一种快速培育花生品种的方法技术

技术编号:30973049 阅读:2 留言:0更新日期:2021-11-25 20:56
本发明专利技术提供一种快速培育花生品种的方法,属于花生新品种培育领域,从花生种子的两个子叶瓣中间剥离种胚,以种胚作为诱变材料进行等离子体诱变消毒;经表面消毒的花生种胚在无菌水中浸泡,种胚取出放入灭菌的培养皿中,剥离胚小叶,随即接种于体细胞胚诱导培养基中培养;然后在体细胞胚萌发培养基上培养;以灭菌的沙子中无菌催芽的花生种子实生苗作为砧木,体细胞胚萌发长成的小苗作为接穗嫁接,成熟后按单株收获M2代种子,然后海南加代依次收获荚果M3代种子、荚果M4代种子,海南加代收获的M4代优良单株荚果种子按株行种植,选择优良株系。本发明专利技术利用等离子体诱变与组织培养结合的技术手段,克服花生种子大,无法利用等离子体诱变技术的瓶颈。诱变技术的瓶颈。

【技术实现步骤摘要】
一种快速培育花生品种的方法


[0001]本专利技术属于花生新品种培育
,具体地说是涉及到一种快速培育花生品种的方法。

技术介绍

[0002]花生又名落花生,是唯一一种地上开花地下结果的作物,因营养丰富,具有重要的保健作用,故又称为“长生果”。花生籽仁中除含有50%左右的脂肪之外,还含有蛋白质、多种维生素、多种氨基酸,具有增强记忆、降低胆固醇、预防心脑血管病、抗氧化、润肠通便等功效。花生全身是宝,花生蔓、花生壳富含蛋白质,是很好的动物饲料。并且花生叶具有很好的催眠作用。花生在我国国民经济中占有重要的位置。培育高产、优质、专用、多抗性花生新品种对提高花生产值和增加农民收益有着重要意义。但由于花生遗传基础狭窄、多样性差,成为花生育种获得突破的瓶颈,目前北方花生品种一般都有伏花生的亲缘,而南方花生一般都有狮头企的亲缘,造成花生品种亲缘关系近,利用常规杂交育种方法培育高产、优质、专用、多抗性花生新品种难以获得突破性进展。
[0003]为了突破花生遗传基础狭窄、多样性差的瓶颈,花生育种家们试图利用诱变技术创造新种质。等离子体诱变仪是近年来制作的新型仪器,具有很好的诱变效果,并且无毒、无任何对人体有害的污染气体产生,可在普通实验室对微生物、动物、植物进行诱变处理。但离子体诱变仪的诱变处理空间小,高度矮,而花生种子大,所以无法利用等离子体进行诱变处理,也即等离子体诱变技术无法用于花生种质创制与育种。

技术实现思路

[0004]为了解决
技术介绍
的上述技术问题,本专利技术提供了一种快速培育花生品种的方法,本专利技术利用等离子体诱变与组织培养结合的技术手段,克服花生种子大,无法利用等离子体诱变技术的瓶颈,创制花生新种质,为花生育种提供材料,也为花生育种开辟新的途径;大幅增加选择群体,提高选择几率;克服突变体嵌和现象严重的问题。
[0005]为了实现上述目的,本专利技术采用了如下技术方案:一种快速培育花生品种的方法,括以下步骤:
[0006](1)从花生种子的两个子叶瓣中间剥离种胚,以种胚作为诱变材料进行等离子体诱变;
[0007](2)等离子体诱变处理后的花生种胚,进行表面消毒;
[0008](3)经表面消毒的花生种胚在无菌水中浸泡8~12小时;
[0009](4)浸泡的种胚取出,放入经高压灭菌的培养皿中,剥离胚小叶,随即接种于体细胞胚诱导培养基中进行培养;
[0010](5)接种胚小叶培养的体细胞胚诱导培养基为:MS+5~15mg/L2,4

