土茯苓总黄酮的新用途制造技术

本发明专利技术属于医药领域，涉及黄酮类化合物及其应用，具体的为土茯苓总黄酮的新用途。本申请发明专利技术人通过大孔树脂技术从土茯苓提取物中分离纯化得到土茯苓总黄酮(SGF)，对其研究发现，SGF对离体血管具有β肾上腺素受体(β

【技术实现步骤摘要】
土茯苓总黄酮的新用途


[0001]本专利技术属于医药领域，涉及黄酮类化合物及其应用，具体的为土茯苓总黄酮的新用途。

技术介绍

[0002]β
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AR是介导儿茶酚胺作用的一类组织受体，属于G蛋白偶联受体(GPCRs)家族成员。目前发现并克隆了3种亚型：β1、β2、β3。，其中β1和β2
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AR主要在心肌细胞表面表达，它们在人类心脏中所占比例分别为70％～80％及20％～30％，而β3
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AR主要存在于脂肪组织中，在心肌组织中表达比较少。β
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AR均可被交感神经系统或儿茶酚胺类物质激活。研究发现，持续地激活β
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AR，能通过诱导G蛋白偶联状态的改变、激活ERK信号通路、刺激局部肾素
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血管紧张素系统(RAAS)、引起细胞内钙超载、氧化应激等机制参与心肌肥大(cardiac hypertrophy，CH)的发生发展。而心肌肥大作为众多心血管疾病共同的病理基础，有效抑制心肌肥大可大大降低心血管疾病的死亡率。目前临床上用于治疗心力衰竭的β
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AR阻滞剂有选择性和非选择性两大类，主要通过阻断心脏β
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AR、拮抗过量儿茶酚胺对心脏的毒性作用，避免心肌细胞坏死、改善重构，抑制RAAS，防止高浓度AngII对心脏的损害，上调心肌β
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AR的数量，改善其对儿茶酚胺的敏感性等机制发挥作用。但是已有的β
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AR抑制剂未能显著降低死亡率，并且这些药物逆转心肌肥大的效果欠佳，且副作用多。这也促使人们寻求新的有效β
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AR抑制剂。
[0003]土茯苓是百合科植物光叶菝葜(Smilax glabra Roxb)的干燥根茎，为一常用中药。临床上有大剂量土茯苓治疗心悸的经验，并且认为土茯苓有较强的宁心定悸、安神通络之作用，现代药理也证实土茯苓具有抗动脉粥样硬化、抗血栓和抗心肌缺血的作用。我们前期研究发现土茯苓粗提物能显著降低肾性高血压大鼠血清心房钠尿肽(atrial natriuretic peptid,ANP)水平。随后我们采用大孔树脂技术从土茯苓提取物中分离纯化得到土茯苓总黄酮(Smilax glabra flavonoids,SGF)。已有研究表明，SGF在抗炎、抗氧化、治疗痛风及调节脂质代谢等方面有显著活性。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供土茯苓总黄酮(SGF)的新用途。
[0005]土茯苓总黄酮用于制备β肾上腺素受体抑制剂的应用。
[0006]土茯苓总黄酮用于制备治疗心肌肥大药物的应用。
[0007]土茯苓总黄酮用于抵抗异丙肾上腺素(ISO)诱导的心肌细胞肥大的应用。
[0008]本申请专利技术人通过大孔树脂技术从土茯苓提取物中分离纯化得到土茯苓总黄酮(SGF)，对其研究发现，SGF对离体血管具有β肾上腺素受体(β
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AR)阻滞样作用，并且能抵抗异丙肾上腺素(ISO)诱导的心肌细胞肥大。具有作为β
