一种具有促进水稻籽粒增大作用的芡实DNA分子及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种具有促进水稻籽粒增大作用的芡实DNA分子及其应用，属于基因工程技术领域。该DNA分子容易获取，分子序列确切，分子克隆后经过简单的侵染步骤，即可得到所产籽粒较大的水稻植株。本发明专利技术首次证实了EuSAUR基因为芡植物生长过程中调控种子大小的一个关键基因；同时，基于异源表达的方法进一步证实了EuSAUR基因促进水稻籽粒增大的功能。本发明专利技术在一定程度上促进了芡实资源产业化的发展；同时也为粮食领域提供一种提高水稻籽粒大小的DNA分子。分子。分子。

【技术实现步骤摘要】
一种具有促进水稻籽粒增大作用的芡实DNA分子及其应用


[0001]本专利技术涉及一种具有促进水稻籽粒增大作用的芡实DNA分子及其应用，属于基因工程


技术介绍

[0002]芡实为睡莲科一年水生草本植物芡(Euryale ferox Salisb.)的成熟种仁，为药食同源之品。芡与水稻的食用部位均为种仁，且都属于水生作物，生长过程较为相似。所以，对水稻和芡生长和产量的调控方法也较相似。
[0003]遗传背景是调控植物生长的决定性因素之一。随着研究的深入，近年来越来越多的功能基因被挖掘出来，应用于提高作物的产量。例如：江西省农业科学院水稻研究所发现水稻中Os10g37880基因能够通过增加小穗的穗粒数增加水稻产量(CN110923245A)；武汉生物工程学院发现OsNPF5.11基因能够增加水稻的分蘖数及每株灌浆粒数，提高水稻产量(CN107056909B)；中国科学院遗传与发育生物学研究所发现了一种能够控制水稻粒长、粒重、产量和籽粒外观的基因LGY3，可以实现水稻产量和稻米品质的协同改良(CN107384937B)；中国科学院上海本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有促进水稻籽粒增大作用的芡实DNA分子，其特征在于:其核苷酸序列是序列表中的序列1。2.根据权利要求1所述的具有促进水稻籽粒增大作用的芡实DNA分子的获得方法，其特征在于：具体制备步骤如下：(1)称取新鲜幼嫩的芡植物样本，按照生工生物工程有限公司的Ezup柱式植物组织基因组DNA抽提试剂盒说明书对芡的DNA进行提取，具体步骤如下：a)将样本置于液氮中充分研磨成粉末，取适量混匀的粉末于1.5mL离心管中；b)加入600μL预热的PCB Buffer和12μL的β-巯基乙醇，震荡混匀，置于65℃水浴25min，混匀；c)加入600μL的三氯甲烷，震荡混匀，12000rpm离心1min，将上层水相转移至新的1.5mL离心管中；d)加入适量体积的BD Buffer，混匀后加入适量体积的无水乙醇，充分混匀，用移液器全部转移入吸附柱中，室温静置2min，待充分吸附后，12000rpm离心10min，倾去废液；e)向吸附柱中加入500μL的PW Solution，12000rpm离心1min，倾去废液；f)向吸附柱中加入500μL的Wash Solution，12000rpm离心1min，倾去废液；g)将吸附柱12000rpm离心2min，置于通风橱内吹干乙醇；h)将吸附柱转移入新的离心管中，加入适量TE Buffer，静置5min，可适当加热，12000rpm离心10min，收集滤液；i)分光光度计检测浓度和纯度，取1μL检OD值，OD 260/280在1.7-2.0，说明DNA质量较好，小于1.7有蛋白污染，大于2.0有RNA污染；(2)以步骤(1)中提取的DNA为模板，根据设计的引物对(引物F1为序列2，引物R1为序列3)进行PCR扩增，扩增程序如下；取5μL的PCR产物，采用1％琼脂糖凝胶，经过150V恒压电泳20min，于凝胶成像仪上对照DNA marker进行观察；反应体系和反应程序：(3)按照生工生物工程有限公司的SanPrep柱式PCR产物纯化试剂盒对PCR扩增得到的产物进行回收，具体步骤如下：a)用干净的手术刀尽可能将琼脂...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴啟南，周婧，乐巍，刘潺潺，黄志恒，
申请(专利权)人：南京中医药大学，
类型：发明
国别省市：