一种提升苹果组培苗生根速率和根系生长效果的方法技术

本发明专利技术公开了一种提升苹果组培苗生根速率和生长效果的方法，包括如下步骤：1)腋芽的诱导：采用春季发出的腋芽接种于腋芽诱导培养基进行培养，温度24

【技术实现步骤摘要】
一种提升苹果组培苗生根速率和根系生长效果的方法


[0001]本专利技术涉及组织培养
，尤其涉及一种提升苹果组培苗生根速率和根系生长效果的方法。

技术介绍

[0002]苹果是落叶乔木，作为异花授粉植物，大部分品种自花不能结实，繁殖方法一般采用扦插、嫁接、组织培养方式。植物组织培养是近几十年来发展起来的一项无性繁殖技术，利用植物体离体器官、组织或细胞以及原生质体，在无菌和适宜的人工培养基、温度、光照灯条件下，诱导出不定芽、不定根、愈伤组织，经过扩繁增殖、生根，最后形成完整植株的技术，可在一定时间内使植物达到倍数扩增，节省大量的研究时间和繁殖珍贵植物。
[0003]草本植物的组织培养全过程相对容易，木本植物的组织培养全过程花费时间较长，诱导、增殖阶段较稳定，生根阶段培养是关键，对木本植物来说较为困难。目前有研究对试管内生根和试管外生根，采用基质培养、水培养、气雾培养和滤纸侨法等试管外生根技术被广泛应用于花卉、珍贵苗木的组织培养。
[0004]苹果常规组织培养全过程一般都在培养基内，春季腋芽处理后接种于诱导培养基，所有培养基pH 5.8，蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，121℃灭菌20min，诱导培养基为MS+BA1.0mg/ml+IAA0.2mg/ml，24
±
1℃，12h/d光照，培养40天左右。将诱导出的腋芽转接到增殖培养基上，增值培养基为MS+6
‑
BA2.5mg/L+NAA0.1mg/L，24
±
1℃，12h/d光照，每隔35
‑
40天，切下生长高度超过1cm的幼苗进行扩繁，扩繁次数不超过8代。将生长超过2cm的幼苗切下接种于生根培养基上，1/2MS+NAA0.5mg/L+IAA1.0mg/L，放置于24
±
1℃，12h/d光照，培养第20天左右开始出现愈伤组织，第25
‑
30天愈伤组织上开始出现根芽生长，培养50
‑
55天，生根率65
‑
75％左右，培养65天后可进行炼苗移栽。总时长370天左右可批量诱导培养出苹果组培苗。
[0005]然而，木本植物组织培养生根培养阶段，在培养基内，80％的组培苗根系着生于幼苗底部生长出的愈伤组织上，在炼苗清洗时极易脱落，造成无根苗，移栽无法健康生长，降低了组培苗移栽成活率，且生根培养、炼苗移栽阶段耗时65天左右时间较长，使木本组织培养投入成本居高不下。