D;
[0011](6)在体细胞胚诱导培养基上培养,胚小叶外植体开始形成体细胞胚,之后逐渐有体细胞胚形成;将存活的形成体细胞胚的胚小叶外植体转移到体细胞胚萌发培养基上培
养,诱导体细胞胚萌发成苗;
[0012](7)体细胞胚萌发培养基为:MS+4~6mg/LBAP;
[0013](8)在体细胞胚萌发培养基上培养,每4周继代培养一次,促使体细胞胚萌发成苗;当小苗长到1.5cm以上时,即可作为接穗嫁接;
[0014](9)以灭菌的沙子中无菌催芽的8~10日龄花生种子实生苗作为砧木,体细胞胚萌发长成的高1.5cm以上的小苗作为接穗,采用插接法在超净工作台中进行无菌嫁接,用封口膜包扎好嫁接口;嫁接苗在沙子中再培养3~5天,促使嫁接伤口愈合,然后移栽田间;
[0015](10)嫁接苗移栽田间前2个周注意保湿,之后按常规进行田间管理;成熟后按单株收获M2代种子;
[0016](11)收获的M2代种子按单株种成株行,以诱变亲本作为对照;
[0017](12)在M2代性状发生变异和分离的株行中,选择结果多、荚果整齐,分枝数7~10条,抗倒伏,抗叶斑病的优良单株,单独收获荚果M3代种子;
[0018](13)收获的M3代优良单株荚果种子当年11月份在海南进行加代,按株行种植,生育期观察标记出苗早、开花集中、抗倒伏能力强、株形直立的单株;次年3月份花生成熟,结合收获期选择结果多、荚果整齐,分枝数7~10条的优良单株,单独收获单株荚果M4代种子;
[0019](14)海南加代收获的M4代优良单株荚果种子按株行种植,生育期和收获期表现一致的抗倒伏能力强、株形直立、结果多、荚果整齐,分枝数7~10条的单株混收,成为入选的优良株系;
[0020](15)入选的优良株系进行产量鉴定试验;试验设置3次重复,每个重复播种1垄;收获后晒干,称重产量;选择产量高的株系晋升为品系;
[0021](16)入选的品系进行产量比较试验;试验设置3次重复,每个重复播种3垄;以当地品种区域试验对照品种或当地推广品种作为对照;成熟收获后晒干,称重产量;
[0022](17)选择产量高的品系,参加省品种区域试验,试验通过,申报国家非主要农作物品种登记;登记品种海南繁种。
[0023]作为优选,步骤(2)中,消毒方法:用70~75%的酒精浸泡20秒,再用0.1%升汞溶液侵泡8~10分钟,之后用高压灭菌的无菌水清洗3~5次。
[0024]作为优选,步骤(2)中,消毒操作在超净工作台中进行,操作用的器具需高压灭菌或酒精灯灼烧。
[0025]作为优选,步骤(4)中,每粒种子8个胚小叶,也即种子出苗时的第一对真叶,每个真叶有4个小叶,一对真叶有8个小叶,这8个小叶是由8个胚小叶发育而成。
[0026]作为优选,步骤(4)中,选用胚小叶的理由是:与幼叶或成熟叶片相比,胚小叶分化程度低,再生能力强。
[0027]作为优选,步骤(5)和步骤(7)中,调整培养基的pH5.8,在高压灭菌锅120℃灭菌20分钟。
[0028]作为优选,步骤(6)在体细胞胚诱导培养基上培养2周后,胚小叶外植体开始形成体细胞胚,之后逐渐有体细胞胚形成;由于辐照诱变作用,使部分胚小叶外植体褐化凋亡;一般适宜诱变剂量为半致死量或半再生率时的剂量,即一半外植体不能形成体细胞胚;培养4周后,将存活的形成体细胞胚的胚小叶外植体转移到体细胞胚萌发培养基上培养,诱导体细胞胚萌发成苗。
[0029]作为优选,步骤(11)中,生育期及收获期田间观察,与亲本一样、无变异和分离的株行淘汰;同一株行的单株间表现不一样、有明显分离,并且不同于诱变亲本,说明再生植株的胚性细胞为发生突变的细胞,由此再生的植株后代经自交,性状发生变异和分离;选择变异植株,再经过自交2~3代,使决定变异性状的基因纯合,创造花生新的种质资源。
[0030]作为优选,步骤(11)

