【技术实现步骤摘要】
LncRNA RXRG
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1:3在诊断或治疗甲状腺乳头状瘤方面的应用
[0001]本专利技术属于医疗研究
,具体涉及LncRNA RXRG
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1:3在诊断或治疗甲状腺乳头状瘤方面的应用。
技术介绍
[0002]甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)是常见的恶性肿瘤,近年来其发病率呈逐年上升,美国及国内数据表明甲状腺癌发病率的上升速度居所有肿瘤首位。因此,寻找高效的诊断因子,能够早期确诊癌症的发生迫在眉睫。长链非编码RNA(long non
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coding RNA,lncRNAs)是一类长度超过200nt的非编码RNA,随着研究的深入,研究者发现lncRNAs参与了诸如细胞凋亡,增殖,分化,染色体重塑等许多生理过程,且在众多肿瘤包括PTC形成及发展等过程中发挥着重要作用。LncRNA RXRG
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1:3位于1号染色体,长度为1752bp,Lan等通过基因芯片发现其在人乳头状甲状腺癌组织中表达量是急剧上升的,但 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种诊断甲状腺乳头状瘤的生物标志物,其特征在于,所述生物标志物为LncRNA RXRG
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1:3。2.根据权利要求1所述的一种诊断甲状腺乳头状瘤的生物标志物,其特征在于,LncRNA RXRG
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1:3的高表达提示甲状腺乳头状瘤的可能性。3.LncRNA RXRG
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1:3在诊断或治疗甲状腺乳头状瘤方面的应用,其特征在于,包括以下过程:S1、细胞准备:选用人来源甲状腺乳头状瘤的IHH
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4细胞株、RPMI
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1640培养基;对IHH
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4细胞株进行细胞总RNA提取和基因检测;S2、过表达实验:将IHH
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4细胞种植于六孔板中,每孔细胞种植密度一致,一孔为转染了pcDNA3.1+空质粒的空质粒对照组,一孔为转染了pcDNA3.1+
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LncRNA RXRG1:3过表达质粒的处理组;对空质粒对照组和处理组进行细胞活力检测;S3、敲降实验:将IHH
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4细胞种植于六孔板中,每孔细胞种植密度一致,一孔为对照组,一孔为转染了LncRNA RXRG1:3的特异性小干扰RNA的小干扰实验组,三对特异性siRNA序列分别如下:siRNA1:GCTAGGGTTACAAAGTATT,siRNA2:GGACATGTAACTCCTCAAT,siRNA3:GCTAACATCTTCTAGTCAA;每组三个生物学重复;对照组和小干扰实验组分别进行细胞迁移检测、细胞凋亡实验和细胞活力检测。4.根据权利要求3所述的LncRNA RXRG
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1:3在诊断或治疗甲状腺乳头状瘤方面的应用,其特征在于,所述步骤S1中,细胞总RNA提取和基因检测,具体包括以下过程:使用Invitrogen公司Trizol试剂提取IHH
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4细胞株的总RNA,再用Roche公司的逆转录试剂盒进行cDNA第一链的合成;采用Roche公司的SYBR Green Supermix来做基因表达分析,仪器为Bio
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Rad公司的iQ5Multicolor Real
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Time PCR Detection System;分析结果采用2
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Ct法计算mRNA水平;以18S看家基因来校准mRNA的水平。5.根据权利要求3所述的LncRNA RXRG
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1:3在诊断或治疗甲状腺乳头状瘤方面的应用,其特征在于,所述步骤S2或S3中的细胞迁移检测,具体包括以下过程:将处于指数生长期的各组细胞分别重新接种到Transwell小室,小室上下两个空间培养液的血清浓度不同,上层是无血清培养,下层是高血清培养;常规培养,24小时后观察不同处理的组别细胞迁移能力的差异,从而确定该L...
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