适用于细胞三维培养的微载体的制备方法及反应装置制造方法及图纸

本文提供了制备微载体颗粒的方法，包括在低温下让分散相液体穿过多孔板在连续相中形成液体微球，以及让液体微球内的人工合成聚合物和/或天然生物大分子在低温下进行固化反应形成颗粒物。本文还提供了制备乳液的方法、用于制备微载体颗粒的装置和工艺系统，它们可用于大规模制备乳液以及微载体颗粒。于大规模制备乳液以及微载体颗粒。于大规模制备乳液以及微载体颗粒。

【技术实现步骤摘要】
适用于细胞三维培养的微载体的制备方法及反应装置


[0001]本公开涉及微载体的制备方法和装置，尤其是可大规模制备微载体的方法和工艺系统。

技术介绍

[0002]3D TableTrix微载片(北京华龛生物科技有限公司)是为干细胞生产制备定制的新型细胞扩增载体材料。该技术产品采用创新微载体片剂设计，每片微载片重量明确、独立灭菌、即开即用，免去称量、灭菌等传统微载体所需的繁琐操作，优于基于传统微载体的细胞培养。
[0003]微载体可制备成微载片形态。微载片遇水即散成数万个弹性三维多孔微载体颗粒，分散后的弹性微载体的3D结构及物理性质与制成微载片前的微载体相比保持不变。微载体的孔隙率>90％，粒径大小可控于50-500μm区间，均一度≤100μm，且生化、物理性质可定制，实现精确可控的3D仿生培养。其原材料选用药用级别，符合临床应用标准。3D TableTrix微载片配合3DFloTrixDigest裂解液(北京华龛生物科技有限公司)等试剂可通过裂解微载体进而实现温和、无损回收细胞，无任何有害物质残留。/>[0004]鉴于本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.制备乳液的方法，包括让分散相液体从多孔板的一侧穿过所述多孔板上的多个微孔流动到所述多孔板的另一侧，同时让连续相液体在所述多孔板的所述另一侧平行于所述多孔板流动，对穿过所述多孔板的所述分散相液体进行剪切以在流动的所述连续相液体中形成液体微球。2.如权利要求1所述的方法，其中所述微孔的直径为0.1μm-500μm。3.如权利要求1所述的方法，其中所述微孔的直径为30μm-50μm。4.如权利要求1-3任一项所述的方法，其中所述乳液为油包水型乳液。5.如权利要求1-4任一项所述的方法，其中通过调整所述分散相液体和/或所述连续相液体的流速来调整所述液体微球的大小。6.制备微载体颗粒的方法，包括：1)准备分散相液体和连续相液体，其中：所述分散相液体包括人工合成聚合物和/或天然生物大分子；以及固化剂；所述连续相液体包括有机溶剂和非离子型表面活性剂；2)让所述分散相液体从多孔板的一侧穿过所述多孔板上设置的多个微孔流动到所述多孔板的另一侧，同时让所述连续相液体在所述多孔板的所述另一侧平行于所述多孔板流动，对穿过所述多孔板的所述分散相液体进行剪切以在流动的所述连续相液体中形成液体微球；3)让所述液体微球中的所述人工合成聚合物和/或天然生物大分子和所述固化剂进行反应以形成颗粒物；以及4)收集和洗涤所述颗粒物；其中步骤2)中所述连续相液体的温度不超过0℃；所述步骤3)在不超过0℃下进行2-72小时。7.如权利要求6所述的方法，其中步骤2)在包括所述多孔板的容器中进行，所述多孔板将所述容器的内部分隔为第一部分和第二部分，所述分散相液体通过所述容器上设置的与所述第一部分相通的分散相入口进入所述第一部分，并随后流动穿过所述多孔板进入所述第二部分；所述连续相液体通过所述容器上设置的与所述第二部分相通的连续相入口进入所述第二部分；所述分散相液体和所述连续相液体混合后的包含所述液体微球的混合液体通过所述容器上设置的与所述第二部分相通的容器出口离开所述容器；所述容器出口和所述连续相入口在所述容器上对侧设置。8.如权利要求6或7所述的方法，其中通过气体加压使所述分散相液体进入所述容器的第一部分并流动穿过所述多孔板；通过齿轮泵使所述连续相液体进入所述容器的所述第二部分并平行于所述多孔板流动。9.如权利要求6-8任一项所述的方法，其中步骤3)在设置有搅拌装置的罐体内进行。10.如权利要求6-9任一项所述的方法，其中步骤4)在设置有过滤装置的罐体内通过抽真空方式进行。11.如权利要求6-10任一项所述的方法，其中所述微孔的直径为0.1μm
–
500μm。12.如权利要求6-11任一项所述的方法，其中所述微孔的直径为30μm
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50μm。13.如权利要求6-12任一项所述的方法，其中相同时间内所述连续相液体的流量为所述分散相液体流量的5-20倍。
14.如权利要求6-13任一项所述的方法，其中所述人工合成聚合物选自聚乙二醇、聚乙二醇衍生物、聚乙二醇二丙烯酸酯、聚丙烯、聚苯乙烯、聚丙烯酰胺、聚乳酸、聚羟基酸、聚乳酸醇酸共聚物、聚二甲基硅氧烷、聚酸酐、聚酸酯、聚酰胺、聚氨基酸、聚缩醛、聚氰基丙烯酸酯、聚氨基甲酸酯、聚吡咯、聚酯、聚甲基丙烯酸酯、聚乙烯、聚碳酸酯和聚氧化乙烯中的至少一种。15.如权利要求6-14任一项所述的方法，其中所述天然生物大分子选自胶原、蛋白多糖、糖蛋白、明胶、明胶衍生物、甲壳素、藻酸盐、藻酸盐衍生物、琼脂、纤维蛋白原、基质胶、透明质酸、层连接蛋白和纤维连接蛋白中的至少一种。16.如权利要求6-15任一项所述的方法，其中所述有机溶剂选自氢氟醚、四氯化碳、石油醚、环己烷、液态石蜡、食用油、大豆油、橄榄油、氯仿、二氯甲烷、四氯化碳和四氯乙烯中的至少一种。17.如权利要求6-16任一项所述的方法，其中所述非离子型表面活性剂为选自失水山梨醇脂肪酸酯、脂肪酸甘油酯、月桂酸酯、烷基酚聚氧乙烯醚、高碳脂肪醇聚氧乙烯醚、司班、PO-500、单油酸酯和土温中的至少一种。18.如权利要求6-17任一项所述的方法，其中所述固化剂选自二乙烯基苯、二异氰酸酯、N-羟基琥珀酰亚胺N,N-亚甲基双丙烯酰胺、甲醛、...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘伟，鄢晓君，
申请(专利权)人：北京华龛生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：