肽化合物的制造方法技术

本发明专利技术的课题在于提供肽的高效率的制造方法。肽的制造方法，其包括下述工序(1)：工序(1)，使C末端羧基被活化的肽与经甲硅烷基化的氨基酸或肽在流动反应器中反应，其中，所述C末端羧基被活化的肽是使酰卤化物及式(II)表示的叔胺与式(I)表示的N

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】肽化合物的制造方法


[0001]本专利技术涉及使用流动反应器(flow reactor)的肽的新型制造方法。

技术介绍

[0002]下述方法是已知的：用氯甲酸烷基酯将肽中的C末端羧基活化，并使其与经甲硅烷基化的氨基酸或肽反应，从而一步合成羧酸游离的肽(专利文献1、2)。需要说明的是，已知的是，就使用氯甲酸烷基酯将N末端经烷氧基羰基保护的氨基酸中的C末端羧基活化的方法而言，能够稳定地取出经活化的中间体(非专利文献1、2)。另一方面，已知的是，就使用氯甲酸烷基酯将例如肽这样在N末端具有酰胺结构的氨基酸中的C末端羧基活化的方法而言，无法稳定地取出经活化的中间体，且会形成吖内酯(oxazolon)(非专利文献1)。
[0003]另外，作为与间歇式不同的反应形式，有连续式，其中，已知下述方法：使用被称为流动反应器、微型反应器的小型反应装置，在使溶液流动的同时连续地进行化学合成。已知的是，与以往实施的间歇方式相比，流动反应器使用小的反应容器进行反应，因此具有能够实现精密的温度控制及反应时间控制、混合效率也良好这样的优点(非专利文献5)。作为合成肽的例子，已知使用三光气作为缩合剂来合成二肽并使肽链向N末端方向延伸的方法(非专利文献3、4)。另外，还已知使用O
‑
(苯并三唑
‑1‑
基)
‑
N,N,N
’
,N
’‑
四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU)作为缩合剂而将肽彼此缩合的方法(专利文献3、4)。
[0004]现有技术文献
[0005]专利文献
[0006]专利文献1：日本专利第5535928号
[0007]专利文献2：美国专利第5714484号
[0008]专利文献3：日本特开2006
‑
169165号公报
[0009]专利文献4：国际公开第2007/059922号
[0010]非专利文献
[0011]非专利文献1：International Journal of Peptide and Protein Research，1988年，第31卷，第339
‑
344页
[0012]非专利文献2：Canadian Journal of Chemistry，1987年，第67卷，619
‑
624
[0013]非专利文献3：Angewandte Chemie International Edition，2014年，第53卷，851
‑
855
[0014]非专利文献4：Nature Communications，2016年，7，13429
[0015]非专利文献5：微型反应器的开发和应用(
マイクロリアクターの
開発
と
応用)，2003年，第3
‑
9页

