通过遗传密码子扩展以靶蛋白选择性方式制备工程化靶蛋白的手段和方法技术

本发明专利技术涉及正交翻译系统，其允许以POI

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过遗传密码子扩展以靶蛋白选择性方式制备工程化靶蛋白的手段和方法


[0001]本专利技术涉及正交翻译系统，其允许以POI
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mRNA选择性方式将非典型氨基酸(ncAA)残基位点特异性地引入感兴趣的多肽(POI)中。具体地，本专利技术涉及融合蛋白，其使靶向RNA的多肽(RNA
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TP)区段和正交氨酰tRNA合成酶(O
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RS)区段在空间上互相接近。这通过在一个相同的融合蛋白(RNA
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TP/O
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RS融合蛋白)中组合RNA
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TP区段和O
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RS区段来实现，或通过一个或多个多肽区段的作用来实现，所述多肽区段充当“组装器”(AP)并促进包含一个或多个AP以及RNA
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TP区段或O
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RS区段的组装器融合蛋白(AFP)的局部富集，从而使所述RNA
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TP和O
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RS区段相互接近。本专利技术还涉及AFP组合和核酸分子，所述核酸分子包含POI编码序列和靶向核苷酸序列(TN)，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种组装器融合蛋白(AFP)，其包含：(a)充当组装器(AP)的至少一个第一多肽区段，其选自：(a1)源自细胞内靶向多肽的多肽区段(IC
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TP区段)，其中所述细胞内靶向多肽靶向细胞内结构元件，并因此在所述细胞内结构元件处局部富集，所述细胞内结构元件在细胞质内或与细胞质直接相邻；和(a2)源自相分离多肽的多肽区段(PSP区段)，其中所述相分离多肽具有在细胞的细胞质中进行自缔合的能力以在细胞质中产生高局部浓度的位点，以及(b)充当效应物(EP)的至少一个第二多肽区段，其选自：b1)靶向RNA的多肽(RNA
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TP)区段，和b2)正交氨酰tRNA合成酶(O
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RS)区段；其中所述多肽区段在所述AFP中功能性连接。2.一种组装器融合蛋白(AFP)组合，其包含至少两种权利要求1的AFP。3.一种融合蛋白(RNA
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TP/O
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RS融合蛋白)，其包含：(i)至少一个靶向RNA的多肽(RNA
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TP)区段；和(ii)至少一个正交氨酰tRNA合成酶(O
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RS)区段，其中所述多肽区段在所述RNA
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TP/O
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RS融合蛋白中功能性连接。4.一种核酸分子或者两种或更多种核酸分子的组合，其包含：(i)核苷酸序列，其编码至少一种权利要求1的AFP或者至少一种权利要求2的AFP组合，或(ii)与(i)的核苷酸序列互补的核酸序列，(iii)(i)和(ii)。5.一种核酸分子或者两种或更多种核酸分子的组合，其包含：(i)核苷酸序列，其编码至少一种权利要求3的RNA
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TP/O
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RS融合蛋白，或(ii)与(i)互补的核酸序列，或(iii)(i)和(ii)。6.一种表达盒，其包含权利要求4或权利要求5的核酸分子或者核酸分子的组合的核苷酸序列。7.一种表达载体，其包含至少一种权利要求6的表达盒。8.一种细胞，其包含至少一种权利要求4或权利要求5的核酸分子或者核酸分子的组合、至少一种权利要求6的表达盒或者至少一种权利要求7的表达载体。9.权利要求8的细胞，其包含核苷酸序列，所述核苷酸序列编码至少一种权利要求1的AFP或者与编码至少一种权利要求1的AFP的核苷酸序列互补，所述AFP包含(i)选自RNA
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TP区段的至少一个EP，和(ii)选自O
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RS区段的至少一个EP。10.权利要求8的细胞，其包含核苷酸序列，所述核苷酸序列编码至少两种权利要求1的AFP的组合或者与编码至少两种权利要求1的AFP的组合的核苷酸序列互补，其中所述至少两种AFP中的一种包含至少一个RNA
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TP区段，而所述至少两种AFP中的另外一种包含至少一个O
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RS区段。11.权利要求8的细胞，其包含核苷酸序列，所述核苷酸序列编码至少一种权利要求3的RNA
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TP/O
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RS融合蛋白或者与编码至少一种权利要求3的RNA
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TP/O
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RS融合蛋白的核苷酸序
列互补。12.一种制备感兴趣的多肽(POI)的方法，所述POI在其氨基酸序列中包含一种或多种非典型氨基酸(ncAA)残基，其中所述方法包括在所述一种或多种ncAA的存在下，在权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：E，
申请(专利权)人：欧洲分子生物学实验室，
类型：发明
国别省市：