带有对背景信号的补偿的均相免疫测定制造技术

允许补偿样品和试剂中固有的背景信号的均相免疫测定法。均相免疫测定法用于检测对称二甲基精氨酸(SDMA)在生物样品中的存在或量的用途。用于进行该测定法的试剂和试剂盒。的用途。用于进行该测定法的试剂和试剂盒。的用途。用于进行该测定法的试剂和试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
带有对背景信号的补偿的均相免疫测定
[0001]本申请是申请日为2016年2月19日、申请号为201680011235.8、专利技术名称为“带有对背景信号的补偿的均相免疫测定”的中国专利技术专利申请的分案申请。


[0002]本公开大体上涉及允许补偿样品和试剂中固有的背景信号的均相免疫测定法。在特定实施方式中，本公开涉及均相免疫测定法用于检测对称二甲基精氨酸(SDMA)在生物样品中的存在或量的用途。

技术介绍

[0003]均相免疫测定法已被实施用于测定各种分析物，最主要是用于药物滥用的分析物。SDMA已被鉴定为在生物样品中用作用于评估例如肾功能、心血管功能和SLE的标志物。与用于药物滥用的分析物相比，SDMA通常以相对低的浓度存在于生物样品中。
[0004]因此，专利技术人已确认了在本领域对于更精确和灵敏的均相免疫测定法的需要，特别是对于在生物样品中具有低浓度的分析物，诸如SDMA。