技术实现思路

[0006]本专利技术所要解决的技术问题是提供一种苹果组培苗生根过程中，使用不同的灭菌培养基质，以提升苹果组培苗生根速率、缩短培养时间，对幼苗根系生长效果较好的方法，以解决现有技术中导致的上述多项缺陷。
[0007]为实现上述目的，本专利技术提供以下的技术方案：一种提升苹果组培苗生根速率和生长效果的方法，包括如下步骤：
[0008]1)腋芽的诱导：采用春季发出的腋芽接种于腋芽诱导培养基进行培养，温度24
±
1℃，12h/d光照，培养40
‑
45天；
[0009]2)幼苗的分化增殖培养：将诱导出的腋芽转接到增殖培养基上，12h/d光照，每隔35
‑
40天，切下生长高度超过1cm的幼苗进行扩繁，扩繁次数不超过8代；
[0010]3)幼苗的生根培养：将生长高度超过2cm的组培苗切下接种于生根培养基质上，放置于24
±
1℃，12h/d光照。
[0011]优选的，腋芽诱导培养基：MS+BA1.0
‑
1.5mg/ml+IAA0.2
‑
0.5mg/ml，pH 5.8，蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，121℃灭菌20min。
[0012]优选的，增殖培养基：MS+6
‑
BA2.5
‑
3.0mg/L+NAA0.1
‑
0.3mg/L，pH 5.8，蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，121℃灭菌20min。
[0013]优选的，生根培养基质：
[0014]1)20g椰糠+20ml生根培养液；
[0015]2)8g椰糠+2g珍珠岩+20ml生根培养液；
[0016]3)培养基1/2MS+NAA0.5
‑
1.0mg/L+IAA1.0
‑
1.5mg/L，pH 5.7
‑
5.8，蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，作为对照。
[0017]优选的，所有基质、培养基均121℃灭菌20min。
[0018]优选的，生根培养液：1/2MS+NAA0.5
‑
1.0mg/L+IAA1.0
‑
1.5mg/L，蔗糖30g/L。
[0019]采用以上技术方案的有益效果是：本专利技术提供的方法，可提升苹果组培苗生根速率，生根阶段培养第7天幼苗底部开始根系萌动，第14天60％幼苗底部根系生长，培养第30天生根率达95％，且根系长势良好，数量6根以上，幼苗高度4cm以上，可进行炼苗移栽。与常规培养基培养比较，缩短了根系萌发时间13天左右、培养时间20天左右。
附图说明
[0020]图120g椰糠+20ml培养液培养30天；
[0021]图28g椰糠+2g珍珠岩+20ml培养液培养30天；
[0022]图3培养基培养30天。
具体实施方式
[0023]下面详细说明本专利技术的优选实施方式。
[0024]本专利技术提供的方法是在苹果组培苗生根阶段，采用20g椰糠+20ml培养液、8g椰糠+2g珍珠岩+20ml培养液、培养基(对照)，作为培养基质，快速培养苹果组培苗根系萌发和生长的方法，以苹果砧木丽江山荆子组织培养为例，具体过程如下：
[0025]腋芽的诱导：采用春季发出的腋芽，清洗干净后，于超净工作台中，酒精清洗30秒，灭菌水清洗2次，0.1％升汞摇动灭菌10
‑
12分钟，无菌水清洗3
‑
4次，切成带1
‑
2个腋芽的茎段，每瓶中接种3
‑
4个，接种于腋芽诱导培养基MS+BA1.0
‑
1.5mg/ml+IAA0.2
‑
0.5mg/ml，pH 5.8，琼脂5.5g/L，蔗糖30g/L，121℃灭菌20min，放置于组培架进行培养，温度24
±
1℃，12h/d光照，培养40
‑
45天，可见腋芽萌发生长，腋芽长度超过1cm即可切下接种于分化增殖培养基中继续培养；
[0026]幼苗的分化增殖培养：将诱导出的腋芽接种到增殖培养基中继续培养，MS+6
‑
BA2.5
‑
3.0mg/L+NAA0.1
‑
0.3mg/L，pH 5.8，琼脂5.5g/L，蔗糖30g/L，121℃灭菌20min。放置于组培架继续培养，温度24
±
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提升苹果组培苗生根速率和生长效果的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)腋芽的诱导：采用春季发出的腋芽接种于腋芽诱导培养基进行培养，温度24
±
1℃，12h/d光照，培养40
‑
45天；2)幼苗的分化增殖培养：将诱导出的腋芽转接到增殖培养基上，12h/d光照，每隔35
‑
40天，切下生长高度超过1cm的幼苗进行扩繁，扩繁次数不超过8代；3)幼苗的生根培养：将生长高度超过2cm的组培苗切下接种于生根培养基质上，放置于24
±
1℃，12h/d光照。2.根据权利要求1所述的提升苹果组培苗生根速率和生长效果的方法，其特征在于，所述腋芽诱导培养基：MS+BA1.0
‑
1.5mg/ml+IAA0.2
‑
0.5mg/ml，pH5.8，蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，121℃灭菌20min。3.根据权利要求2所述的提升苹果组培苗生根速率和生长效果的方法，其特征在于，所述增殖培养基：MS+6
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄文静，杨光柱，马钧，丁仁展，郑丽萍，
申请(专利权)人：云南省农业科学院园艺作物研究所，
类型：发明
国别省市：