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AR抑制剂的新用途。
[0009]本专利技术通过TAC建立大鼠心肌肥大模型模拟左心室肥大疾病，通过心动超声影像、血流动力学、分子生物学和病理组织学等检测，观察SGF对心肌肥大的影响。结果发现，SGF
可显著降低大鼠血清中心肌肥大标志物氨基末端脑钠尿肽(NT
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proBNP)的含量，抵抗TAC大鼠左心室肥大，维持TAC大鼠左心室功能，明显改善TAC大鼠心肌组织肥大、炎症及纤维化。同时用β
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AR激动剂ISO诱导大鼠心肌细胞H9C2肥大，观察SGF对H9C2心肌细胞肥大的影响，结果发现，SGF可显著降低ISO诱导的H9C2细胞肥大基因表达水平。此外，通过离体血管实验发现，SGF对离体血管具有β
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AR阻滞样作用。
[0010]本专利技术采用的技术方案是：
[0011]通过主动脉弓缩窄术(TAC)建立大鼠心肌肥大模型，随机分为模型对照组、SGF高剂量组、SGF中剂量组、SGF低剂量组及阳性药组，行假手术后存活的大鼠为假手术组。灌胃给药8周观察SGF对TAC大鼠心动超声影像、血流动力学、心肌组织病理等方面的影响。结果显示，SGF可显著降低TAC大鼠血清中心肌肥大标志物NT
‑
proBNP含量，抵抗TAC引起的大鼠左心室肥大，维持TAC大鼠左心室功能，明显改善TAC大鼠心肌组织肥大、炎症及纤维化，具有抗心肌肥大作用。
[0012]本专利技术所述方法通过β
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AR激动剂ISO诱导大鼠心肌细胞H9C2建立心肌肥大细胞模型。以10μM ISO诱导H9C2细胞，加入不同浓度SGF(终浓度为31.25、62.5、125μg/mL)处理48小时，观察SGF对H9C2心肌细胞肥大的影响，结果发现，SGF可显著降低ISO诱导的H9C2细胞肥大基因ANP、BNP和β
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MHCmRNA水平。
[0013]本专利技术所述方法通过离体血管实验，分别观察SGF对氧肾上腺素(PE)、去甲肾上腺素(NE)收缩血管的影响，观察SGF联合ISO对NE收缩血管的影响，分别观察β1受体阻滞剂美托洛尔和Ca
2+
通道阻滞剂维拉帕米对SGF舒血管作用的影响。结果发现，SGF的作用与美托洛尔类似，具有β
‑
受体阻滞样的作用。
附图说明
[0014]图1是实施例4假手术组大鼠心肌组织HE染色照片(
×
400)；
[0015]图2是实施例4模型组大鼠心肌组织HE染色照片(
×
400)；
[0016]图3是实施例4土茯苓总黄酮(SGF)低剂量组大鼠心肌组织HE染色照片(
×
400)；
[0017]图4是实施例4SGF中剂量组大鼠心肌组织HE染色照片(
×
400)；
[0018]图5是实施例4SGF高剂量组大鼠心肌组织HE染色照片(
×
400)；
[0019]图6是实施例4假手术组大鼠心肌组织血管部位HE染色照片(
×
400)；
[0020]图7是实施例4模型组大鼠心肌组织血管部位HE染色照片(
×
400)；
[0021]图8是实施例4SGF低剂量组大鼠心肌组织血管部位HE染色照片(
×
400)；
[0022]图9是实施例4SGF中剂量组大鼠心肌组织血管部位HE染色照片(
×
400)；
[0023]图10是实施例4SGF高剂量组大鼠心肌组织血管部位HE染色照片(
×
400)；
[0024]图11是实施例4假手术组大鼠心肌组织Masson染色照片(
×
80)；
[0025]图12是实施例4模型组大鼠心肌组织Masson染色照片(
×
80)；
[0026]图本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.土茯苓总黄酮用于制备β肾上腺素受体抑制剂的应用。2.土茯苓总黄酮用于制备治疗心肌肥大药物的应用。3.土茯苓总黄酮用...

【专利技术属性】
技术研发人员：‑，
申请(专利权)人：浙江中医药大学，
类型：发明
国别省市：