(14)均为单粒播种,起垄,垄距80~100cm,每个垄上种2行,垄上小行距25~35cm,穴距16

20cm,每穴播种1粒种子。
[0031]作为优选,步骤(15)和(16)中,入选的优良株系进行产量鉴定试验以及入选的品系进行产量比较试验中播种为双粒播种,起垄,垄距80~90cm,每个垄上种2行,垄上小行距22~30cm,穴距16

20cm,每穴播种2粒种子。
[0032]本专利技术本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种快速培育花生品种的方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)从花生种子的两个子叶瓣中间剥离种胚,以种胚作为诱变材料进行等离子体诱变;(2)等离子体诱变处理后的花生种胚,进行表面消毒;(3)经表面消毒的花生种胚在无菌水中浸泡8~12小时;(4)浸泡的种胚取出,放入经高压灭菌的培养皿中,剥离胚小叶,随即接种于体细胞胚诱导培养基中进行培养;(5)接种胚小叶培养的体细胞胚诱导培养基为:MS+5~15mg/L2,4

D;(6)在体细胞胚诱导培养基上培养,胚小叶外植体开始形成体细胞胚,之后逐渐有体细胞胚形成;将存活的形成体细胞胚的胚小叶外植体转移到体细胞胚萌发培养基上培养,诱导体细胞胚萌发成苗;(7)体细胞胚萌发培养基为:MS+4~6mg/LBAP;(8)在体细胞胚萌发培养基上培养,每4周继代培养一次,促使体细胞胚萌发成苗;当小苗长到1.5cm以上时,即可作为接穗嫁接;(9)以灭菌的沙子中无菌催芽的8~10日龄花生种子实生苗作为砧木,体细胞胚萌发长成的高1.5cm以上的小苗作为接穗,采用插接法在超净工作台中进行无菌嫁接,用封口膜包扎好嫁接口;嫁接苗在沙子中再培养3~5天,促使嫁接伤口愈合,然后移栽田间;(10)嫁接苗移栽田间前2个周注意保湿,之后按常规进行田间管理;成熟后按单株收获M2代种子;(11)收获的M2代种子按单株种成株行,以诱变亲本作为对照;(12)在M2代性状发生变异和分离的株行中,选择结果多、荚果整齐,分枝数7~10条,抗倒伏,抗叶斑病的优良单株,单独收获荚果M3代种子;(13)收获的M3代优良单株荚果种子当年11月份在海南进行加代,按株行种植,生育期观察标记出苗早、开花集中、抗倒伏能力强、株形直立的单株;次年3月份花生成熟,结合收获期选择结果多、荚果整齐,分枝数7~10条的优良单株,单独收获单株荚果M4代种子;(14)海南加代收获的M4代优良单株荚果种子按株行种植,生育期和收获期表现一致的抗倒伏能力强、株形直立、结果多、荚果整齐,分枝数7~10条的单株混收,成为入选的优良株系;(15)入选的优良株系进行产量鉴定试验;试验设置3次重复,每个重复播种1垄;收获后晒干,称重产量;选择产量高的株系晋升为品系;(16)入选的品系进行产量比较试验;试验设置3次重复,每个重复播种3垄;以当地品种区域试验对照品种或当地推广品种作为对照;成熟收获后晒干,称重产量;(17)选择产量高的品系,参加省品种区域试验,试验通过,申报国家非主要农作物品种登记;登记品种海南繁种。2.根据权利要求1所述的一种快...

【专利技术属性】
技术研发人员:王晶珊刘斌
申请(专利权)人:山东青农产业发展有限公司
类型:发明
国别省市:

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