技术实现思路

[0016]专利技术要解决的课题
[0017]本申请的专利技术人确认后发现，就专利文献1、2记载的间歇式而言，为了对羧基经活
化的肽与经甲硅烷基化的氨基酸或肽的反应中的发热进行控制，试剂的滴加耗费时间，并生成作为副产物的吖内酯而使收率降低，不适合在工业上实施。
[0018]另一方面，就非专利文献3、4记载的流动式而言，由于使用C末端被烷基保护的氨基酸，因此在使肽向C末端方向延伸的情况下，需要将C末端进行脱保护。另外，就羧基的活化而言，仅是氨基经保护的氨基酸，未对由具有酰胺键的肽末端(其容易生成吖内酯)的羧基活化带来的、向C末端侧的延伸进行研究。
[0019]另外，就专利文献3、4记载的流动式而言，得到的肽的C末端为难以脱保护的烷基酰胺，不适合于在C末端侧使肽链延伸的方法。此外，发现在实施利用HBTU将C末端羧基活化了的肽、与经甲硅烷基化的氨基酸或肽的反应时，发生由固体析出导致的流路堵塞。
[0020]此外，还发现在流动式中使用间歇式所用的三乙胺、二异丙基乙基胺作为利用氯甲酸烷基酯将羧基活化时使用的有机叔胺的情况下，反应未充分地进行。
[0021]本专利技术提供使用流动反应器使肽链从C末端侧延伸的、肽的新型制造方法。
[0022]用于解决课题的手段
[0023]本申请的专利技术人进行了深入研究，结果发现，通过使用酰卤化物和具有特定结构的有机叔胺在流动反应器中将肽的C末端羧基活化，在流动反应器中实施C末端羧基经活化的肽与经甲硅烷基化的氨基酸或肽的反应，能够解决上述课题，从而完成了本专利技术。即，本专利技术的特征如下。
[0024][1]肽的制造方法，其包括下述工序(1)，
[0025]工序(1)，使C末端羧基被活化的肽与经甲硅烷基化的氨基酸或肽在流动反应器中反应，其中，所述C末端羧基被活化的肽是使酰卤化物及式(II)表示的叔胺与式(I)表示的N
‑
保护肽在流动反应器中反应而得到的，所述经甲硅烷基化的氨基酸或肽是使式(III)表示的氨基酸或肽与甲硅烷基化剂反应而得到的，
[0026]式(I)：
[0027][化学式1][0028][0029][式中，AA1表示来自由2～20个氨基酸形成的肽的基团，P表示N末端保护基][0030]式(II)：
[0031][化学式2][0032][0033][式中，
[0034]R1、R2及R3中的1个或2个为甲基，其余为可具有取代基的脂肪族烃基，R1、R2及R3中的一个为甲基时，其余的2个可以一起形成C5‑6的亚烷基链，由此与它们所键合的氮原子一起形成6
‑
7元环，此时，该亚烷基链中的1个可以被替换为O或NR8(R8表示可具有取代基的脂肪族烃基)]，
[0035]式(III)：
[0036][化学式3][0037]H
‑
AA2‑
OH
[0038](III)
[0039][式中，AA2表示来自氨基酸或由2～20个残基形成的肽的基团]。
[0040][2]如[1]所述的肽的制造方法，其中，相对于式(I)表示的N
‑
保护肽，式(II)表示的叔胺的使用量为0.05摩尔当量至1摩尔当量，进一步使用式(IV)表示的叔胺，
[0041]式(IV)
[0042][化学式4][0043][0044][式中，
[0045]R4、R5及R6各自独立地为可具有取代基的脂肪族烃基(其中，不包括甲基)，R4、R5及R6中的2个可以形成C5‑6的亚烷基链，由此与它们所键合的氮原子一起形成6
‑
7元环，此时，该亚烷基链中的1个可以被替换为O或NR8(R8表示可具有取代基的脂肪族烃基)]。
[0046][3]如[2]所述的肽的制造方法，其中，相对于式(I)表示的N
‑
保护肽，式(IV)表示的叔胺与式(II)表示的叔胺的总使用量为1.0至10摩尔当量。
[0047][4]如[1]至[3]中任一项所述的肽的制造方法，其中，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.肽的制造方法，其包括下述工序(1)，工序(1)，使C末端羧基被活化的肽与经甲硅烷基化的氨基酸或肽在流动反应器中反应，其中，所述C末端羧基被活化的肽是使酰卤化物及式(II)表示的叔胺与式(I)表示的N
‑
保护肽在流动反应器中反应而得到的，所述经甲硅烷基化的氨基酸或肽是使式(III)表示的氨基酸或肽与甲硅烷基化剂反应而得到的，式(I)：P
‑
AA1‑
OH(I)式(I)中，AA1表示来自由2～20个氨基酸形成的肽的基团，P表示N末端保护基，式(II)：式(II)中，R1、R2及R3中的1个或2个为甲基，其余为可具有取代基的脂肪族烃基，R1、R2及R3中的一个为甲基时，其余的2个可以一起形成C5‑6的亚烷基链，由此与它们所键合的氮原子一起形成6
‑
7元环，此时，该亚烷基链中的1个可以被替换为O或NR8(R8表示可具有取代基的脂肪族烃基)，式(III)：H
‑
AA2‑
OH(III)式(III)中，AA2表示来自氨基酸或由2～20个残基形成的肽的基团。2.如权利要求1所述的肽的制造方法，其中，相对于式(I)表示的N
‑
保护肽，式(II)表示的叔胺的使用量为0.05摩尔当量至1摩尔当量，进一步使用式(IV)表示的叔胺，式(IV)中，R4、R5及R6各自独立地为可具有取代基的脂肪族烃基(其中，不包括甲基)，R4、R5及R6中的2个可以形成C5‑6的亚烷基链，由此与它们所键合的氮原子一起形成6
‑
7元环，此时，该亚烷基链中的1个可以被替换为O或NR8(R8表示可具有取代基的脂肪族烃基...

【专利技术属性】
技术研发人员：半田道玄，村濑翔太，
申请(专利权)人：日产化学株式会社，
类型：发明
国别省市：