技术实现思路

[0005]在一个方面，本公开涉及对称二甲基精氨酸(SDMA)的轭合物(conjugates)，例如SDMA和酶的轭合本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种轭合物，其包含与葡萄糖
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磷酸脱氢酶(G6PDH)轭合的对称二甲基精氨酸(SDMA)。2.如权利要求1所述的轭合物，其中所述SDMA通过5至15个原子的连接子与G6PDH轭合。3.如权利要求1所述的轭合物，其中所述SDMA通过具有约5
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15埃长度的连接子与G6PDH轭合。4.如权利要求1所述的轭合物，其选自以下：5.一种组合物，其包含如权利要求1所述的轭合物和对游离SDMA具有特异性的抗体。6.如权利要求5所述的组合物，其中所述对游离SDMA具有特异性的抗体对于不对称二甲基精氨酸(ADMA)的反应性低于其对游离SDMA的反应性的25％。7.如权利要求6所述的组合物，其中所述抗体与一种或多种选自不对称二甲基精氨酸(ADMA)、L
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精氨酸和N
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甲基精氨酸的化合物没有或基本上没有交叉反应性。8.一种试剂盒，其包含以下组分：如权利要求1所述的轭合物和对SDMA具有特异性的抗体。9.如权利要求8所述的试剂盒，还包含以下组分：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)。10.一种反应混合物，其包含如权利要求8所述的试剂盒的组分和疑似含有SDMA的样品。11.一种轭合物，其包含通过5至15个原子的连接子与酶轭合的对称二甲基精氨酸(SDMA)。12.如权利要求11所述的轭合物，其中所述连接子具有约5
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15埃的长度。13.一种组合物，其包含如权利要求11所述的轭合物和对游离SDMA具有特异性的抗体。14.如权利要求13所述的组合物，其中所述对游离SDMA具有特异性的抗体对于不对称二甲基精氨酸(ADMA)的反应性低于其对于游离SDMA的反应性的25％。15.如权利要求14所述的组合物，其中所述抗体与一种或多种选自不对称二甲基精氨酸(ADMA)、L
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精氨酸和N
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甲基精氨酸的化合物没有或基本上没有交叉反应性。16.一种试剂盒，其包含以下组分：如权利要求11所述的轭合物和对游离SDMA具有特异性的抗体。
17.如权利要求17所述的试剂盒，还包含以下组分：所述酶的底物。18.一种反应混合物，其包含如权利要求16所述的试剂盒的组分以及校准品或疑似含有游离SDMA的样品。19.一种试剂盒，其包含用于对含有分析物的样品进行测定的试剂，包含：(a)用于进行第一次测定的第一组试剂，其包括：i.包含抗分析物抗体和酶的信号产生底物的第一试剂，和ii.包含所述分析物与所述酶的轭合物的第二试剂，和(b)用于进行第二次测定的第二组试剂，包括：i.包含所述底物的第三试剂。20.如权利要求19所述的试剂盒，其中所述第二组试剂还包含含有稀释剂与缓冲剂中至少一种的第四试剂。21.如权利要求20所述的试剂盒，其中所述第四试剂还包含所述轭合物或所述酶。22.如权利要求20所述的试剂盒，其中试剂中的至少一种包含除所述轭合物的酶之外的酶的抑制剂。23.如权利要求20所述的试剂盒，其中所述第一试剂中轭合物的浓度比所述第四试剂中轭合物的浓度高约5至约150倍。24.如权利要求19所述的试剂盒，还包含标准品，所述标准品包含在已被去除所述分析物的样品溶液中稀释的已知量的所述分析物。25.如权利要求24所述的试剂盒，其中已被去除所述分析物的样品溶液是经分离的血清、经分离的血浆或经预处理的样品。26.如权利要求19所述的试剂盒，其中所述第一试剂和所述第二试剂中的至少一种还包含电子介体和染料，并且所述第三试剂还包含所述介体和所述染料，其中所述介体从所述底物接受电子并将其转移到所述染料中。27.如权利要求26所述的试剂盒，其中所述第一试剂和所述第二试剂中的至少一种包含电子介体和染料，并且所述第三试剂和所述第四试剂之一中的至少一种包含所述介体和所述染料，其中所述介体从所述底物接收电子并将其转移到所述染料。28.如权利要求19所述的试剂盒，其中所述分析物是游离对称二甲基精氨酸(SDMA)。29.如权利要求28所述的试剂盒，其中所述抗分析物抗体是对游离SDMA具有特异性的抗体。30.如权利要求29所述的试剂盒，其中所述抗体对于不对称二甲基精氨酸(ADMA)的反应性低于其对于游离SDMA的反应性的25％。31.如权利要求30所述的试剂盒，其中所述抗分析物抗体对于ADMA、L
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精氨酸和N
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甲基精氨酸没有反应性或基本上没有反应性。32.如权利要求29所述的试剂盒，其中所述酶是葡萄糖
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磷酸脱氢酶(G6PDH)。33.如权利要求32所述的试剂盒，其中所述轭合物包含通过5至15个原子的连接子与G6PDH轭合的SDMA。34.如权利要求32所述的试剂盒，其中所述轭合物包含通过具有约2至约10埃长度的连接子与G6PDH轭合的SDMA。35.如权利要求32所述的试剂盒，其中所述底物包含NAD。
36.如权利要求32所述的试剂盒，其中所述第二试剂还包含葡萄糖
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磷酸(G6P)。37.一种用于确定游离SDMA在样品中的存在或量的方法，包括：(a)使所述样品与对游离SDMA具有特异性的抗SDMA抗体、如权利要求1所述的轭合物和包含NAD的底物相接触，(b)测量NAD至NADH的转化，(c)基于NAD至NADH的转化确定SDMA在样品中的存在或量。38.如权利要求37所述的方法，其中所述测量NAD至NADH的转化包括测量NAD至NADH的转化率。39.如权利要求38所述的方法，其中所述基于NAD至NADH的转化确定SDMA在样品中的存在或量包括将NAD至NADH的转化率与标准曲线进行比较。40.如权利要求37所述的方法，其中所述测量NAD至NADH的转化包括测量NAD至NADH的转化量。41.如权利要求40所述的方法，其中所述基于NAD至NADH的转化确定SDMA在样品中的存在或量包括将NAD至NADH的转化量与标准曲线进行比较。42.如权利要求37中任一项所述的方法，其中所述样品是血清、血浆、尿液或脑
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脊髓液。43.如权利要求37中任一项所述，其中所述轭合物选自以下：44.如权利要求37所述的方法，其中所述对游离SDMA具有特异性的抗SDMA抗体对于不对称二甲基精氨酸(ADMA)的反应性低于其对于游离SDMA的反应性的25％。45.如权利要求44所述的方法，其中所述抗SDMA抗体对于ADMA、L
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精氨酸和N
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甲基精氨酸没有反应性或基本上没有反应性。46.如权利要求37的方法，其中所述SDMA通过5
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15个原子的连接子与G6PDH轭合。47.如权利要求37所述的方法，其中所述SDMA通过具有约2至约10埃长度的连接子与G6PDH轭合。48.一种用于进行分析物测定的方法，包括：(a)进行样品第一反应序列，包括：
i.通过使所述样品与抗分析物抗体、包含所述分析物和酶的轭合物以及当与所述酶相接触时产生信号的底物相接触来形成样品第一反应混合物；和ii.测量来自所述样品第一反应混合物的信号；(b)进行样品第二反应序列，包括：i.通过使所述样品与所述底物相接触而形成样品第二反应混合物...

【专利技术属性】
技术研发人员：MV耶拉米利，解宏智，DW帕奇，G法拉切，
申请(专利权)人：艾德克斯实验室公司，
类型：发明
国别省市：