、减少二甲苯、酒精等传统染色试剂对操作者的危害；2、减少对环境的污染；3、染色过程不需要额外去离子水引入；4、分化液和返蓝液采用缓冲体系设计，作用更温和，H&E染色的着色效果更清晰、鲜明；5、与传统苏木素配方相比，本试剂盒引入β
‑
环糊精以中和碘酸钠还原后产物碘，增加了染液的染色能力，同时引入还原剂二丁羟基甲苯，增加染液的使用寿命和保质期。
附图说明
[0028]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发
明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0029]图1本专利技术的实施例1与传统H&E染色比较例对比图像作为对比例对人肛周样本进行染色后的200X视野的显微图像，其中图(1a)为实施例1的显微图像，图(1b)为比较例的显微图像；
[0030]图2本专利技术的实施例1与传统H&E染色比较例对比图像作为对比例对人子宫样本进行染色后的400X视野的显微图像，其本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种病理组织切片染色试剂盒，其特征在于：包括切片脱蜡液、转换液、清洗液、分化液、返蓝液、苏木精染色液、伊红染色液和封片剂；所述的切片脱蜡液包括以下质量体积份数的组分：溶剂油70
‑
90份、中长链烷烃10
‑
30份；所述的转换液包括以下质量体积份数的组分：二丙二醇甲醚50份和丙二醇甲醚醋酸酯50份；所述的清洗液包括以下质量体积份数的组分：去离子水70份、表面活性剂0.01
‑
0.02份和乙二醇30份；所述的分化液包括以下质量体积份数的组分：去离子水70份、乙二醇30份、冰醋酸0.3
‑
0.5份和乙酸钠0.05份；所述的返蓝液包括以下质量体积份数的组分：去离子水70份、乙二醇30份、三羟甲基氨基甲烷1.21份和浓度为0.1mol/L盐酸2.8份；所述的苏木精染色液包括以下质量体积份数的组分：去离子水75份、乙二醇25份、苏木素0.6份、碘酸钠0.06份、硫酸铝2.67份、二丁基羟基甲苯0.2份、环糊精0.1份和冰醋酸4份；所述的伊红染色液包括一下质量份数的组分：去离子水50份、乙二醇50份、水溶性伊红0.1份、冰醋酸0.9份和乙酸钠0.3份；其中伊红染色液的pH值为4.5；所述的封片剂为柠檬油精封片剂或环保封片剂其中的任意一种。2.根据权利要求1所述的一种病理组织切片染色试剂盒，其特征在于：所述的切片脱蜡液中，溶剂油为脱芳烃溶剂油D60，所述的中长链烷烃为正十二烷。3.根据权利要求1所述的一种病理组织切片染色试剂盒，其特征在于：所述的清洗液中表面活性剂包括如下重量百分比的物质：Triton X
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【专利技术属性】
技术研发人员：郭玉川，孙玉芬，吴业冰，王亮，夏国建，孙丽莹，王文杰，
申请(专利权)人：山东骏腾医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：